6353 份血培養檢出病原菌的分布及耐藥性分析

何天嬌，李卓,朱鵬鵬，延婭婭，吳曉康

（1 西安交通大學第二附屬醫院，陜西 西安；2 西安醫學院第一附屬醫院，陜西 西安）

0 引言

血流感染是一種破壞血液循環，在血液中出現大量的毒素，指的是病原微生物侵入到血液中，病毒在血液中進行大量的繁殖，并將毒素大量地釋放出來，導致全身感染，出現中毒及全身的炎癥反應，導致全身多器官功能障礙綜合征，屬于嚴重的全身感染性疾病。血流感染的發生受到抗菌藥物的不合理應用及侵入性診療手段的影響，使其發生率逐漸上升。血流感染診斷的標準是進行血培養，能夠為合理應用抗生素提供依據。本文檢測本院血培養分離菌的分布情況，并分析主要病原菌的耐藥性[1]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源

選擇本院2018 年1 月至2019 年12 月臨床送檢血培養陽性資料。來源于同一患者的相同菌株不重復選擇。

1.1.2 儀器和試劑

法國生物梅里埃公司生產的BACT/ALERT3D 全自動血培養儀、VITEK-2 Compact 全自動微生物分析系統。試劑包括BACT/ALERT3D 血培養儀配套的成人需氧和厭氧血培養瓶、兒童血培養瓶。

1.1.3 藥敏質控菌株

大腸埃希菌(ATCC 25922)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)、金黃色葡萄球菌(ATCC 29213)均購自國家衛計委臨床檢驗中心。

1.2 實驗方法

1.2.1 標本采集

在采集標本時應盡量避開患者發熱狀態或是有血流感染相關危險因素時，一旦遇到應在使用抗生素治療之前，采用無菌操作方式進行采血，并將其注入到需氧和厭氧血培養瓶或兒童血培養瓶。

1.2.2 培養及鑒定

將血培養瓶置BACT/ALERT3D 血培養儀中，在溫度為35℃下進行培養，時間為5d，若沒有細菌生長則結果為陰性；若出現陽性報警應將其轉種血平板、巧克力平板，同時還需涂片進行革蘭氏染色，在危急情況下報告出結果。

1.2.3 鑒定及藥敏

菌株采用VITEK-2 Compact 分析系統進行鑒定及藥敏試驗,根據臨床實驗室標準化委員會(CLSI)2015 年標準判讀藥敏結果。所有檢測過程嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》 (第4 版)進行操作[2]。

1.3 統計學分析

對細菌的菌株構成及耐藥性進行分析，使用的軟件為WHONET5.6，該軟件為全國細菌藥監測網推薦使用。

2 結果

2.1 病原菌的分布

從2018 年1 月至2019 年12 月，本院共送檢血培養標本6353 份，從中分離出病原菌327 株，病原菌的檢出情況見表1。

表1 血培養病原菌菌種檢出情況

2.2 血培養陽性標本病原菌藥敏性結果狀況分析

2.2.1 革蘭陰性菌的耐藥率

本次研究共分離出大腸埃希菌101 株，肺炎克雷伯菌33 株，檢出碳青霉烯類耐藥腸桿菌（carbapenem resistant enterobacteriaceae，CRE）3 株，肺炎克雷伯菌、粘質沙雷氏菌與產酸克雷伯菌各1 株。其中大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出產超廣譜β-內酰胺酶的菌株分別為32.7%和45.5%；大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對美羅培南、阿米卡星、亞胺培南、替加環素和頭孢替坦的耐藥率較低，均小于5%，大腸埃希菌對哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率也小于5%，而對頭孢唑啉的耐藥率較高，均大于60%；分離出的搜優的大腸埃希菌對于亞胺培南及美羅培南均有明顯的敏感性，而肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥率為1.0%。分離出的主要腸桿菌科對常用抗菌藥物的敏感性見表2。

