大鼠、小鼠腹腔注射的操作方法

陳毅飛　高華　盧珺　陳玲琳　戴支凱

摘 要

腹腔注射給藥是大、小鼠最常用的給藥方法之一。盡管腹腔注射的操作難度不大，但我們在教學、學生技能競賽等過程中發(fā)現(xiàn)了不少問題，如驗證性實驗得不到預期的結果、注射部位出血明顯、藥物注射到皮下等。為使初學者盡快掌握該操作技能，結合個人長期的科研和教學的經(jīng)驗，將大、小鼠腹腔注射給藥操作方法總結為：抓取提尾巴，固定頭背尾，頭低尾高位，選擇下腹部，最佳部位腹中線，緩慢30-60度角進針，回抽針栓未見血后推注藥物。

關鍵詞

大鼠;小鼠;腹腔注射;方法

中圖分類號： R735.7;R-332 ? ? ? ? ? ?文獻標識碼： A

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457 . 2020 . 06 . 72

大鼠、小鼠是教學和科研中最常應用的實驗動物，常用的給藥方式有灌胃、腹腔注射和尾靜脈注射等。正確、規(guī)范的給藥操作是順利進行動物實驗研究的必備技能，也是動物倫理學的基本要求[1]。不論哪種方式給藥，均需做到：（1）給藥劑量盡可能準確，（2）操作盡可能方便、流暢，（3）最大限度地減少對動物的刺激和損傷[2]。灌胃給藥操作不慎，可能損傷動物，甚至導致動物死亡，為此我們已對大鼠、小鼠的灌胃給藥操作[3]進行了探討。盡管腹腔注射操作導致動物死亡的概率很低，網(wǎng)絡上的操作視頻和描述并不少見，但我們在教學、學生操作技能競賽等過程中發(fā)現(xiàn)了不少問題，如驗證性實驗得不到預期的結果、注射部位出血明顯、藥物注射到皮下等。為了讓初學者更好地掌握大小鼠腹腔注射的操作技能，本文對腹腔的給藥方法進行了討論，以期對初學者有所幫助。

為規(guī)范化大鼠、小鼠的腹腔注射給藥操作方法，必須弄清每一步操作的目的是什么、有哪些可行的操作方法、為什么這樣操作以及哪種操作最優(yōu)化。本文以此思路進行了探討。

1 大鼠、小鼠腹腔注射操作的目的

腹腔注射的目的是要將一定量的藥物注入動物的腹腔，利用腹膜及大小網(wǎng)膜血管豐富、吸收面積大、吸收能力強等特點，使得藥物快速入血。腹腔注射適合于多種刺激性小的水溶性藥物的用藥，是嚙齒類動物常用給藥途徑之一。然而，腹腔注射是一種損傷性的給藥操作方式。如何將藥物準確注入腹腔、盡可能地減輕對動物的損傷和減少出血？是我們操作過程中必須思考的問題。

2 大鼠、小鼠腹腔注射操作步驟的分解

大鼠和小鼠的腹腔注射操作方法基本相同，主要區(qū)別點在于：（1）由于動物體型和力量的大小不同，小鼠的操作難度小于大鼠;（2）由于大小鼠的性情的差異，小鼠的給藥操作往往不需戴手套（從衛(wèi)生的角度，可戴一次性手套），而大鼠的操作常需要戴帆布手套。

大鼠和小鼠的腹腔注射操作大致可分解為動物的捉拿、動物的固定、動物體位的擺放、藥物的注射。每一步操作方法的選擇均應有其選擇依據(jù)，否則該操作方法就可能是有缺陷的，甚至可能是錯誤的。本文按操作步驟逐一探討其操作過程。

3 大鼠、小鼠腹腔注射操作方法的選擇及其原因

3.1 動物的捉拿和固定

關于大小鼠的抓取和固定的操作方法及其選擇的原因，我們已在“大鼠及小鼠灌胃給藥操作方法探討”[3]一文中進行了詳細介紹。抓取小鼠時最好戴一次性手套，抓取大鼠時最好戴帆布手套。具體的操作方法為：一只手抓取大鼠和小鼠的尾巴，將動物放在粗糙面上，另一只手的大拇指和食指抓緊動物的雙耳及耳間皮膚、中指和無名指將動物背部的皮膚壓在同側手掌上、小指壓住動物的尾巴。動物的固定要牢固，一方面可以避免操作者被動物咬害，另一方面便于給藥操作。

