核仁蛋白、Ki-67表達對乳腺癌病人病情發(fā)生發(fā)展的影響分析

王祥軍

乳腺癌病人的總體生存時間仍然無明顯的改善，中晚期乳腺癌病人的轉(zhuǎn)移復發(fā)率仍然較高[1-2]。核仁蛋白(PES1)是核轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白，通過提高癌細胞內(nèi)核蛋白的分裂速度，提高癌細胞紡錘體的異常分裂風險，增加了癌細胞非對稱性分裂的風險[3]；Ki-67蛋白是增殖相關(guān)調(diào)控抗原，通過誘導癌細胞的持續(xù)性自我增殖，最終促進癌細胞的自我擴增，加劇腫瘤細胞的浸潤[4]。我們選取我院病理科獲取的85例乳腺癌術(shù)后病理學標本及其癌旁組織標本，探討PES1、Ki-67的表達及其與乳腺癌的臨床病例特征關(guān)系

對象與方法

一、對象

2016年4月～2018年4月我院病理科獲取的乳腺癌術(shù)后病理學標本及其癌旁組織標本85例。年齡36～65歲，平均年齡(48.0±8.6)歲。TNM分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期28例、Ⅲ期37例；組織學分級：Ⅰ級22例、Ⅱ級29例、Ⅲ級34例；發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例；病理學類型：浸潤性導管癌75例，其他類型10例。

納入標準：(1)病人年齡19～65歲；(2)術(shù)前經(jīng)超聲、X線鉬靶檢查初步診斷，經(jīng)病理學檢查證實為乳腺癌；(3)乳腺癌標本來源于手術(shù)后病理學標本；(4)本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學倫理規(guī)定，經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準。

排除標準：非原發(fā)性腫瘤；伴有其他部位的惡性腫瘤；既往具有放化療病史；臨床資料缺失，無法進行統(tǒng)計分析。

二、方法

1.免疫組化檢查：采用免疫組化進行PES1蛋白、Ki-67蛋白的檢測。生物素標記好的二抗購自北京康泰生物，配套儀器購自南京碧云天生物公司。

2.免疫組化結(jié)果判斷：免疫組化結(jié)果判定參考文獻[4]：PES1蛋白主要定位于細胞核，Ki-67蛋白主要表達與細胞核，少量表達于細胞質(zhì)，二者的陽性著色均呈黃色、棕黃色、褐色表達。(1)根據(jù)著色強度計分：0分為無色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為褐色、黑色；(2)根據(jù)陽性細胞比例計分：陽性細胞數(shù)目所占比例≤10%為1分，陽性細胞所占比例11%～50%為2分，陽性細胞數(shù)51%～75%為3分，陽性細胞數(shù)所占比例>75%為4分。兩種積分相乘總分<3分為陰性，≥3分為陽性。

三、統(tǒng)計學方法

結(jié) 果

1.兩組標本中PES1蛋白、Ki-67蛋白陽性表達率比較見表1，圖1。結(jié)果表明，乳腺癌癌組織中PES1蛋白、Ki-67蛋白陽性表達率高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1 兩組PES1蛋白、Ki-67蛋白陽性表達率比較(例，%)

A 乳腺癌癌旁組織；B 乳腺癌組織

圖1 兩類組織中的PES1蛋白表達情況(×20)

2.乳腺癌組織中PES1蛋白、Ki-67蛋白表達的相關(guān)性見表2。結(jié)果表明，乳腺癌組織中PES1蛋白、Ki-67蛋白表達并無明顯的相關(guān)關(guān)系(Spearman秩相關(guān)系數(shù)=0.175，P>0.05)。

表2 PES1蛋白、Ki-67蛋白相關(guān)分析

3.乳腺癌PES1蛋白、Ki-67蛋白陽性表達與腫瘤特的關(guān)系見表3。結(jié)果表明，PES1蛋白在不同TNM分期、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌癌組織中表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

4.Ki-67蛋白在不同組織學分級、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌癌組織中表達比較，見表4。結(jié)果表明，Ki-67蛋白在不同組織學分級、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌癌組織中表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

