血清可溶性PD-1水平與2型糖尿病患者并發頸動脈粥樣硬化斑塊的關系

林媛媛 鄒欣妤 黃雪梅 韋海濤

[摘要] 目的 探討血清可溶性PD-1（sPD-1）水平與2型糖尿病（T2DM）患者頸動脈粥樣硬化斑塊的關系。 方法 選擇2016年10月～2019年3月廣西壯族自治區南寧市第一人民醫院收治的T2DM患者100例，按照是否存在頸動脈粥樣硬化斑塊，將其分為斑塊組（54例）和無斑塊組（46例）。比較兩組患者一般資料、生化指標以及血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分，多因素分析采用logistic回歸分析。 結果 斑塊組收縮壓水平和吸煙、飲酒人數占比高于無斑塊組（P < 0.05）。斑塊組C反應蛋白、三酰甘油水平高于無斑塊組（P < 0.05）。斑塊組血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分高于無斑塊組（P < 0.05），且血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分呈正相關（r = 0.384，P = 0.023）。多因素logistic回歸分析顯示吸煙、飲酒、C反應蛋白、sPD-1均是T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成的獨立危險因素（P < 0.05）。ROC曲線顯示sPD-1臨界值為1.41 ng/mL，曲線下面積為0.824，敏感度為81.24%，特異性為78.79%（95%CI：0.669～0.979，P = 0.027）。 結論 血清sPD-1水平升高均可能增加T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成的風險，監測血清sPD-1水平可以用于診斷頸動脈粥樣硬化斑塊。

[關鍵詞] 2型糖尿病;頸動脈粥樣硬化斑塊;可溶性PD-1;頸動脈Crouse積分

[中圖分類號] R587.1 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-7210（2020）04（b）-0053-04

Relationship between serum soluble PD-1 level and carotid atherosclerotic plaque in type 2 diabetes mellitus patients

LIN Yuanyuan ? ZOU Xinyu ? HUANG Xuemei ? WEI Haitao

Department of Endocrinology， the First People′s Hospital of Nanning， Guangxi Zhuang Autonomous Region， Nanning， ? 530021， China

[Abstract] Objective To investigate the relationship between serum soluble PD-1 （sPD-1） level and carotid atherosclerotic plaque in type 2 diabetes mellitus （T2DM） patients. Methods From October 2016 to March 2019，100 cases with T2DM patients who admitted to the First People′s Hospital of Nanning of Guangxi Zhuang Autonomous Region were selected. According to the presence or absence of carotid atherosclerotic plaque， they were divided into plaque group （54 cases） and non-plaque group （46 cases）. General information， biochemical index and the serum sPD-1 level and carotid Crouse integral of two groups were compared. Logistic regression analysis was used for multivariate analysis. Results The systolic blood pressure level and the proportion of smoking and drinking in plaque group were higher than those in non-plaque group （P < 0.05）. The C-reactive protein， triacylglycerol levels in plaque group were higher than those in non-plaque group （P < 0.05）. Serum sPD-1 levels and carotid Crouse integral in plaque group were higher than those in non-plaque group （P < 0.05）， and serum sPD-1 level was positively correlated with carotid Crouse integral （r = 0.384， P = 0.023）. Logistic regression analysis showed that smoking， drinking， C-reactive protein and sPD-1 level were independent risk factors for carotid atherosclerotic plaque formation in T2DM patients （P < 0.05）. ROC curve analysis showed that the critical value of sPD-1 was 1.41 ng/mL， the area under the curve was 0.824， the sensitivity was 81.24%， the specificity was 78.79% （95%CI：0.669-0.979，P = 0.027）. Conclusion Serum sPD-1 level may all increase the risk of carotid atherosclerotic plaque formation in T2DM patients. Monitoring serum sPD-1 level can be used to diagnose carotid atherosclerotic plaque.

