煤工塵肺血清細(xì)胞因子、氧化損傷水平的檢驗(yàn)分析

張宗軍，黃永順，趙 娜，黃昆潔，孫 杰

（廣東省職業(yè)病防治院，廣東 廣州 510341）

作為臨床常見的久病類型，塵肺病臨床特征表現(xiàn)為肺組織纖維化，發(fā)病群體長(zhǎng)期處于粉塵過多環(huán)境下。根據(jù)臨床檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，大多患者體外細(xì)胞培養(yǎng)、試驗(yàn)，可發(fā)現(xiàn)體內(nèi)諸多指標(biāo)發(fā)生變化，包括抗氧化系統(tǒng)、機(jī)體氧化異常，出現(xiàn)氧化損傷以及血清細(xì)胞因子異常情況，這直接造成肺組織纖維化。而其中涉及的相關(guān)指標(biāo)表現(xiàn)在多方面，如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）、轉(zhuǎn)生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）等，這些指標(biāo)均是參與肺組織纖維化的主要介質(zhì)[1]。這就要求臨床檢驗(yàn)中，對(duì)煤工塵肺病患者相關(guān)指標(biāo)引起注意。本次研究將選擇15例煤工塵肺患者、15例同期健康體檢人員為對(duì)象，分析兩組氧化損傷水平、血清細(xì)胞因子。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取醫(yī)院2019年2月至2020年9月收治的煤工塵肺患者15例，均為男性，納入觀察組，年齡34-58歲，年齡均值（48.50±4.50）歲，入院后通過X線檢查確診疾病類型，患者均為采煤工、掘進(jìn)工。選擇同期收治的15例健康體檢人員，納入對(duì)照組，年齡35-59歲，平均（49.00±4.20）歲，均為男性。所有入選對(duì)象均無腫瘤疾病、冠心病、糖尿病以及其他可能導(dǎo)致氧化損傷的疾病，且對(duì)本次研究均同意知情。基線資料兩組對(duì)比（包括性別、年齡）無明顯差異，可做比較分析。

1.2 方法

所有入選對(duì)象血液標(biāo)本采集均為晨起后空腹?fàn)顟B(tài)，抽取靜脈血3 ml，離心處理，離心10 min，離心速度保持3000 r/min，將血清分離。將采集的樣本置于4℃環(huán)境下，用于檢測(cè)。通過黃嘌吟氧化酶法，對(duì)患者超氧化物歧化酶（SOD）指標(biāo)檢測(cè)；通過硫代巴比妥酸顯色法，對(duì)丙二醛（MDA）指標(biāo)檢測(cè)；通過硝酸還原酶法，對(duì)一氧化氮（NO）指標(biāo)檢測(cè)。同時(shí)，借助ABC-ELISA法，對(duì)血清FGF指標(biāo)、TFG-β1指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)所有入選對(duì)象氧化損傷水平、血清細(xì)胞因子指標(biāo)做觀察比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

血清細(xì)胞因子水平、氧化損傷水平結(jié)果均利用計(jì)量資料描述，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理經(jīng)過軟件SPSS22.0實(shí)現(xiàn)，組間對(duì)比采用t檢驗(yàn)，P＜0.05說明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清細(xì)胞因子水平觀察比較

血清細(xì)胞因子水平指標(biāo)觀察，觀察組FGF、GF-β1水平相比對(duì)照組較高，組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 血清細(xì)胞因子水平比較（ ±s）

表1 血清細(xì)胞因子水平比較（ ±s）

組別 例數(shù) FGF（pg/ml） GF-β1（ng/ml）觀察組 30 217.20±9.80 68.50±10.45對(duì)照組 30 76.25±21.55 43.80±4.95 t/16.250 8.625 P/0.000 0.000

2.2 兩組氧化損傷水平結(jié)果觀察比較

氧化損傷水平觀察比較，觀察組MDA、NO水平明顯高于對(duì)照組，而SOD指標(biāo)觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組氧化損傷水平結(jié)果觀察比較（ ±s）

表2 兩組氧化損傷水平結(jié)果觀察比較（ ±s）

組別 例數(shù) MDA（nmol/L）NO（umol/L） SOD（U/ml）觀察組 30 17.25±4.50 128.50±42.66 24.95±4.50對(duì)照組 30 6.20±1.50 46.85±4.98 112.55±9.90 t / 6.250 14.225 21.620 P / 0.000 0.000 0.000

