老年慢性牙周炎合并冠心病患者齦溝液及血清中IL-1β、TNF-α、IL-18及IFN-γ的表達(dá)與臨床意義

鄭學(xué)彬 龍淑會(huì) 李富杰 胡碩紅

(1海口市中醫(yī)醫(yī)院口腔科，海南 海口 570206；2珠海市人民醫(yī)院口腔科)

慢性牙周炎是一類由細(xì)菌等致病物質(zhì)引起的，以侵犯牙齦、牙周組織為特點(diǎn)的慢性口腔疾病，隨著病情的進(jìn)展，將嚴(yán)重影響患者的口腔健康，也是造成患者牙齒脫落的重要誘因〔1〕。老年患者由于年齡的增長(zhǎng)，機(jī)體各組織器官功能及自身免疫力均在不斷減退，易受到外界致病因素包括細(xì)菌、病毒等侵襲，是慢性牙周炎的高發(fā)群體。隨著研究的深入開展，臨床發(fā)現(xiàn)慢性牙周炎不僅帶來口腔局部健康問題，當(dāng)炎癥因子進(jìn)入血液循環(huán)時(shí)還可引發(fā)全身的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而對(duì)機(jī)體多處組織器官功能產(chǎn)生不良影響〔2〕。有研究表明，冠心病的眾多致病危險(xiǎn)因素中，牙周炎可是能冠心病發(fā)病的高危因素〔3〕。流行病學(xué)分析也顯示慢性牙周炎與冠心病的發(fā)病存在高度的一致性，兩種疾病通常同時(shí)存在于同一患者中〔4〕。牙周炎發(fā)病后由于致病菌的刺激，口腔局部會(huì)產(chǎn)生大量的炎癥因子，而炎癥因子的表達(dá)在冠心病的發(fā)生發(fā)展中亦有重要作用〔5〕。本研究主要探討慢性牙周炎與冠心病發(fā)病間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取海口市中醫(yī)醫(yī)院于2015年6月至2017年6月收治的90例老年患者。其中老年慢性牙周炎合并冠心病患者45例作為A組，男27例、女18例，年齡60～71歲，平均年齡(65.32±3.98)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)〔6〕：① 患者均確診為慢性中、重度牙周炎，牙周袋≥4 mm，附著喪失≥3 mm，牙槽骨吸收≥1/3，存在牙齒松動(dòng)，探診出血等現(xiàn)象；② 患者經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影檢查確診為冠心病，有超過1支的冠狀動(dòng)脈狹窄≥50%。單純的老年慢性中、重度牙周炎患者45例作為B組，其中男23例、女22例，年齡60～70歲，平均年齡(64.68±4.09)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)；①患者均確診為慢性中、重度的牙周炎，牙周袋≥4 mm，附著喪失≥3 mm，牙槽骨吸收≥1/3，存在牙齒松動(dòng)，探診出血等現(xiàn)象；② 患者經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影檢查顯示無冠心病癥狀。另取同期在醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的健康老年受試者45例作為C組，其中男25例、女20例，年齡60～74歲，平均年齡(65.38±4.39)歲。三組受試者均排除：①3個(gè)月內(nèi)服用抗生素、激素類藥物者；② 半年內(nèi)曾接受過牙周治療者；③伴有惡性腫瘤、肝腎功能異常者；④精神狀態(tài)異常不能配合本研究者。三組受試者在年齡、性別等基礎(chǔ)資料比較差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2檢查方法 三組受試者入院后均進(jìn)行牙周指數(shù)檢查，選擇單顆牙的近頰、正中頰、遠(yuǎn)頰、近舌、正中舌、遠(yuǎn)舌等6個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行牙周檢查，檢查項(xiàng)包括出血指數(shù)和探診深度。血液樣品采集：三組受試者入院后分別抽取空腹肘靜脈血5 ml，置于抗凝管中，采用TGL-16B高速離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)進(jìn)行，3 000 r/min，10 min，得上清液低溫-70℃條件下保存待檢測(cè)。齦溝液樣品采集：每位受試者選取三顆相同位置的牙體進(jìn)行齦溝液取樣，首先清除牙齦表面的菌斑，將濾紙條輕柔緩慢的插入取樣牙的牙周袋內(nèi)，當(dāng)遇到阻力后停止插入，此時(shí)濾紙條放置30 s，然后取出置于EP管中，于-70℃條件下保存待檢測(cè)。當(dāng)濾紙條帶有血跡時(shí)，則應(yīng)重新取樣。檢測(cè)前將濾紙條解凍，加入1 ml磷酸鹽緩沖液，室溫條件下震蕩30 min，然后3 000 r/min離心10 min，取上清液進(jìn)行檢測(cè)。三組受試者的血清、齦溝液中白細(xì)胞介素(IL)-1β、腫瘤壞死因子(TNF)-α、IL-18及干擾素(IFN)-γ濃度檢測(cè)均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)進(jìn)行，檢測(cè)試劑盒購(gòu)置于賽默飛世爾科技有限公司，操作過程嚴(yán)格按照說明書操作規(guī)程進(jìn)行。