[Key words] Type 2 diabetes mellitus; Carotid atherosclerotic plaque; Soluble PD-1; Carotid Crouse integral

糖尿病是臨床最為常見的一種基礎疾病，是指因遺傳以及環境因素共同作用引發的主要表現特征為糖代謝紊亂的一組臨床綜合征[1]。糖尿病的發病率正呈逐年升高趨勢，其中2型糖尿病（T2DM）在所有糖尿病患者中占比可達80%～90%[2]。導致T2DM患者重要并發癥以及死亡的主要原因是動脈粥樣硬化，尤其是大血管動脈粥樣硬化改變可累及循環的各個動脈，包括主動脈、腦動脈、腎動脈、冠狀動脈等，臨床上動脈粥樣硬化缺乏典型的癥狀或體征[3]。關于T2DM血管并發癥的具體發病機制尚未明確，但有學者發現在動脈粥樣硬化的發生、發展過程中炎性反應可能發揮著至關重要的作用，活化的T淋巴細胞貫穿動脈粥樣硬化發展的所有階段[4]。PD-1是近年來發現的一種新型共刺激分子，其與配體PD-L結合后可能抑制T細胞的效應，在T細胞的激活以及免疫應答過程中，可溶性PD-1（sPD-1）可能通過阻斷PD-1/PD-L1負性信號通路的方式參與其中，并進一步介導動脈粥樣硬化的發生及發展過程[5]。本文研究T2DM患者血清sPD-1水平與頸動脈粥樣硬化斑塊的關系，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年10月～2019年3月廣西壯族自治區南寧市第一人民醫院（以下簡稱“我院”）收治的T2DM患者100例。其中男68例，女32例;年齡（59.44±10.85）歲;體重指數（BMI）（25.47±3.39）kg/m2;病程（11.23±1.38）年;吸煙31例;飲酒36例。按照頸動脈血管內-中膜厚度（IMT）進行分組，將其分為斑塊組54例，無斑塊組46例。所有患者均已知情同意，且本研究經我院醫學倫理委員會批準。

納入標準：①符合中國糖尿病防治指南[6]制訂的T2DM相關診斷標準;②空腹血糖水平為4.4～6.1 mmol/L，餐后2 h血糖水平為4.4～8.8 mmol/L;③可正常交流者。排除標準：①繼發性糖尿病以及1型糖尿病者;②伴有糖尿病急性并發癥者;③存在心、肝、肺等重要臟器病變者;④合并血液系統疾病、風濕免疫性疾病及惡性腫瘤疾病者;⑤妊娠期或哺乳期者;⑥存在精神疾病者;⑦正在參與其他研究者。

1.2 方法

1.2.1 頸動脈超聲檢查 ?采用Vivid7彩色多普勒超聲儀（美國GE公司），以頻率7.5～12.0 MHz的探頭進行檢查。所有患者均仰臥，頸部置于低枕上，頭部微向后仰，使頸部充分暴露。在進行一側頸部血管如頸總動脈、頸外動脈以及頸內動脈的檢查時，告知患者頭偏向對側。對頸動脈IMT進行測量，并將IMT≥1.0 mm記為頸動脈粥樣硬化斑塊[7]。

1.2.2 一般資料調查 ?采用我院自制的調查問卷對受試者的一般資料（包括年齡、性別、BMI、收縮壓、舒張壓、吸煙、飲酒等）進行統計、記錄。

1.2.3 實驗室指標檢測 ?所有患者清晨空腹，采集靜脈血10 mL，將其分為兩管，其中一管進行生化指標水平檢測，另一管則于3000 r/min離心10 min，離心半徑為12 cm，采集上層血清置于EP管內，保存于-80℃冰箱中備用，測定血清sPD-1水平。采用日立7180型自動生化分析儀（南京新惠通生物科技有限公司）檢測三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）水平;免疫比濁法檢測C反應蛋白（CRP）、纖維蛋白原（FIB）水平;高壓液相離子交換層析法檢測糖化血紅蛋白（HbA1c）水平。酶聯免疫吸附法檢測血清sPD-1水平，儀器使用貝克曼ACCESS全自動微粒子免疫化學發光分析儀（美國貝克曼庫爾特有限公司）。