3 討 論

塵肺病是職業(yè)病中的常見類型，發(fā)病率近年來一直保持居高不下態(tài)勢(shì)，與矽肺同樣并列為職業(yè)病的高發(fā)疾病類型[2]。而這種塵肺病的發(fā)生，主要?dú)w因于職業(yè)活動(dòng)中，煤工長(zhǎng)期將生產(chǎn)性粉塵吸入體內(nèi)，由此引起肺內(nèi)潴留，隨疾病進(jìn)展，產(chǎn)生肺組織彌漫性纖維化情況，屬于全身性疾病[3]。從塵肺發(fā)生過程看，有多種分泌細(xì)胞、生物活性物質(zhì)參與其中，細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)受損、炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)明顯，且有纖維化形成、膠原增生表現(xiàn)，是多種因素共同作用下所產(chǎn)生的結(jié)果[4]。從塵肺病發(fā)展進(jìn)程看，隨纖維化細(xì)胞因子變化、炎癥反應(yīng)增強(qiáng)，由此引發(fā)纖維化性肺泡炎，而肺部損傷情況也由此產(chǎn)生。由于煤工塵肺患者發(fā)病后，肺部逐漸呈現(xiàn)纖維化趨勢(shì)，需要及時(shí)診斷治療，避免貽誤病情[5]。

臨床檢驗(yàn)煤工塵肺疾病中，通常選擇細(xì)胞因子指標(biāo)。關(guān)于細(xì)胞因子，屬于絲裂原性、前炎性蛋白，可釋放成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞等。這些細(xì)胞變化下，經(jīng)過聚集、分裂與增殖，引起局部炎癥反應(yīng)、損傷，纖維化的發(fā)生與發(fā)展加速[6]。近年來，許多研究報(bào)道中，為明確細(xì)胞因子在煤工塵肺中的變化，也對(duì)細(xì)胞因子生物學(xué)特性進(jìn)行分析，認(rèn)為細(xì)胞因子在激活細(xì)胞作用下不斷分泌而形成，且其中的細(xì)胞因子在作用上有多向性表現(xiàn)，同時(shí)刺激性因子影響，細(xì)胞內(nèi)若細(xì)胞因子較少，便會(huì)加速分泌[7-8]。另外，細(xì)胞因子對(duì)機(jī)體炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)也有一定作用，可使炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)或縮短[9]。因此，臨床檢驗(yàn)診斷中，可將細(xì)胞因子水平作為檢驗(yàn)依據(jù)，為臨床診療提供參考依據(jù)。

王海椒等[10]在研究中，對(duì)煤礦工人肺泡表面活性蛋白進(jìn)行分析，并對(duì)其中的細(xì)胞因子表達(dá)分析，選擇健康體檢人員68例，同煤工塵肺患者72例做對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)煤工塵肺患者各項(xiàng)指標(biāo)與健康體檢人員均有一定差異，如肺泡灌洗液內(nèi)，SPD、SPA指標(biāo)含量煤工塵肺患者較低，白細(xì)胞介素-10指標(biāo)較高，而Ⅰ型、Ⅱ性輔助性T細(xì)胞含量煤工塵肺組較高，說明煤工塵肺患者細(xì)胞因子表達(dá)變化較為明顯，雖然這些指標(biāo)與本次研究所選取的指標(biāo)不同，但在一定程度上可反映出臨床檢測(cè)中，可將細(xì)胞因子表達(dá)作為檢測(cè)的重要指標(biāo)，與本次研究結(jié)論基本一致。本次研究結(jié)果中，血清細(xì)胞因子水平指標(biāo)觀察，觀察組FGF、GF-β1水平相比對(duì)照組較高，組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明煤工塵肺患者發(fā)病血清細(xì)胞因子水平有明顯變化，相比對(duì)照組這些指標(biāo)水平均較高。如GF-β1，該指標(biāo)在膠原上調(diào)下，且受纖維粘連蛋白基因表達(dá)影響，可能出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)增多情況，且該指標(biāo)變化，蛋白酶分泌抑制劑增加，蛋白酶分泌減少，增加肺纖維化進(jìn)程。而FGF指標(biāo)，作為細(xì)胞分裂促進(jìn)因子，在成纖維細(xì)胞方面分化作用、增殖方面有明顯作用，同時(shí)加速蛋白多糖、膠原合成，最后使基質(zhì)快速合成。氧化損傷水平觀察比較，觀察組MDA、NO水平明顯高于對(duì)照組，而SOD指標(biāo)觀察組低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。可說明氧化損傷水平可用于煤工塵肺情況，如其中SOD指標(biāo)，煤工塵肺患者指標(biāo)水平較低，主要因肺部有粉塵進(jìn)入，肺泡巨噬細(xì)胞對(duì)粉塵不斷吞噬與清除，自由基反應(yīng)被激活，由此產(chǎn)生氧化肺泡巨噬細(xì)胞膜，進(jìn)而使細(xì)胞脂肪酸過氧化反應(yīng)增加。粉塵吸入量增加，氧自由基清除劑SOD有消化性減少表現(xiàn)，脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增加，最后產(chǎn)生MDA并逐漸增加。同時(shí)，受TNF炎性因子作用，mRNA表達(dá)被激活，NO合成酶水平升高，這是煤工塵肺患者機(jī)體NO指標(biāo)過高的主要原因。

綜上，氧化損傷水平、血清細(xì)胞因子等指標(biāo)變化，能夠反映出煤工塵肺病患者病情，一旦這些指標(biāo)異常，需及時(shí)就診檢查治療。