1.3評(píng)價(jià)方法 對(duì)三組受試者的牙周指數(shù)包括出血指數(shù)和探診深度進(jìn)行比較，出血指數(shù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為〔7〕：0分為完全健康，即齦緣和齦乳頭外觀健康，輕探齦溝后不出血；1分為基本健康，即齦緣和齦乳頭呈輕度炎癥，輕探齦溝后不出血；2分為齦炎輕微，即牙齦呈輕度炎癥，有顏色改變，無腫脹或血腫，探診后點(diǎn)狀出血；3分為齦炎明顯，即牙齦呈中度炎癥，有顏色改變和輕度水腫，探診后出血，出血不溢出齦溝；4分為齦炎較重，即牙齦呈中度炎癥，有顏色改變，并有明顯腫脹，探診后出血并溢出齦溝；5分為重度齦炎，牙齦有顏色改變，明顯腫脹，有時(shí)有潰瘍，探診后出血或自動(dòng)出血。探診深度即齦緣至袋底或齦溝底的距離。對(duì)三組患者齦溝液、血清中檢測(cè)的IL-1β、TNF-α、IL-18及IFN-γ水平進(jìn)行對(duì)比分析。對(duì)患者的牙周指數(shù)與IL-1β、TNF-α、IL-18及IFN-γ水平間的相關(guān)性進(jìn)行檢驗(yàn)分析。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、F檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)、Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1三組受試者牙周指數(shù)比較 A組、B組、C組出血指數(shù)、探診深度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；A組、B組出血指數(shù)、探診深度均顯著高于C組，且A組顯著高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 三組牙周指數(shù)比較

與C組比較：1)P<0.05，與B組比較：2)P<0.05；表2同

2.2三組齦溝液、血清IL-1β、TNF-α、IL-18及IFN-γ水平比較 A、B、C三組齦溝液、血清中的IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，A組、B組齦溝液、血清中的IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ水平均顯著高于C組，A組顯著高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

組別IL-1β(μg/L)齦溝液血清TNF-α(μg/L)齦溝液血清IL-18(ng/L)齦溝液血清IFN-γ(μg/L)齦溝液血清A組42.90±9.871)2)18.37±4.291)2)7.32±1.971)2)13.53±2.981)2)38.27±5.651)2)55.05±8.171)2)14.29±4.131)2)22.86±5.911)2)B組30.17±6.341)13.62±3.021)5.36±1.841)8.59±2.021)29.86±5.311)42.03±7.091)10.32±3.311)17.28±5.621)C組8.25±1.095.07±1.872.21±0.653.98±1.348.32±2.2113.29±3.244.28±1.286.82±1.76F/P值21.408/0.00017.065/0.00014.524/0.00117.607/0.00030.116/0.00029.873/0.00013.530/0.00115.449/0.000

2.3相關(guān)性分析 出血指數(shù)、探診深度與齦溝液、血清中的IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ均呈正相關(guān)(P<0.05)，見表3、表4。

