大鼠、小鼠腹腔注射的操作方法

陳毅飛　高華　盧珺　陳玲琳　戴支凱

摘 要

腹腔注射給藥是大、小鼠最常用的給藥方法之一。盡管腹腔注射的操作難度不大，但我們在教學(xué)、學(xué)生技能競賽等過程中發(fā)現(xiàn)了不少問題，如驗證性實驗得不到預(yù)期的結(jié)果、注射部位出血明顯、藥物注射到皮下等。為使初學(xué)者盡快掌握該操作技能，結(jié)合個人長期的科研和教學(xué)的經(jīng)驗，將大、小鼠腹腔注射給藥操作方法總結(jié)為：抓取提尾巴，固定頭背尾，頭低尾高位，選擇下腹部，最佳部位腹中線，緩慢30-60度角進(jìn)針，回抽針?biāo)ㄎ匆娧笸谱⑺幬铩?/p>

關(guān)鍵詞

大鼠;小鼠;腹腔注射;方法

中圖分類號： R735.7;R-332 ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457 . 2020 . 06 . 72

大鼠、小鼠是教學(xué)和科研中最常應(yīng)用的實驗動物，常用的給藥方式有灌胃、腹腔注射和尾靜脈注射等。正確、規(guī)范的給藥操作是順利進(jìn)行動物實驗研究的必備技能，也是動物倫理學(xué)的基本要求[1]。不論哪種方式給藥，均需做到：（1）給藥劑量盡可能準(zhǔn)確，（2）操作盡可能方便、流暢，（3）最大限度地減少對動物的刺激和損傷[2]。灌胃給藥操作不慎，可能損傷動物，甚至導(dǎo)致動物死亡，為此我們已對大鼠、小鼠的灌胃給藥操作[3]進(jìn)行了探討。盡管腹腔注射操作導(dǎo)致動物死亡的概率很低，網(wǎng)絡(luò)上的操作視頻和描述并不少見，但我們在教學(xué)、學(xué)生操作技能競賽等過程中發(fā)現(xiàn)了不少問題，如驗證性實驗得不到預(yù)期的結(jié)果、注射部位出血明顯、藥物注射到皮下等。為了讓初學(xué)者更好地掌握大小鼠腹腔注射的操作技能，本文對腹腔的給藥方法進(jìn)行了討論，以期對初學(xué)者有所幫助。

為規(guī)范化大鼠、小鼠的腹腔注射給藥操作方法，必須弄清每一步操作的目的是什么、有哪些可行的操作方法、為什么這樣操作以及哪種操作最優(yōu)化。本文以此思路進(jìn)行了探討。

1 大鼠、小鼠腹腔注射操作的目的

腹腔注射的目的是要將一定量的藥物注入動物的腹腔，利用腹膜及大小網(wǎng)膜血管豐富、吸收面積大、吸收能力強等特點，使得藥物快速入血。腹腔注射適合于多種刺激性小的水溶性藥物的用藥，是嚙齒類動物常用給藥途徑之一。然而，腹腔注射是一種損傷性的給藥操作方式。如何將藥物準(zhǔn)確注入腹腔、盡可能地減輕對動物的損傷和減少出血？是我們操作過程中必須思考的問題。

2 大鼠、小鼠腹腔注射操作步驟的分解

大鼠和小鼠的腹腔注射操作方法基本相同，主要區(qū)別點在于：（1）由于動物體型和力量的大小不同，小鼠的操作難度小于大鼠;（2）由于大小鼠的性情的差異，小鼠的給藥操作往往不需戴手套（從衛(wèi)生的角度，可戴一次性手套），而大鼠的操作常需要戴帆布手套。

大鼠和小鼠的腹腔注射操作大致可分解為動物的捉拿、動物的固定、動物體位的擺放、藥物的注射。每一步操作方法的選擇均應(yīng)有其選擇依據(jù)，否則該操作方法就可能是有缺陷的，甚至可能是錯誤的。本文按操作步驟逐一探討其操作過程。

3 大鼠、小鼠腹腔注射操作方法的選擇及其原因

3.1 動物的捉拿和固定

關(guān)于大小鼠的抓取和固定的操作方法及其選擇的原因，我們已在“大鼠及小鼠灌胃給藥操作方法探討”[3]一文中進(jìn)行了詳細(xì)介紹。抓取小鼠時最好戴一次性手套，抓取大鼠時最好戴帆布手套。具體的操作方法為：一只手抓取大鼠和小鼠的尾巴，將動物放在粗糙面上，另一只手的大拇指和食指抓緊動物的雙耳及耳間皮膚、中指和無名指將動物背部的皮膚壓在同側(cè)手掌上、小指壓住動物的尾巴。動物的固定要牢固，一方面可以避免操作者被動物咬害，另一方面便于給藥操作。

