2014—2018 年我國5 株基因VII 型新城疫病毒的基因組特性

王靜靜，于曉慧，羅瑤瑤，李 陽，蔣文明，劉華雷，王志亮

（1.中國動物衛生與流行病學中心，山東青島 266032；2.青島易邦生物工程有限公司，山東青島 266114）

新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）強毒株感染引起的一種急性、高度接觸性禽傳染病。NDV 強毒株可導致感染禽類出現典型癥狀和病理變化，病死率可高達100%，給養禽業造成嚴重經濟損失，為此世界動物衛生組織（OIE）將其列為須通報動物疫病，我國將其列為一類動物疫病，并在《國家中長期動物疫病防治規劃（2012—2020 年）》中，將其列為優先防治的重大動物疫病。NDV 具有遺傳多樣性。根據病毒F基因序列差異，NDV可分為I 類（class I）和II 類（class II），其中I類只有1 個基因型，II 類至少有21 個基因型（I—XXI）。我國流行的NDV 強毒株主要為II 類中的基因VI 型和VII 型[1-2]。1984 年，我國臺灣地區首次發現基因VII 型NDV。隨后，該基因型毒株在我國家禽中廣泛流行，主要為基因VII.1.1 亞型。2011 年，我國在廣西野鳥中首次分離到基因VII.2 亞型NDV。國家新城疫參考實驗室監測數據顯示，2012—2018 年我國陸續在家禽中也分離到VII.2 亞型毒株。為了解我國家禽中流行的基因VII型NDV 的分子生物學特性，對2014—2018 年分離的5 株基因VII 型NDV 代表株進行了基因組測序和序列分析，以期為進一步掌握我國基因VII 型NDV 的遺傳特性以及科學防控ND 奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 病毒繁殖

SPF雞胚，購自山東省無特定病原實驗種雞場。將國家新城疫參考實驗室保存的基因VII 型NDV代表株接種9～11 日齡SPF 雞胚，72 h 后，通過血凝（HA）試驗鑒定雞胚尿囊液，將鑒定為HA 陽性的尿囊液分裝，于-80 ℃保存。

1.2 RNA 提取

用High Pure Viral RNA Kit（Roche）提取病毒RNA，并立即用于RT-PCR 擴增，或置-20 ℃保存備用。……