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GeneXpert MTB/RIF在結核病診斷及利福平耐藥檢測中的應用分析

2020-06-15 11:39:32關麗迎
中國醫藥科學 2020年9期
關鍵詞:耐藥檢測

關麗迎

廣東省江門市結核病防治所檢驗科,廣東江門 529000

臨床中對結核病較難控制的一個重點就是確診耗時十分長、且敏感度不理想[1]。而在針對出現耐藥性的結核病方面,特別是耐多藥結核的臨床診斷方面存在一定的滯后現象,導致出現治療延后及疾病傳播等現象。所以尋找一種快速診斷結核病及耐多藥情況的檢測方法對提高臨床對結核病的診斷及治療水平都具有十分積極的意義[2]。Gene Xpert MTB/RIF 系統(以下簡稱MTB/RIF 系統)首次在2010 年被WHO 批準在臨床對結核病的診斷當中應用,因其諸多優點,如靈敏度高、特異性高及操作更加簡便等逐漸在臨床中得到關注及應用[3]。選取2017 年9 月~2019 年3 月我院收治的肺結核患者123 例,采集所有患者的痰標本,分別進行MTB/RIF 系統檢測、結核分枝桿菌分離培養及涂片抗酸染色鏡檢(以下簡稱涂片鏡檢),分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年9 月~2019 年3 月我院收治的肺結核患者123 例,其中,男75 例,女48 例,年齡18 ~70 歲,平均(43.6±2.2)歲。依據肺結核的不同臨床診斷標準,其中,確診肺結核患者為53 例,臨床診斷肺結核患者為70 例。

臨床診斷肺結核患者的診斷標準[4]:經胸部影像學檢查,符合臨床中肺結核的影像學表現,同時符合下述所有指標當中的任一項:(1)存在可疑的肺結核癥狀或(和)全身性癥狀;(2)經結核菌素試驗結果提示呈強陽性,硬結直徑≥20mm,或者局部出現淋巴管炎、壞死及水皰;(3)血清抗結核抗體檢測結果呈陽性;(4)對肺外組織進行病理檢查,證實存在結核病變;(5)經診斷性治療或者隨訪觀察,排除其他的相關肺部疾病者。

臨床確診肺結核患者的診斷標準[5]:符合下述所有指標當中的任一項:(1)患者的2 份痰樣本進行涂片鏡檢結果全部呈陽性;(2)患者的1 份痰樣本進行涂片鏡檢呈陽性,且對胸部進行影像學檢查提示,符合臨床中肺結核的相關影像學表現;(3)患者的1 份痰樣本涂片鏡檢結果呈陽性,且1 份痰樣本的結核分枝桿菌培養呈陽性;(4)患者的1 份痰樣本經結核分枝桿菌培養結果呈陽性,且經胸部影像學檢查,符合臨床中肺結核的相關影像學表現。

1.2 方法

1.2.1 涂片鏡檢 采集所有患者的痰樣本,進行涂片、染色及抗酸桿菌的鏡檢。陰性標準:鏡檢下未見抗酸桿菌;陽性標準:鏡檢下可見抗酸桿菌。

1.2.2 結核分枝桿菌分離培養 留取所有患者的1mL 痰樣本,依據試劑說明書來進行分離培養;通過抗酸染色證實是抗酸菌,再通過結核分枝桿菌的抗原檢測試劑盒進行鑒定。

1.2.3 藥敏試驗 培養結果呈陽性的結核分枝桿菌采用比例法做藥敏試驗。

1.2.4 MTB/RIF 系統 留取所有患者的1mL 痰樣本,放置在無菌試管當中,在試管當中加入配套的消化液約2mL,渦旋振蕩20s,室溫下靜置15min;再將2mL 的處理液加入到樣本反應盒當中,蓋緊蓋之后使用儀器進行測試。

1.3 觀察指標

1.3.1 觀察比較MTB/RIF 系統與抗酸桿菌分離培養跟涂片鏡檢間的檢測陽性率差異。

1.3.2 觀察比較在利福平耐藥檢測中MTB/RIF 系統與比例法藥敏試驗結果的差異。

1.4 統計學方法

使用SPSS22.0 進行分析,所有數據當中,計數資料以[n(%)]表示,組間比較采用χ2檢驗;計量資料以()表示,組間比較采用t 檢驗;P <0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MTB/RIF系統與抗酸桿菌分離培養跟涂片鏡檢間的檢測陽性率比較

