免疫比濁法檢驗(yàn)血漿D-二聚體在心腦血管疾病中的臨床價(jià)值體會(huì)

陳曉波 唐海妹

（如東縣中醫(yī)院，江蘇南通 226400）

在機(jī)體內(nèi)發(fā)生纖維蛋白降解之后，血漿內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生一種特異性物質(zhì)，即為D-二聚體，在血栓的形成中，纖維蛋白發(fā)揮了重要作用，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是纖維蛋白的沉淀、聚集，使得血栓逐漸形成[1-2]。臨床上檢驗(yàn)血漿D-二聚體的方法有多種，其中較為常見(jiàn)的包括膠乳凝聚法、酶聯(lián)免疫吸附法、自身紅細(xì)胞凝聚法、膠體免疫滲濾法、基于酶聯(lián)免疫法的熒光抗體檢驗(yàn)法，每種檢驗(yàn)手段各有其優(yōu)缺點(diǎn)。在選擇時(shí)，需根據(jù)院內(nèi)條件及患者狀態(tài)進(jìn)行選擇，其中，血漿D-二聚體水平的測(cè)定多通過(guò)免疫比濁法進(jìn)行，該方法通過(guò)逆向分析，可知曉患者機(jī)體內(nèi)纖維蛋白狀況。基于上述背景，本文選取200例受試者，探究免疫比濁法檢測(cè)血漿D-二聚體水平在心腦血管疾病中的臨床應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年11月至2020年9月如東縣中醫(yī)院收治的150例心腦血管疾病患者作為研究對(duì)象。分組原則為患者疾病類型的差異，共分為冠心病組、急性心肌梗死組、腦梗死組三組，每組50例。另選取同一時(shí)間段內(nèi)于如東縣中醫(yī)院體檢的健康者50例作為對(duì)照組。對(duì)照組男性26 例，女性24例；年齡41～73歲，平均年齡（57.62±5.49） 歲；冠心病組男性 27例，女性 23例；年齡42～73歲，平均年齡（57.02±5.32）歲；急性心肌梗死組男性25例，女性25例，年齡40～72歲；平均年齡（55.69±5.09）歲；腦梗死組男性26例，女性24例；年齡41～74歲，平均年齡（56.83±5.92）歲。所有患者年齡、性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合2010年制定的《臨床冠心病診斷與治療指南》中冠心?。ㄈ毖孕呐K病）診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；②腦梗死患者均經(jīng)數(shù)字減影全腦血管造影（DSA）確診；③其他：對(duì)治療及研究的配合度高；具有完善的臨床資料；除心腦血管疾病外，不合并其他會(huì)影響血漿D-二聚體水平的疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①研究中途轉(zhuǎn)院、死亡或因其他原因退出研究者；②合并患有具有傳染能力的疾病，例如：乙肝、艾滋、梅毒等；③身體合并臟器功能衰竭或是患有惡性腫瘤，身體素質(zhì)差，④存在意識(shí)障礙或精神異常情況者。

1.2 方法

三組患者均在如東縣中醫(yī)院接受治療，對(duì)四組受試者均以免疫比濁法進(jìn)行血漿D-二聚體的檢驗(yàn)。具體如下。

治療方法：三組患者在入院之后，均根據(jù)患者癥狀展開(kāi)對(duì)癥治療。冠心病組治療包括包括抗血小板聚集治療、給予患者鈣離子拮抗劑、β受體阻滯劑等；急性心肌梗死組治療包括舌下含服硝酸甘油、給予患者吸氧、指導(dǎo)患者嚼服300 mg阿司匹林、300 mg氯吡格雷等；腦梗死組治療包括腦細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)供給、促腦循環(huán)以及抗血小板聚集藥物的給予、對(duì)患者合并疾病進(jìn)行積極治療等。