表2 分離出的主要腸桿菌科細菌對常用抗菌藥物的敏感性（%）

2.2.2 分離出的主要葡萄球菌屬耐藥情況

對常用抗菌藥物敏感性，凝固酶陰性葡萄球菌（coagulase negative staphylococcus，CNS）和金黃色葡萄球菌對青霉素耐藥率均高于85%，未檢出對替考拉寧、萬古霉素和替加環素耐藥的葡萄球菌；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA）檢出率為7.1%，見表3。

2.2.3 真菌藥敏結果

共檢出4 株真菌，其中2 株白色念珠菌，1 株近平滑念珠菌和1 株光滑念珠菌，其中近平滑念珠菌對兩性霉素B 和伊曲康唑耐藥，而對5-氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑敏感；其他真菌對這5 種抗真菌藥物均敏感。

3 討論

血培養作為血流感染診斷的金標準，但血液感染病原菌類型較多，且不同病原菌對抗菌藥敏感性存在顯著差異。因此，及時了解病原菌類型及藥敏性狀況，對患者臨床用藥具有重要的指導意義[3,4]。

本實驗納入本院2018 年1 月至2019 年12 月的6353份血培養標本，共分離出病原菌327 株，陽性率為5.1%，低于葉莎等[5]的報道，主要有以下幾點原因，第一，不同的科室中在進行血培養送檢時并沒有都按照雙瓶雙套進行；第二，在抽血時機上沒有把握好，發熱上升期及高峰期沒有作為抽血的最佳時機。本研究陽性標本菌群分布結果顯示：革蘭陰性菌在血液中所占的比例要比革蘭陽性菌大，與國內報道血培養病原菌的分布趨勢較為一致[6,7]，說明革蘭陰性菌感染是血液感染的主要菌群，提醒臨床醫生需加以重視，及早防范。CNS 在以往認為其沒有致病性，而近年來的研究顯示，其也為致病菌，在具備了一定條件下也會造成血流感染，若不進行及時的治療將會引發醫院獲得性血流感染的發生[8]。本研究檢出的陽性菌株中，CNS 占據了較大比重，究其原因大部分患者都有嚴重基礎疾病,機體免疫力低下并且長期應用抗菌藥物,并伴有各種插管和侵入性的操作，使得正常菌群有機可乘的進入機體引起感染,而且耐藥情況不容樂觀[9]。

表3 分離出的主要葡萄球菌對常用抗菌藥物的敏感性（%）

在耐藥性方面，革蘭陰性菌中大腸埃希菌對常用抗菌藥物存在一定的耐藥性，但對碳青霉烯類抗菌藥物（美羅培南、亞胺培南等）保持高度敏感，而肺炎克雷伯菌存在對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的菌株。近年來，臨床中應用碳青霉烯類抗菌藥物較多，檢出耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌（CRE）的概率也隨之增加，在這其中檢出最多的為耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（carbapenem resistant klebsiella pneumoniae，CRKP）。有相關的文獻顯示，肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類耐藥的主要機制之一就是攜帶KPC 和OXA23 型碳青霉烯酶基因[10]，需要積極預防耐藥株的出現。

革蘭氏陽性菌耐藥情況，從結果中可以看出CNS 對青霉素、紅霉素、苯唑西林、左旋氧氟沙星、莫西沙星耐藥率均高于60%，其中紅霉素和青霉素及苯唑西林的耐藥率均超出85%；金黃色葡萄球菌對紅霉素和青霉素的耐藥率超過70%，MRSA 檢出率在7.1%，低于胡旭姣等[11]的報道，未發現耐萬古霉素葡萄球菌,葡萄球菌對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺、達托霉素和利福平保持著極高的敏感性。

念珠菌也是醫院血流感染的主要病原菌之一，常見于免疫力低下患者和一些醫源性侵入性操作[12]。本次共檢出4株念珠菌，占比相對不高。臨床血流感染病例中，應該注意真菌感染的監測。

綜上所述，本院血培養存在陽性率低等問題，需要加強臨床科室的溝通，提高血培養送檢，定期對血流感染病原菌的分布及耐藥性進行分析，為臨床醫生經驗用藥提供依據。