百菌清雜質六氯苯和十氯聯苯的分析方法研究

宋 輝

（江蘇新河農用化工有限公司，江蘇新沂 221400）

六氯苯和十氯聯苯是在百菌清生產過程中形成的氯化雜質，屬于持久性的很難被降解的有機污染物，易于在生物體內和環境中積累，并且是一種對人體有害的能夠致癌的有害物質。國際糧農組織FAO標準將百菌清中雜質六氯苯和十氯聯苯的含量進行控制，并且對其含量要求越來越嚴格。國家標準（GB/T 9551-2017）規定采用液相色譜法對六氯苯和十氯聯苯的含量同時進行測定，但該方法檢測靈敏度較低，百菌清中低含量的六氯苯和十氯聯苯的含量無法準確定量。本方法采用靈敏度更高、選擇性更好的氣質聯用技術對百菌清雜質六氯苯的含量進行分析測定。

1 實驗部分

1.1 儀器

氣質聯用色譜儀：Agilent 7890B/5977B氣質聯用色譜儀，MassHunter工作站，萬分之一分析天平，超聲波振蕩器。

1.2 試劑

六氯苯標樣：已知質量分數≥99.0%；十氯聯苯標樣：已知質量分數≥98.5%；甲苯：色譜純，分析無干擾物。

1.3 色譜操作條件

色譜柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；溶劑延遲：5min；程序升溫：初始溫度60℃（1min），40℃/min 升溫至180℃，20℃/min 升溫至280℃（3min）；進樣體積：1.0μL；柱流量：1mL/min；分流比：30∶1；離子源：EI；采集模式：SIM；進樣溫度：220℃；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；傳輸線溫度：280℃；碰撞能量：70eV。

1.4 實驗步驟

1.4.1 標樣溶液配制

標準儲備溶液：分別稱取六氯苯標樣和十氯聯苯標樣0.01g（準確至0.000 1g）于100mL容量瓶中，加甲苯溶解，并稀釋至刻度，搖勻。

標準溶液：用移液管移取上述0.4ml的溶液A于100mL容量瓶中。加入甲苯稀釋至刻度，搖勻。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取試樣約0.2g（準確至0.000 1g）于10mL容量瓶中，加甲苯溶解，并稀釋至刻度，搖勻。

1.4.3 測定方法

在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，計算各針響應值，直至相鄰兩針的響應值變化小于5.0%，按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的進樣順序進行測定。

1.5 計算

將測得的兩針試樣溶液中的六氯苯/十氯聯苯的峰面積和試樣前后的兩針標樣溶液中六氯苯/十氯聯苯峰面積分別進行平均，試樣中六氯苯/十氯聯苯的含量X(μg/g)按下式計算：

式中：A1為標樣溶液中的六氯苯/十氯聯苯峰面積的平均值；A2為試樣溶液中的六氯苯/十氯聯苯峰面積的平均值；m1為標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；w為標準樣品中六氯苯/十氯聯苯的質量分數，%。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

百菌清原藥中雜質組分多且沸點范圍寬，在滿足六氯苯與其他雜質有效分離的同時，盡量縮短十氯聯苯的流出時間，是本方法色譜條件選擇的關鍵。通過多次實驗，最終選擇DB-5MS毛細管柱（30m×0.25mm×0.25μm），并通過調整氣相色譜程序升溫，使六氯苯達到最大程度分離的同時，十氯聯苯也在適宜的時間流出。

2.2 質譜條件的選擇

對六氯苯和十氯聯苯的定性分析采用全掃描模式（Scan），在全掃描方式下獲得六氯苯、十氯聯苯的總離子流譜圖，定量測定采用選擇離子模式（SIM）。本方法選擇相對豐度強，碎片離子質量較大，且相互干擾少的特征離子進行SIM檢測。對于六氯苯，以m/z 283.8作為定量離子時，由于樣品基質對其干擾較大，故選擇豐度較次之的m/z 285.8離子作為六氯苯檢測的定量離子；對于十氯聯苯，選擇豐度強且無干擾的m/z 497.7和499.7作為定量離子。

2.3 方法的線性相關性

分別配成0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.6μg/mL的6個不同濃度的六氯苯、十氯聯苯混合標樣溶液。按上述色譜條件分別進樣，以質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標建立標準曲線。結果表明，在濃度范圍內，六氯苯標準溶液濃度和吸收峰面積之間有良好的線性關系，回歸方程為y=15 666x+17.072，相關系數r=0.999 2，線性相關圖（圖1）。十氯聯苯苯標準溶液濃度和吸收峰面積之間有良好的線性關系，回歸方程為y=13 305x-1.810 8，相關系數r=0.999 4，線性相關圖（圖2）。

2.4 方法的精密度試驗

分別稱取6個平行試樣（準確至0.000 1g），測得百菌清中雜質六氯苯的含量為0.025μg/g，相對標準偏差為0.15%，變異系數為6.0%，具體數據見表1。

圖1 六氯苯線性相關性圖

圖2 十氯聯苯線性相關性圖

表1 百菌清中雜質六氯苯和十氯聯苯含量精密度測定結果

2.5 方法準確度的測定

在已知含量的樣品中，分別加入不同體積的的六氯苯和十氯聯苯混合標樣溶液，按照上述方法進行6次加標回收率的測定。結果表明，六氯苯的回收率為99.56%～100.63%，平均回收率為100.01%，十氯聯苯的回收率為99.02%～100.47%，平均回收率為99.77%，結果見表2。

表2 百菌清中雜質六氯苯和十氯聯苯含量準確度測定結果

3 結論

本方法的準確度和精密度較高，線性關系良好，且分離效果也能滿足產品的檢驗要求，可適用于百菌清中雜質六氯苯和十氯聯苯的含量控制檢測。