碘伏消毒劑殺菌效果的觀察

邢羅祝 李苗苗

前言

碘伏是在我們日常生活中和醫院常用的一類消毒劑，具有廣譜殺菌作用，可殺滅細菌繁殖體、真菌、原蟲和部分病毒。一般用于皮膚黏膜的消毒，按不同的濃度可用于燙傷、陰道炎、器械浸泡的消毒等。本次實驗是以碘和C12-18脂肪醇聚氧乙烯醚絡合物為主要成分的消毒劑，有效碘含量為4.0g/L-5.0g/L。我們采用了懸液定量殺菌法進行實驗，來觀察本品的殺菌效果，結果報告如下。

1.材料與方法

1.1材料

1.1.1材料和設備 碘伏絡合劑、中和劑（1%硫代硫酸鈉+1%吐溫-80的TSB溶液）【1】、胰蛋白胨生理鹽水溶液（以下簡稱TPS）、胰蛋白胨大豆瓊脂培養基（以下簡稱TSA）、胰蛋白胨肉湯培養基（以下簡稱TSB）、沙氏葡萄糖瓊脂培養基（以下簡稱SDA）、沙氏葡萄糖液體培養基（以下簡稱SDB）恒溫水浴鍋、生物安全柜、移液槍

1.1.2 試驗菌株大腸埃希菌（CMCC（B）44102）、白色念珠菌（CMCC（F）98001）、金黃色葡萄球菌（CMCC（B）26003）以上菌種均來自北京三藥科技開發公司。

1.2 方法

1.2.1工作菌液制備 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌凍存菌分別接種到100ml的TSB中，在33℃培養箱中培養18h-24h觀察生長狀態;取白色念珠菌凍存菌接種到100ml的SDB中，在25℃培養箱中培養24h-36h觀察生長狀態。生長狀態良好的菌，放入4℃冰箱中，備用。

1.2.2 試驗菌懸液的制備 將備用的工作菌液取出，細菌接種到100ml的TSB中，在33℃培養箱中培養18h-24h;真菌接種到100ml的SDB中，在25℃培養箱中培養24h-36h。將菌液進行活菌計數，并用TPS稀釋液稀釋配制成含菌量為1×108～5×108cfu/ml。

1.2.3中和劑鑒定試驗【2】 將碘伏消毒劑稀釋到有效碘含量為2.0g/L-2.5g/L。試驗菌懸液、培養基（細菌用TSA培養基、真菌用SDA培養基）、培養時間不同外，其他試驗條件均相同。試驗組如下。

試驗結果符合符合以下全部條件，所測中和劑可判為合格：第1組無試驗菌，或僅有極少數試驗菌菌落生長;第2組較第1組為多，但較第3、4、5組為少的試驗菌菌落生長。3、4、5 組菌數在 1×107 ～ 5×107cfu/ml之間，且組間菌數誤差率≦15%;第6組無菌生長，連續3次重復試驗結果一致，表明使用中和劑及其使用濃度適宜【2】。實驗結果見表1。

1.2.4懸液定量殺菌試驗【2】 取0.5ml菌液加入4.5mlTPS稀釋液中將菌懸液濃度稀釋到1×108 ～ 5×108cfu/ml之間（實際稀釋到1×107 ～ 5×107cfu/ml）。消毒劑的濃度為2.0g/L-2.5g/L。試驗菌懸液、培養基（細菌用TSA、真菌用SDA）、培養時間不同外，其他試驗條件均相同。實驗分組如下。

（1）取0.5ml試驗菌懸液加入4.5ml的碘伏溶液中分別作用30s、60s、90s，取出0.5ml反應液加到4.5ml的中和劑中，作用10min，取1.0ml接種培養（細菌33℃培養18h-24h，真菌25℃培養24h-36h），每個時間段平行兩組。

（2）陽性對照組：用TPS稀釋液代替碘伏消毒劑，進行平行試驗，平行兩組。

（3）取0.5ml試驗菌液于平皿中，倒入同批次的培養基進行培養，觀察菌落生長狀態。

（4）取0.5ml試驗菌液到4.5ml的中和劑中，混勻。取1.0ml接種到培養基中培養，觀察中和劑中的生長狀態。

（5）大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌在33℃培養18h-24h觀察;白色念珠菌在25℃培養24h-36h觀察。

（6）計算各組的活菌濃度（cfu/ml），換算為對數值（N），并按下式計算殺滅對數值：

殺滅對數值（KL）=對照組平均活菌濃度的對數值（No）-實驗組活菌濃度的對數值（Nx）

試驗結果見表2。

2.結果

2.1中和劑鑒定試驗結果

中和劑鑒定實驗結果表明，用含有1%的硫代硫酸鈉、1%的吐溫-80的TSB溶液做中和劑，其結果符合中和劑的測試結果判定：1組無菌生長;2組生長菌落遠高于1組菌落;3組，4組，5組間菌數誤差率等于11.95%。所以可用1%的硫代硫酸鈉、1%的吐溫-80的TSB溶液做中和劑來進行定量殺菌試驗。

2.2 ?懸液定量殺菌試驗結果

試驗結果表明，用含有效碘4.0g/L-5.0g/L的碘伏消毒液對懸液內大腸埃希菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌不同作用時間的平均殺滅對數分別為7.26，6.05，7.23。

3. 討論

消毒是切斷傳染病和感染性疾病傳播途徑的重要手段，其中化學消毒劑的使用是最簡便、最普遍、也是最有效的方法之一，但每次重大傳染病流行期間化學消毒劑是使用最多的，很多人對于消毒劑的選擇也是盲目的。林立旺等提出疫情防控的消毒劑應具備有效、供應量大、廉價、使用方便、相對毒性較小等特點，不具有這些特點的可不予考慮。符合這些特點的消毒劑一般有過氧乙酸、過氧化氫、二氧化氯、含氯消毒劑和酒精，但是酒精可以用于局部消毒，因屬于易燃易爆所以不可以大面積噴灑，也不建議用于口罩表面消毒，會導致口罩降低或喪失過濾效果，碘類消毒劑則更多用于皮膚黏膜的消毒【5】。

碘伏是一種碘與表面活性劑為載體和助溶劑而形成的不定型絡合物，單方碘類消毒劑主要有聚醇醚碘和聚維酮碘兩大類為主。聚維酮碘是聚乙烯吡咯烷酮與碘的絡合物，聚維酮碘是唯一被中國、英國、美國和日本等國藥典收載，并準許用于醫療衛生和人體消毒的碘伏。聚維酮碘對皮膚刺激性小，毒性低，作用持久，使用安全簡便。聚醇醚碘是以壬基酚聚氧乙烯醚或脂肪醇聚氧乙烯醚作為載體與碘絡合而成的碘伏消毒液。試驗證明，聚醇醚碘的化學穩定性優于聚維酮碘【6】。

在本次實驗中的碘伏為碘和C12-18脂肪醇聚氧乙烯醚絡合物為主要有效成分的消毒液，在實驗中該碘伏在30s和90s對大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌的殺滅效果無差異。實驗得出該碘伏對細菌和真菌都具有較強的殺滅能力。

參考文獻

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