在53 例確診肺結核組患者的痰樣本當中,MTB/RIF 系統跟抗酸桿菌分離培養都呈陽性,但是涂片鏡檢僅有35 例呈陽性;在70 例臨床診斷肺結核患者的痰樣本當中, MTB/RIF 系統檢測呈陽性者8 例,但是抗酸桿菌分離培養跟涂片鏡檢結果均呈陰性。在所有123 例患者當中,MTB/RIF 系統的檢測陽性率為49.6%,分離培養的陽性率為43.1%,涂片鏡檢的檢測陽性率為28.5%;在確診肺結核組患者的檢測當中,MTB/RIF 系統的檢測陽性率為100.0%、分離培養的檢測陽性率為100.0%、涂片鏡檢的檢測陽性率為66.0%;在臨床診斷肺結核組當中,MTB/RIF 系統的檢測陽性率為11.4%、分離培養的檢測陽性率為0、涂片鏡檢的檢測陽性率為0。MTB/RIF 系統在結核分枝桿菌的檢測陽性率顯著高于涂片鏡檢,差異有統計學意義(χ2=6.492,P=0.019),略高于抗酸桿菌分離培養,但差異無統計學意義(χ2=1.087,P=0.274),見表1。

表1 MTB/RIF系統與抗酸桿菌分離培養跟涂片鏡檢間的檢測陽性率比較[n(%)]

2.2 利福平耐藥檢測中MTB/RIF系統與比例法藥敏試驗結果比較

MTB/RIF 系統檢測結果出現利福平耐藥的患者13 例,比例法藥敏試驗結果出現利福平耐藥的患者為14 例,兩者差異無統計學意義(χ2=1.198,P >0.05),見表2。

表2 在利福平耐藥檢測中MTB/RIF系統與比例法藥敏試驗比較

3 討論

目前臨床中在結核病的臨床診斷方面,尤其是在涂陽肺結核及結核病耐藥方面的臨床診斷主要是通過結核病的相關實驗室檢測結果來進行診斷的[6]。目前,臨床實驗室當中常用的檢測方法主要包括樣本培養及涂片鏡檢;但是在肺結核患者當中,痰涂片檢測的陽性率通常在50%左右,分離樣本培養的陽性檢出率在60%左右[7]。而在臨床中所有活動性肺結核患者當中,涂陰肺結核患者約占到75%左右;所以,會在約67%的肺結核患者痰樣本當中不能檢測出結核分枝桿菌,以致出現臨床誤診及誤治[8]。

MTB/RIF 系統是臨床當中全新的一種對肺結核早期發現、快速診斷的檢測方式,在臨床對結核病進行診斷及治療過程當中具有里程碑的意義[9]。研究指出,通過MTB/RIF 系統能夠代替臨床中的抗酸涂片鏡檢,能夠使得結核病的檢出率顯著提高[10]。同時還有研究指出,通過MTB/RIF 系統來替代傳統藥敏能夠耐多藥的結核檢出率提高3 倍[11]。本研究結果提示,MTB/RIF 系統在結核分枝桿菌的檢測陽性率顯著高于涂片鏡檢,差異有統計學意義(P <0.05),略高于結核分枝桿菌分離培養,但差異無統計學意義(P >0.05)。

針對結核分枝桿菌的菌株,rpoB 基因在鑒定利福平耐藥檢測當中具有重要的意義[12]。而MTB/RIF 系統就是通過對樣本當中的rpoB 基因片段突變區進行檢測,從而簡便、快速地獲取到藥物的耐藥情況[13]。且其檢測所需時間較短,能夠在2h 之內快速得出檢測結果[14]。而傳統的培養法藥敏試驗,不僅需要2 周左右的培養時間,還需要28d左右的培養藥敏[15]。由此可見,在檢測時效方面MTB/RIF 優勢顯著。本研究結果提示,MTB/RIF 系統檢測結果出現利福平耐藥的患者13 例,比例法藥敏試驗結果出現利福平耐藥的患者為14 例,兩者差異無統計學意義(P >0.05)。本研究中還有部分樣本在MTB/RIF 系統中呈陽性,但是不能培養菌株進行藥敏試驗。這一現象提示,MTB/RIF 系統在檢測利福平耐藥性方面不僅檢測時間較短,同時還能夠直接使用臨床標本進行檢測,無需前期培養,優勢明顯[16]。

綜上所述,使用GeneXpertMTB/RIF 系統能夠更加快速、簡便的對結核病進行臨床診斷,同時有效的檢測利福平的耐藥情況,值得應用。

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