沉默信息調節蛋白2在結直腸癌肝轉移患者中的表達及臨床意義探討

侯志斌 劉春艷 郭新建

【摘 要】：目的探究沉默信息調節蛋白2（SIRT2）在結直腸癌肝轉移患者中的表達及臨床意義。方法選取我院2018年6月～2019年6月收治的結直腸癌肝轉移患者56例（肝轉移組織、腫瘤原發組織、正常黏膜組織），采用免疫組織化學法檢測上述標本內SIRT2表達，并分析結直腸癌肝轉移患者不同部位標本中SIRT2表達水平、預后關系、細胞侵襲能力。結果SIRT2在正常黏膜組織中陽性率50.00%高于肝轉移組織、腫瘤原發組織14.29%、3.57%（P<0.05）;結直腸癌肝轉移患者中SIRT2低表達者生存時間短于SIRT2高表達者（P<0.05）;過表達SIRT2后結直腸癌細胞SW480侵襲能力顯著減弱。結論SIRT2在結直腸癌肝轉移患者中呈低表達，影響結直腸癌細胞浸潤能力，對評估結直腸癌肝轉移患者預后具有一定臨床價值。

【關鍵詞】：沉默信息調節蛋白2;結直腸癌;肝轉移;腫瘤原發組織

結直腸癌是臨床常見消化道惡性腫瘤，多發于中年以上人群，40～70歲人群最為多見，目前其發病率、病死率在消化道系統惡性腫瘤中僅次于食管癌、胃癌及原發性肝癌，可經血液循環、淋巴循環及直接蔓延等途徑轉移至其他組織與臟器[1]。據統計，晚期結直腸癌患者5年生存率僅19.0%，且多數死于肝轉移[2]。目前，結直腸癌發病及出現肝轉移的分子機制尚不明確，因此尋找新靶點為診療提供新思路至關重要。基于此，本研究選取結直腸癌肝轉移患者56例，旨在探究SIRT2的表達及臨床意義，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。經醫院醫學倫理委員會審批，選取三家醫院2018年6月～2019年6月收治的結直腸癌肝轉移患者56例，男31例，女25例;年齡42～85歲，平均年齡（61.58±8.54）歲;臨床分期：Ⅰ期16例、Ⅱ期18例、Ⅲ期12例，Ⅳ期10例;腫瘤分化程度：高分化14例，中分化22例，低分化20例;浸潤深度：T2 12例，T3 35例，T4 9例;淋巴結轉移：N0 18例，N1 23例，N2 15例。

1.2 選例標準

1.2.1 納入標準：經病理檢查，結合X射線鋇劑灌腸、纖維結腸鏡檢查確診為結直腸癌，伴發肝轉移;簽訂研究同意書。

1.2.2 排除標準：其他惡性腫瘤者;近期接受相關治療者;其他消化系統病變者。

1.3 方法

1.3.1 免疫組織化學染色：采集肝轉移組織、腫瘤原發組織、癌旁正常黏膜組織，常規石蠟包埋，制備石蠟切片（厚度4μm），二甲苯脫蠟、洗滌及孵育等操作解除內源性過氧化物酶活性，抗原修復及抗原封閉后，4℃一抗孵育及二抗孵育，行辣根過氧化物酶標記，DAB顯色;蘇木精染核，并脫水透明處理，中性樹膠封片，光學顯微鏡下觀察。

1.3.2 免疫組織化學染色半定量評價：陽性表達：細胞質或細胞核內產生明顯棕黃色顆粒，根據視野中著色細胞百分比評估染色程度：染色細胞占5%為0分，染色細胞占6%～25%為1分，染色細胞占26%～50%為2分，染色細胞占51%～75%為3分，染色細胞占76%～100%為4分;最終得分=細胞質陽性細胞所占百分比得分+細胞核陽性細胞所占百分比得分;評估標準：陰性：0分;弱陽性：1～4分;陽性：5～8分，其中陰性、弱陽性為陰性病例，陽性為陽性病例;由2名病理醫師在不知臨床數據情況下對染色情況進行獨立評分。

1.4 觀察指標。（1）結直腸癌肝轉移患者不同部位標本中SIRT2表達;（2）SIRT2陽性表達與預后關系;（3）SIRT2表達與結直腸癌細胞侵襲能力關系。

1.5 統計學方法。SPSS24.0處理，計量資料（）表示，t檢驗，計數資料n（%）表示，χ2檢驗，檢驗標準α=0.05。

2 結果

2.1 結直腸癌肝轉移患者不同部位標本中SIRT2表達。SIRT2在正常黏膜組織中陽性率50.00%高于肝轉移組織、腫瘤原發組織14.29%、3.57%（P<0.05），見表1。

2.2 SIRT2陽性表達與預后關系。56例患者中失訪2例;54例結直腸癌肝轉移患者中SIRT2低表達者23例，SIRT2高表達者31例，SIRT2低表達者生存時間（41.47±5.12）個月短于SIRT2高表達者（61.87±6.24）個月（t=12.797，P<0.001）。

2.3 SIRT2表達與結直腸癌細胞侵襲能力關系。結直腸癌細胞SW480轉染SIRT2蛋白質粒后過表達SIRT2，通過Transwell侵襲試驗，結果發現過表達SIRT2后，細胞SW480侵襲能力減弱;過表達SIRT2后SW480細胞內的mRNA（1.45±0.07）mmol/L高于試驗前（0.98±0.05）mmol/L（t=40.886，P<0.001）。

3 討論

結直腸癌是胃腸道中常見惡性腫瘤，其形成涉及抑癌基因失活與癌基因激活的多基因調節復雜過程，而遺傳、慢性腸道疾病、環境等因素與其發病機制密切相關。目前，手術是治療結直腸癌主要方式，但70%以上患者確診時已發展至中晚期，錯失手術時機。因此，研究早期診斷及評估預后方法，尋找新型治療靶點，實現結直腸癌肝轉移分子靶向治療已成為研究熱點。

本研究發現，SIRT2在正常黏膜組織中陽性率高于肝轉移組織、腫瘤原發組織，且SIRT2低表達者生存時間短于SIRT2高表達者（P<0.05），表明SIRT2低表達或缺失可能是結直腸癌患者進展、轉移的重要促進因素，可作為診斷結直腸癌肝轉移與評估預后指標之一。SIRT2在腫瘤侵襲中充當重要角色，相關研究發現，SIRT2能和B-catenin產生相互作用，進而抑制Wnt信號通路，且SIRT2缺失的小鼠胚胎成纖維細胞及SW480細胞遷移與侵襲能力明顯增強。本研究發現，過表達SIRT2后結直腸癌細胞SW480侵襲能力顯著減弱，表明SIRT2可通過上調B-catenin，下調MMP2表達，抑制SW480細胞侵襲，進一步證實SIRT2可能與結直腸癌肝轉移密切相關。

綜上所述，SIRT2在結直腸癌肝轉移患者中呈低表達，影響結直腸癌細胞浸潤能力，對評估結直腸癌肝轉移患者預后具有一定臨床價值。

參考文獻

譚學賢，楊嶽鑫，羅秋萍，等.四種錯配修復基因蛋白在結直腸癌中的表達及臨床意義[J].現代生物醫學進展，2017，17（23）：4514-4517.

王搏，申占龍，葉穎江，等.結直腸癌肝轉移組織中SIRT2蛋白的表達及其臨床意義[J].中華普通外科雜志，2019，34（1）：49-52.