1.3 觀察指標

比較兩組一般資料，生化指標水平，血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分。頸動脈中各獨立斑塊的厚度相加之后的數值記為Crouse積分，分值越高代表患者的頸動脈斑塊癥狀越嚴重[8]。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗;計數資料用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗;血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分的相關性應用Pearson分析法進行分析;logistic回歸分析T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成的影響因素。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較

兩組性別、年齡、BMI、舒張壓、糖尿病病程比較，差異無統計學意義（P > 0.05）;斑塊組收縮壓水平以及吸煙、飲酒人數占比高于無斑塊組，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組生化指標比較

斑塊組CRP、TG水平高于無斑塊組，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 兩組血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分比較

斑塊組血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分高于無斑塊組，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表3。

2.4 Pearson相關分析結果

血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分呈正相關（r = 0.384，P = 0.023）。

2.5 logistic回歸分析結果

吸煙、飲酒、CRP、sPD-1水平均為T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成的獨立危險因素（P < 0.05）。見表4。

2.6 ROC曲線結果

sPD-1臨界值為1.41 ng/mL，曲線下面積為0.824，敏感度為81.24%，特異性為78.79%（95%CI：0.669～0.979，P = 0.027）。見圖1。

3 討論

T2DM是我國最為常見的內分泌系統疾病之一，主要特點在于胰島素抵抗以及高胰島素血癥，患者長期處于高血糖狀態下易增加全身血管相關并發癥的發生風險[9-10]。而頸動脈粥樣硬化斑塊是血栓形成、發生的基礎，繼而促進心血管并發癥的發生，嚴重威脅患者的生命健康安全[11-13]。頸動脈粥樣硬化斑塊每增加0.1 mm，腦卒中的風險增加1.8倍[14-15]。研究發現[16-17]，動脈粥樣硬化的發生、發展過程可能與局部或全身炎性反應有關，活化的T淋巴細胞存在于動脈粥樣硬化的各個階段。其中共刺激分子主要存在于T細胞、B細胞和APC細胞表面，并在T細胞、B細胞的活化及機體免疫應答過程中起著調節作用。

本研究結果顯示，斑塊組收縮壓水平、吸煙、飲酒人數占比高于無斑塊組（P < 0.05），提示收縮壓水平、吸煙、飲酒均可能參與了頸動脈粥樣硬化斑塊形成。有報道顯示[18]，年齡越大，T2DM患者出現頸動脈粥樣硬化斑塊的風險越高。本研究結果卻顯示年齡與T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊無明顯相關性。原因可能和樣本量較少有關。斑塊組CRP水平高于無斑塊組，這與既往研究高度一致[19]，提示炎性反應可能在頸動脈粥樣硬化斑塊形成的過程中起著重要作用。CRP屬于臨床上應用較為廣泛的炎性反應敏感指標，其表達水平可有效反映機體炎癥狀態，炎性反應可通過釋放多種炎癥介質，對機體的免疫功能進行抑制，進而減少淋巴細胞數量，最終促進動脈粥樣硬化的進展[20]。

本研究結果顯示，斑塊組血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分高于無斑塊組，且血清sPD-1水平和頸動脈Crouse積分呈正相關（r = 0.384，P = 0.023）。提示sPD-1可能在T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成的過程中起著至關重要的作用。sPD-1可通過阻斷PD-1/PD-L1負性信號通路，減弱PD-1通路的負性調控效用，促使頸動脈斑塊形成時負性共刺激信號和正性共刺激信號的失衡，導致T細胞過度激活及促炎因子的增多，最終引起炎癥的進展以及斑塊不穩定[21-22]。logistic回歸分析發現吸煙、飲酒、CRP、sPD-1均是T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成的獨立危險因素。提示上述因素均可能與T2DM患者頸動脈粥樣硬化斑塊形成密切相關。ROC曲線結果也再次證實了對其及時監測可能有助于更好地診斷患者的臨床疾病情況。

綜上所述，sPD-1水平在發生頸動脈粥樣硬化斑塊的T2DM患者血清中表達顯著升高，其可能參與頸動脈粥樣硬化斑塊的形成過程，可能通過檢測血清sPD-1水平診斷頸動脈粥樣硬化斑塊。

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（收稿日期：2019-10-29 ?本文編輯：劉明玉）