化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法對(duì)HBV感染者血清乙肝標(biāo)志物的檢測(cè)效果比較

焦陽(yáng)，李靖

(確山縣人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 駐馬店 463200)

乙型肝炎為常見(jiàn)病毒性肝炎，由乙型肝炎病毒(HBV)感染所致，可引發(fā)肝硬化、肝癌等并發(fā)癥，嚴(yán)重危害患者健康，故臨床應(yīng)選擇科學(xué)檢測(cè)方式，早期診斷，積極防治。HBV感染后，機(jī)體免疫系統(tǒng)會(huì)發(fā)生特異性反應(yīng)，血清乙肝抗原及抗體水平明顯改變，準(zhǔn)確測(cè)定HBV感染者血清學(xué)指標(biāo)對(duì)早期診斷、評(píng)估預(yù)后有重要價(jià)值[1]。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)和化學(xué)發(fā)光免疫分析法(chemilumineseent immunoassay，CLIA)均為常用血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)方式，其檢測(cè)效果存在一定差異，各有優(yōu)缺點(diǎn)。本研究選取60例HBV感染者，探討ELISA、CLIA的檢測(cè)效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年10月至2019年11月于確山縣人民醫(yī)院就診的60例HBV感染者為研究對(duì)象，其中女26例，男34例，年齡25～68歲，平均(46.73±10.54)歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)HBV病毒標(biāo)記物、肝功能檢查確診，符合《慢性乙型肝炎中醫(yī)診療指南》[2]診斷標(biāo)準(zhǔn)；②納入者對(duì)本研究知情，簽署同意書(shū)。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心、肺、腎等器官功能障礙；②合并肝硬化、酒精性肝炎、其他病毒感染性肝炎。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1檢測(cè)試劑、儀器 儀器：酶標(biāo)儀(美國(guó)伯樂(lè)，BIO-RAD MODEL550)，全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀(美國(guó)雅培，ARCHITECT-11000)。CLIA試劑盒購(gòu)自美國(guó)雅培公司，批號(hào)分別為：26372LI00、28066LF00、26356LI00、27295LF00。ELISA試劑盒購(gòu)自上海科華生物工程股份有限公司，批號(hào)分別為201306012、201303051、201306022、201307032、201307032。

1.3.2具體檢測(cè)方法 取6 mL清晨空腹靜脈血，離心10 min(3 000 r·min-1，半徑10 cm)，分離取血清，分兩等份，-20 ℃保存待測(cè)。分別以CLIA法、ELISA法測(cè)定乙型肝炎核心抗體(hepatitis B core antibody，HBcAb)、乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)、乙型肝炎表面抗體(hepatitis B surface antibody，HBsAb)、乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)、乙型肝炎e抗體(hepatitis B e antibody，HBeAb)水平。

1.4 陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)血清乙肝抗原及抗體上限值：HBcAb為0.7 PEI U·mL-1，HBsAg為0.05 IU·mL-1，HBsAb為10.0 mIU·mL-1，HBeAg為0.1 PEI U·mL-1，HBeAb為0.15 PEI U·mL-1。CLIA、ELISA測(cè)定值≥上限值判定為陽(yáng)性。

1.5 觀察指標(biāo)(1)比較CLIA、ELISA對(duì)乙肝抗原及抗體陽(yáng)性檢出率。(2)比較CLIA、ELISA對(duì)低水平HBsAg(0.06～3.00 IU·mL-1)檢出率。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，行χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乙肝標(biāo)志物檢出率CLIA對(duì)HBsAg、HBeAg、HBeAb陽(yáng)性檢出率分別為65.00%(39/60)、68.33%(41/60)、38.33%(23/60)，高于ELISA對(duì)三者的檢出率[48.33%(29/60)、53.33%(32/60)、23.33%(14/60)]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。CLIA對(duì)HBcAb、HBsAb陽(yáng)性檢出率分別為71.67%(43/60)、61.67%(37/60)，與ELISA檢測(cè)陽(yáng)性率[65.00%(39/60)、58.33%(35/60)]比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。

2.2 低水平HBsAg檢出率60例HBV感染者中共32例HBsAg處于低水平。HBsAg水平0.06～0.50 IU·mL-1時(shí)CLIA檢出率高于ELISA，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HBsAg水平0.51～3.00 IU·mL-1時(shí)CLIA、ELISA檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 CLIA與ELISA對(duì)低水平HBsAg檢出率比較(%)

注：與CLIA檢測(cè)比較，aP<0.05；ELISA—酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，CLIA—化學(xué)發(fā)光免疫分析法。

3 討論

乙肝早期癥狀不明顯，易出現(xiàn)漏診及誤診，造成病情惡化，嚴(yán)重影響患者身心健康[3]。臨床應(yīng)及時(shí)選擇科學(xué)有效的檢測(cè)方式，以提高早期診斷率，積極防治，改善預(yù)后。

ELISA為血清學(xué)指標(biāo)物的重要檢測(cè)手段，具有簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、快捷等優(yōu)勢(shì)，在診斷疾病、評(píng)價(jià)療效中有積極意義，但其易受孵育時(shí)間、洗板等因素影響，可出現(xiàn)非特異性反應(yīng)，干擾檢測(cè)穩(wěn)定性。另外，ELISA檢測(cè)原理為酶顯色，檢測(cè)精密度低，待測(cè)抗體、抗原水平過(guò)低時(shí)，吸光度過(guò)小，易影響檢測(cè)準(zhǔn)確性[4]。CLIA依照底物發(fā)光強(qiáng)度實(shí)施檢測(cè)分析，能充分結(jié)合免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)，避免抗體突變影響。另外，其標(biāo)記物來(lái)源豐富，可識(shí)別各變異株，減輕人為因素干擾，提高準(zhǔn)確性[5]。本研究結(jié)果顯示，與ELISA檢測(cè)比較，CLIA對(duì)HBsAg、HBeAb、HBeAg陽(yáng)性檢出率均較高，且當(dāng)HBsAg水平為0.06～0.50 IU·mL-1時(shí)CLIA檢出率高于ELISA，可見(jiàn)CLIA、ELISA均可有效檢測(cè)血清乙肝抗原及抗體水平，且與ELISA比，CLIA檢出率更高，可為臨床早期診斷、病情防治提供相關(guān)數(shù)據(jù)支持。

綜上所述，采用ELISA、CLIA法均能有效檢測(cè)血清乙肝抗原及抗體水平，CLIA的檢測(cè)效果及準(zhǔn)確度更高，有助于臨床診斷、監(jiān)測(cè)病情，采取防治措施。