3.2 動物體位的擺放

大鼠和小鼠的灌胃給藥時，動物的體位通常擺放為頭高尾地位。然而，在大鼠和小鼠的腹腔注射操作時，我們推薦將動物體位擺放為頭低尾高位。其主要的依據(jù)是，這樣的體位擺放，可以讓動物游離度較大的腸道在重力的作用下向膈肌靠攏，使得下腹部相對空虛，便于我們腹腔直射給藥。反之，如果采用頭高尾地位，動物下腹腔的壓力相對較高，且腸道在重力的作用下相對緊貼下腹壁，注射針在下腹部進(jìn)針時易插入腸道，從而導(dǎo)致藥物注射失敗，這很可能是學(xué)生在驗證性實驗中得不到預(yù)期實驗結(jié)果的重要原因之一。

3.3 藥物的注射

3.3.1 藥物注射部位的選擇

注射針穿過腹部皮膚、腹壁，從而進(jìn)入腹腔，進(jìn)行腹腔藥物注射，由于腹腔吸收面積大、藥物吸收速度快等特點，常用于刺激性小的水溶性藥物的給藥，是嚙齒類動物常用給藥途徑之一。理論上講，整個腹部均可作為腹腔直射的選擇部位。然而，上腹腔內(nèi)有肝、脾等重要臟器，選擇上腹部作為腹腔注射的部位有可能傷及這些重要臟器的危險性。因此，用于腹腔注射的部位常選擇下腹部。

腹肌屬于骨骼肌，其血液循環(huán)豐富，因而損傷時易出血。在下腹部，只有腹中線沒有腹肌，因而成為腹腔注射時選擇的最佳注射部位。可見，腹腔注射操作時，最佳進(jìn)針部位為下腹部的腹中線。

值得我們注意的是，當(dāng)動物處于頭地位高位，且動物膀胱充盈尿液時，膀胱也會在重力的作用下向膈肌方向靠攏，有可能會有部分膀胱靠近下腹部的空間。為避免腹腔注射的針頭進(jìn)入膀胱，所以我們在選擇注射點時應(yīng)稍遠(yuǎn)離恥骨聯(lián)合上方。

3.3.2 注射針的進(jìn)針

腹腔注射時，如果注射針與局部皮膚間的夾角過小，針頭易進(jìn)入皮下、而不易進(jìn)入腹腔;若角度過大，且操作者進(jìn)針的力度、速度和深度把握不當(dāng)時，針尖有可能插入腸道。因此，腹腔注射時注射針頭常與局部皮膚成45°角，一般在30-60°角之間。

當(dāng)注射針頭的刺激腸道時，可通過局部反射引起腸肌蠕動，從而使腸從針頭部位自動移開。如果進(jìn)針的速度過快，針尖易插入腸管。所以，注射針進(jìn)針時宜緩慢。

此外，注射針刺入的深度也是我們需要注意的事項，一般進(jìn)針不超過1cm。如刺入過深，就容易刺破內(nèi)臟;如刺入過淺，難以刺破腹腔壁、進(jìn)入腹腔[4]。

腹腔注射時，注射針頭是否進(jìn)入腹腔，通常有兩種感受的方法：一種是視覺感受，即進(jìn)針時，進(jìn)針點局部皮膚的凹陷，針進(jìn)入腹腔后，局部皮膚的凹陷消失;另一種是持注射器的手遇到的阻力感，即進(jìn)針時感受到有阻力，進(jìn)針后的阻力感消失，通常亦可稱為落空感，常需要反復(fù)操作進(jìn)行體驗。

3.3.3 藥物的推注

關(guān)于藥物的推注，多數(shù)操作者一般沒有太多困難。但在注射藥物前，常需回抽針?biāo)ǎ_定針頭未刺入小腸、膀胱或血管后[4]，再緩慢注入藥液。

4 小結(jié)

腹腔注射是常用的嚙齒類動物的給藥方式之一，腹腔注射操作是藥學(xué)相關(guān)科研人員必須熟練掌握的實踐技能之一。為此，作者將大鼠、小鼠腹腔注射操作方法總結(jié)為：抓取提尾巴，固定頭背尾，頭低尾高位，選擇下腹部，最佳部位腹中線，緩慢30-60度角進(jìn)針的深度小于1厘米，進(jìn)針的感受為局部皮膚凹陷消失和落空感，回抽針?biāo)ㄎ匆娧笸谱⑺幬铩?/p>

參考文獻(xiàn)

[1]魏強.動物實驗中的生物安全問題[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志.2015，25（6）：75-78.

[2]買文麗，劉華，劉行海，等.灌胃和腹腔注射刺激隨時間變化對小鼠自主活動的影響[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報.2011，13（9）：201-202.

[3]戴支凱.大鼠及小鼠灌胃給藥操作方法探討[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生.2015，31（11）：1738-1740.

[4]俞玉忠，穆斌.淺談小鼠腹腔注射的方法與技巧[J].中國實用醫(yī)藥.2011，6（22）：249.