3.2 動物體位的擺放

大鼠和小鼠的灌胃給藥時，動物的體位通常擺放為頭高尾地位。然而，在大鼠和小鼠的腹腔注射操作時，我們推薦將動物體位擺放為頭低尾高位。其主要的依據(jù)是，這樣的體位擺放，可以讓動物游離度較大的腸道在重力的作用下向膈肌靠攏，使得下腹部相對空虛，便于我們腹腔直射給藥。反之，如果采用頭高尾地位，動物下腹腔的壓力相對較高，且腸道在重力的作用下相對緊貼下腹壁，注射針在下腹部進針時易插入腸道，從而導致藥物注射失敗，這很可能是學生在驗證性實驗中得不到預期實驗結果的重要原因之一。

3.3 藥物的注射

3.3.1 藥物注射部位的選擇

注射針穿過腹部皮膚、腹壁，從而進入腹腔，進行腹腔藥物注射，由于腹腔吸收面積大、藥物吸收速度快等特點，常用于刺激性小的水溶性藥物的給藥，是嚙齒類動物常用給藥途徑之一。理論上講，整個腹部均可作為腹腔直射的選擇部位。然而，上腹腔內(nèi)有肝、脾等重要臟器，選擇上腹部作為腹腔注射的部位有可能傷及這些重要臟器的危險性。因此，用于腹腔注射的部位常選擇下腹部。

腹肌屬于骨骼肌，其血液循環(huán)豐富，因而損傷時易出血。在下腹部，只有腹中線沒有腹肌，因而成為腹腔注射時選擇的最佳注射部位?？梢?，腹腔注射操作時，最佳進針部位為下腹部的腹中線。

值得我們注意的是，當動物處于頭地位高位，且動物膀胱充盈尿液時，膀胱也會在重力的作用下向膈肌方向靠攏，有可能會有部分膀胱靠近下腹部的空間。為避免腹腔注射的針頭進入膀胱，所以我們在選擇注射點時應稍遠離恥骨聯(lián)合上方。

3.3.2 注射針的進針

腹腔注射時，如果注射針與局部皮膚間的夾角過小，針頭易進入皮下、而不易進入腹腔;若角度過大，且操作者進針的力度、速度和深度把握不當時，針尖有可能插入腸道。因此，腹腔注射時注射針頭常與局部皮膚成45°角，一般在30-60°角之間。

當注射針頭的刺激腸道時，可通過局部反射引起腸肌蠕動，從而使腸從針頭部位自動移開。如果進針的速度過快，針尖易插入腸管。所以，注射針進針時宜緩慢。

此外，注射針刺入的深度也是我們需要注意的事項，一般進針不超過1cm。如刺入過深，就容易刺破內(nèi)臟;如刺入過淺，難以刺破腹腔壁、進入腹腔[4]。

腹腔注射時，注射針頭是否進入腹腔，通常有兩種感受的方法：一種是視覺感受，即進針時，進針點局部皮膚的凹陷，針進入腹腔后，局部皮膚的凹陷消失;另一種是持注射器的手遇到的阻力感，即進針時感受到有阻力，進針后的阻力感消失，通常亦可稱為落空感，常需要反復操作進行體驗。

3.3.3 藥物的推注

關于藥物的推注，多數(shù)操作者一般沒有太多困難。但在注射藥物前，常需回抽針栓，確定針頭未刺入小腸、膀胱或血管后[4]，再緩慢注入藥液。

4 小結

腹腔注射是常用的嚙齒類動物的給藥方式之一，腹腔注射操作是藥學相關科研人員必須熟練掌握的實踐技能之一。為此，作者將大鼠、小鼠腹腔注射操作方法總結為：抓取提尾巴，固定頭背尾，頭低尾高位，選擇下腹部，最佳部位腹中線，緩慢30-60度角進針的深度小于1厘米，進針的感受為局部皮膚凹陷消失和落空感，回抽針栓未見血后推注藥物。

參考文獻

[1]魏強.動物實驗中的生物安全問題[J].中國比較醫(yī)學雜志.2015，25（6）：75-78.

[2]買文麗，劉華，劉行海，等.灌胃和腹腔注射刺激隨時間變化對小鼠自主活動的影響[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報.2011，13（9）：201-202.

[3]戴支凱.大鼠及小鼠灌胃給藥操作方法探討[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生.2015，31（11）：1738-1740.

[4]俞玉忠，穆斌.淺談小鼠腹腔注射的方法與技巧[J].中國實用醫(yī)藥.2011，6（22）：249.