1500 例嬰幼兒先天性耳聾基因檢測結果研究

吳慧，李春紅，孟祥吉

（1.山東衛康醫學檢驗有限公司，淄博市精準基因檢測關鍵技術重點實驗室，山東 淄博 255000；2.山東省遺傳性疾病基因檢測技術應用示范中心，山東 濟南 250000）

0 引言

新生兒聽力篩查時需采取早發現和早診斷等重要手段，但是目前有資料顯示耳聾患者多為遲發性，在出生時并未表現出聽力損失，因此單純進行新生兒聽力篩查具有一定局限性，聯合耳聾基因分子篩查能夠有效降低先天性耳聾發病率[1]。現階段來看，人類基因組計劃已經基本完成，加上日益完善的遺傳病檢測技術可顯著預防先天性耳聾的發生。我國流行病學研究資料顯示，聾人群體中的遺傳性耳聾比例比較高，其中GJB2 基因、GJB3 基因、SrRNA 基因以及SLC26A4基因等是導致我國人群發生耳聾的重要致病因子[2]。有關研究資料顯示，GJB2 基因突變會導致先天中重度感音神經性耳聾發生，SLC26A4 基因突變會導致大前庭水管綜合征發生或先天性/后天性中重度感音神經性耳聾發生，GJB3 基因突變會導致后天高頻感音神經性耳聾，SrRNA 基因突變會導致藥物性耳聾情況發生[3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院（在2016 年2 月至2019 年2 月）出生的1500 例嬰幼兒一般資料。1500 例嬰幼兒中有792 例男、708 例女，平均年齡為（2.15±0.98）歲。在患兒家長知情下采集血液標本（1 mL～2 mL），采取本院自制問卷調查表調查患兒的基本資料（姓名、性別、年齡、家族有無耳聾病史等）。

1.2 方法

采用聚合酶鏈式擴增（擴增儀型號：美國公司生產的CFX96 型）反向點雜交法（采用恒溫雜交儀以及遺傳性耳聾基因檢測試劑盒）檢測1500 例嬰幼兒的4 個基因。提取DNA 方法 首先裂解紅細胞、再收集白細胞，最后通過變性液使得蛋白質變性，釋放DNA，在高鹽低pH 狀態下利用DNA 吸附劑吸附DNA，再在低鹽高pH 狀態下溶解DNA。聚合酶鏈式擴增：取出反應液管、低速離心、做好標記，再加入已經提取的2uLDNA 檢測標本，再進行聚合酶鏈式擴增。雜交與顯色：在離心管中放置標有編號的膜條，加入雜交液以及聚合酶鏈式擴增產物；將離心管置入沸水中加熱10 min，再放置恒溫雜交儀中90 min；將膜條移送到預熱后的50 mL 雜交液塑料管中，搖勻洗滌15 min；配置顯色液、孵育液、雜交液，棄液體，將膜條置于雜交液中輕搖浸泡0.5 h，棄除孵育液，再用雜交液洗滌兩次，每次5 min。

1.3 觀察指標

分析聚合酶鏈式擴增反向點雜交法檢測1500 例嬰幼兒的4 個基因結果（根據膜條藍色顯色位點加以判斷）。

1.4 統計學方法

資料分析采用SPSS 21.0 統計軟件進行統計分析。計數資料用率或構成比表示，組間比較采用χ2檢驗或精確概率法。所有統計檢驗均為雙側概率檢驗，檢驗水準為0.05。

2 結果

1500 例嬰幼兒中共檢測出36 例基因攜帶者（占2.4%），其中有18 例GJB2 基因突變（占1.2%，18/1500）、10 例SLC26A4 基因突變（占0.7%，10/1500）、5 例GJB3 基因突變（占0.3%，5/1500）、3 例12SrRNA 基因突變（占0.2%，3/1500）。各組數據比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 分析1500 例嬰幼兒先天性耳聾基因檢測結果

3 討論

有關研究顯示，導致先天性耳聾發生的因素有：其一，遺傳因素；其二，環境因素[4]。在遺傳中，常見的致遺傳性耳聾基因有：GJB2 基因、SLC26A4 基因、GJB3 基因、12SrRNA 基因等[5]。本文研究結果顯示1500例嬰幼兒中共檢測出36例基因攜帶者（占2.4%），其中有18 例GJB2 基因突變（占1.2%，18/1500）、10 例SLC26A4 基因突變（占0.7%，10/1500）、5 例GJB3 基因突變（占0.3%，5/1500）、3 例12SrRNA基因突變（占0.2%，3/1500）。各組數據比較差異有統計學意義（P＜0.05）。先天性耳聾是一種常見的出生缺陷，主要是因為母體在妊娠以及分娩過程中因遺傳而導致聽力受損。為了有效減少先天性耳聾嬰幼兒的出生，早期診斷和早期干預是最為重要的方法。目前來看，篩查先天性耳聾手段以聽力檢查方式為主，根據新生兒的年齡選擇合適的方法具有重要意義[6-7]。隨著基因分子遺傳學的研究日益深入，遺傳因素對先天性耳聾的相關影響日益受到醫學專家的高度重視，而采用基因檢測手段具有重要意義。綜上所述，1500 例嬰幼兒先天性耳聾基因檢測結果發現GJB2 基因突變為主[8-10]。