檢驗(yàn)方法：此次研究的三組患者，于治療前及治療后分別進(jìn)行血漿D-二聚體的檢驗(yàn)，且治療前后的靜脈血抽取時(shí)間、抽取后保存時(shí)間盡量保持一致，健康體檢者的靜脈血采集及保存、檢驗(yàn)時(shí)間也因盡量與前三組患者保持一致，避免其他因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。提前備好一支真空采血管，并在其中置入2.9%的檸檬酸鈉，在清晨時(shí)分，所有受試者空腹的前提下，抽取其外周靜脈血2 mL并將其盡快地注入到真空采血管之中。然后將血液樣本置入離心機(jī)，以3 000 r/min的轉(zhuǎn)速持續(xù)離心15 min。離心完成之后，取出分離好的血漿部分，將血漿置于希森美康CA-1500凝血儀（試劑均為配套試劑），利用全自動(dòng)血凝儀檢驗(yàn)血漿中D-二聚體的水平。檢驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格遵守儀器要求，必須按照正確方法使用試劑，操作流程需遵守規(guī)定，同時(shí)必須做好數(shù)據(jù)的及時(shí)記錄。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比三組患者在治療前及治療后的血漿D-二聚體，同時(shí)比較三組患者治療前后與對(duì)照組受試者的血漿D-二聚體水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料和計(jì)量資料分別采用 [例（%）]、（±s）表示，用χ2、t檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組患者的血漿D-二聚體水平在治療后較之治療前均出現(xiàn)了明顯的降低情況，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與對(duì)照組受試者相比較，三組患者治療前以及治療后的血漿D-二聚體水平均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05），見(jiàn)表 1。

表1 三組患者治療前與治療后以及分別與健康組血漿D-二聚體水平的比較（μg/L）

3 討論

在健康人體內(nèi)，其血漿D-二聚體水平極其微量，但當(dāng)其血管中血栓形成，就會(huì)產(chǎn)生大量血漿D-二聚體，使其水平上升[4-5]。這是因?yàn)樵诎l(fā)生凝血時(shí)，纖維蛋白原會(huì)對(duì)凝血酶產(chǎn)生直接作用，激活機(jī)體內(nèi)的纖溶系統(tǒng)，交聯(lián)纖維蛋白降解后會(huì)在血液中遺留大量副產(chǎn)物，其中最主要的副產(chǎn)物為纖維蛋白降解產(chǎn)物碎片，該碎片間可進(jìn)行交聯(lián)，而其交聯(lián)介質(zhì)為γ鏈中的共價(jià)鍵，這會(huì)促進(jìn)形成與γ鏈相連的成對(duì)D片斷。人體發(fā)生心腦血管疾病時(shí)，會(huì)打破纖溶系統(tǒng)與凝血系統(tǒng)之間的平衡，使凝血亢奮性增加，引起血漿D-二聚體水平升高，血漿D-二聚體水平的增加反映了機(jī)體纖溶系統(tǒng)與凝血系統(tǒng)的病理性[6]。

免疫比濁法是臨床常用檢驗(yàn)方法，其原理為：使乳膠顆粒被D-二聚體單克隆抗體包裹，將此抗體與血漿樣本中的D-二聚體進(jìn)行特異性的結(jié)合，進(jìn)而讓其凝聚，增加反應(yīng)環(huán)境渾濁度，當(dāng)抗體濃度固定對(duì)反應(yīng)液濁度狀態(tài)進(jìn)行測(cè)定，以濁度—濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，間接計(jì)算出血漿D-二聚體水平[7]。相較于其他血漿D-二聚體檢測(cè)手段而言，免疫比濁法耗時(shí)少、成本低，應(yīng)用價(jià)值更高。

本文以對(duì)比手段展開(kāi)研究，結(jié)果顯示，三組患者治療前的血漿D-二聚體水平均高于對(duì)照組，治療后較治療前有明顯下降，但仍然明顯高于對(duì)照組。這是因?yàn)榛颊呤苎簝?nèi)環(huán)境的影響，即使經(jīng)過(guò)治療，其血液中仍然存在局域性的纖溶系統(tǒng)，因此血漿D-二聚體水平仍無(wú)法達(dá)到正常水平。另一方面此研究結(jié)果也表明，以免疫比濁法測(cè)定血漿D-二聚體水平對(duì)心腦血管疾患者病情的判斷有著較高的可行性。

綜上所述，以免疫比濁法檢測(cè)血漿D-二聚體水平，有著較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，可作為臨床診斷疾病的參考指標(biāo)之一。