討 論

乳腺導管上皮細胞的異常病變或雌激素受體敏感性上升，導致乳腺導管或者小葉來源上皮細胞病變，促進乳腺惡性腫瘤的發(fā)生[5]。乳腺癌的發(fā)病具有廣闊的基礎(chǔ)人群，不同年齡階段均具有顯著的高發(fā)態(tài)勢，特別是在長期處于精神緊張、較高精神壓力的群體中，乳腺癌的發(fā)病風險更高[6-7]。乳腺癌的病情進展速度較快，短中期內(nèi)可合并有明顯的遠處轉(zhuǎn)移。現(xiàn)階段臨床上缺乏對于乳腺癌病情評估的可靠性指標。影像學或者CT檢查能夠在乳腺癌的病情評估過程中發(fā)揮作用，但影像學檢查評估乳腺癌病情的滯后性較為明顯，其對于乳腺癌病情評估的靈敏度較低[8]。

PES1是腫瘤核蛋白調(diào)控成員，能夠通過提高癌細胞紡錘體的分裂速度，提高腫瘤細胞染色體結(jié)構(gòu)蛋白的合成水平，促進腫瘤細胞的早期發(fā)生過程。有研究認為，PES1對于腫瘤細胞結(jié)構(gòu)蛋白的轉(zhuǎn)錄翻譯的加速，能夠顯著提高腫瘤干細胞的活性，加劇腫瘤干細胞微環(huán)境的改變[9]；Ki-67是核增殖相關(guān)抗原，能夠翻譯癌細胞核DNA的復制速度，翻譯癌細胞的擴增活性或者狀態(tài)。同時Ki-67作為增殖相關(guān)因子，對于癌細胞內(nèi)不同信號通路的上調(diào)作用，能夠顯著影響到腫瘤細胞的浸潤、擴散和轉(zhuǎn)移過程[10-11]。

本文通過免疫組化檢測PES1、Ki-67的表達情況，并分析PES1、Ki-67的表達與乳腺癌的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相比于癌旁組織，在乳腺癌病人病灶組織中，PES1、Ki-67的表達陽性率均明顯的上升，差異有統(tǒng)計學意義。PES1、Ki-67高表達對乳腺癌發(fā)生發(fā)展的影響具體機制不清。一般認為，PES1、Ki-67高表達，激活癌細胞內(nèi)NF-kB信號通路，增加核轉(zhuǎn)錄因子的激活程度，最終促進癌細胞的擴增。有研究認為，在發(fā)生轉(zhuǎn)移或者中晚期乳腺癌病人中，Ki-67的蛋白陽性率可超過90%以上，同時Ki-67的表達與乳腺癌的病情具有相關(guān)性[12-13]。相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中PES1蛋白、Ki-67蛋白表達并無明顯的相關(guān)關(guān)系，表明PES1、Ki-67在影響乳腺癌病情進展的過程中并無協(xié)同作用。在發(fā)生了明顯淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或者臨床TNM分期較晚的病人中，PES1蛋白的表達陽性率上升，表明PES1的表達與乳腺癌的臨床病理特征密切相關(guān)，這主要由于PES1的表達上升，提高乳腺導管上皮細胞的黏附能力，提高腫瘤細胞對于腋窩淋巴結(jié)的黏附能力，最終促進淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征的進展[14]。但是在不同的病理類型或者組織學類型中，PES1蛋白的表達并無明顯的差異，表明PES1的表達對于乳腺癌的發(fā)生來源并無直接影響。Ki-67蛋白在不同組織學分級、是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌癌組織中有明顯的差異，組織學分級越差、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越為明顯，Ki-67蛋白的表達陽性率越高，表明Ki-67的表達與乳腺癌的臨床病理特征同樣具有密切的關(guān)系，主要由于Ki-67的表達上升能夠提高乳腺導管上皮病變細胞的浸潤能力，促進其癌細胞排列極性的紊亂，最終促進組織學分級等病理特征的惡化[15]。

綜上所述，在乳腺癌病人中，PES1、Ki-67蛋白的表達陽性率明顯的上升，PES1、Ki-67的表達與乳腺癌病人的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征密切相關(guān)。關(guān)于PES1、Ki-67蛋白在診斷乳腺癌的AUC曲線方面的價值仍然需要進一步的探討。