表3 牙周指數(shù)與齦溝液中IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ濃度相關(guān)性分析

表4 牙周指數(shù)與血清中IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ濃度相關(guān)性分析

3 討 論

慢性牙周炎發(fā)病期間，患者牙周袋內(nèi)的致病微生物及其代謝產(chǎn)物如脂多糖、內(nèi)毒素等會(huì)引起局部的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致口腔齦溝液等處的炎癥因子如IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ大量分泌，造成局部炎癥因子水平上升〔8〕。而局部炎癥因子隨血液循環(huán)至全身，致使全身機(jī)體多處炎癥因子水平上升，介導(dǎo)產(chǎn)生各種炎癥反應(yīng)。而冠心病的發(fā)病與冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)、損傷程度密切相關(guān)〔9〕。因此，在臨床上初步推測(cè)慢性牙周炎的發(fā)病可能是冠心病發(fā)病的一個(gè)重要致病因素〔10〕。IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ等均為典型的炎癥因子，因而，為了進(jìn)一步驗(yàn)證慢性牙周炎與冠心病間的相關(guān)性，在本研究中對(duì)老年慢性牙周炎合并冠心病患者的局部及全身的IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ等指標(biāo)濃度進(jìn)行檢測(cè)比較，并與單純慢性牙周炎、健康對(duì)照組對(duì)比分析。

本研究表明慢性牙周炎對(duì)冠心病發(fā)生、發(fā)展起到重要作用，而另一方面也可推測(cè)冠心病是牙周炎嚴(yán)重程度加重的一個(gè)誘因。IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ等共同參與了慢性牙周炎、冠心病的發(fā)生發(fā)展的過程，是慢性牙周炎、冠心病共同的致病因素。其中IL-1β是一類能夠促進(jìn)趨化性細(xì)胞因子的IL家族的一種亞型，其濃度的升高引起單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的聚集與浸潤(rùn)，在白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏結(jié)過程中居起始地位，從而啟動(dòng)動(dòng)脈粥樣硬化形成的過程〔11〕。TNF-α是一種由活化的巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞產(chǎn)生的小分子蛋白質(zhì)類物質(zhì)，在細(xì)胞免疫和炎癥反應(yīng)中有重要作用，其濃度的升高會(huì)抑制牙周膜纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，并加速破壞牙周組織，還可直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成〔12〕。IL-18同樣是IL家族中的一種，具有多種免疫調(diào)節(jié)功能，能夠促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖和免疫應(yīng)答過程〔13〕。因而，機(jī)體內(nèi)IL-18通過多種途徑刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫介導(dǎo)反應(yīng)和炎癥性損傷。IFN-γ為Th1家族最具代表性的細(xì)胞因子，在機(jī)體免疫反應(yīng)中有重要作用，當(dāng)機(jī)體中大量分泌時(shí)，可促使Th1細(xì)胞產(chǎn)生破壞性作用，加速對(duì)牙周組織和血管內(nèi)皮組織的損傷〔14〕。本文結(jié)果表明對(duì)于慢性牙周炎合并冠心病其體內(nèi)的炎癥反應(yīng)程度更高，免疫介導(dǎo)和炎癥反應(yīng)均參與了慢性牙周炎和冠心病的發(fā)病進(jìn)展過程中，也表明了牙周炎和冠心病間有共同的致病因素。牙周健康水平越高，患者局部和全身的炎癥因子水平越低，進(jìn)一步證實(shí)了牙周組織局部感染導(dǎo)致的局部炎癥因子進(jìn)入全身血液循環(huán)引起血清中炎癥因子水平升高，從而誘導(dǎo)或加重了冠心病的發(fā)生、發(fā)展〔15〕。

綜上所述，老年慢性牙周炎與冠心病患者局部和全身炎癥因子水平均顯著升高，初步推斷二者間存在一定的關(guān)聯(lián)性，慢性牙周炎與冠心病的發(fā)生發(fā)展有IL-1β、TNF-α、IL-18、IFN-γ等共同的致病因子。