噬菌體生物制劑在草魚細(xì)菌性疾病治療中的應(yīng)用實(shí)例

杭小英 劉 莉 施偉達(dá)

(1.浙江省淡水水產(chǎn)研究所，浙江 湖州 313001；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，浙江 杭州 310021)

噬菌體是一種可入侵細(xì)菌內(nèi)繁殖，最終使細(xì)菌裂解的病毒，又稱為細(xì)菌的“食者”。國(guó)內(nèi)外很多研究表明，噬菌體對(duì)嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、副溶血弧菌、維氏氣單胞菌、遲緩愛(ài)德華氏菌等均有較好的裂解效果，特別對(duì)具有多重耐藥性的病原菌有較好的裂解效果。本實(shí)驗(yàn)室于2018年從中華鱉養(yǎng)殖池塘中分離到一株寬譜噬菌體，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，它對(duì)嗜水氣單胞菌、副溶血弧菌等多種致病菌都具有較好的裂解作用，開始逐漸將其應(yīng)用在實(shí)際生產(chǎn)中。

一、發(fā)病情況

2018年6月，湖州某家庭農(nóng)場(chǎng)池塘循環(huán)水跑道養(yǎng)殖的草魚陸續(xù)出現(xiàn)趴邊、死亡等現(xiàn)象，草魚規(guī)格400～600克/尾。魚體表有出血點(diǎn)，有部分病魚在跑道攔網(wǎng)停留，游動(dòng)緩慢，日死亡20～30尾。初期經(jīng)鏡檢，發(fā)現(xiàn)有錨頭鳋感染，用藥后寄生蟲有所減少，但魚繼續(xù)死亡，治療效果不明顯。

二、病原分析

采集5尾瀕死魚帶回實(shí)驗(yàn)室做進(jìn)一步檢驗(yàn)，解剖可見(jiàn)鰓發(fā)紅，肝、腎充血(圖1)，取肝、脾、腎組織平板劃線培養(yǎng)，分離純化得優(yōu)勢(shì)菌，初步診斷為細(xì)菌性疾病。將分離的優(yōu)勢(shì)菌作為測(cè)試菌，采用滴注法進(jìn)行噬菌體噬菌效果的測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)噬菌體對(duì)分離菌株有顯著的裂解作用(圖2)。

圖1 患病草魚解剖

圖2 噬菌體對(duì)分離菌株的裂解作用

三、治療應(yīng)用

將實(shí)驗(yàn)室研制的噬菌體制劑按照飼料的5%添加，拌勻進(jìn)行投喂，每天投喂兩次，同時(shí)潑灑敵百蟲用以殺滅寄生蟲錨頭鳋，連續(xù)5天。第3天病死魚開始減少，5天后停止死魚，病情得到有效控制。

四、分析總結(jié)

本實(shí)例中，我們用噬菌體制劑來(lái)治療草魚細(xì)菌性疾病，而不是常規(guī)的抗生素治療，同樣取得了良好的治療效果。除了治療疾病，噬菌體生物制劑可以按2%～3%添加在飼料中進(jìn)行日常投喂，用以預(yù)防疾病。與傳統(tǒng)抗生素療法相比，噬菌體具有很多優(yōu)勢(shì)：一是針對(duì)性強(qiáng)，抗生素在治療細(xì)菌性感染時(shí)，會(huì)殺滅水產(chǎn)動(dòng)物消化道中的正常菌和有益菌，而噬菌體特異性強(qiáng)，不會(huì)給機(jī)體和環(huán)境中的其他有益菌群造成傷害；二是不會(huì)產(chǎn)生耐藥性，噬菌體通過(guò)感染－繁殖－裂解循環(huán)周期，最終使細(xì)菌裂解，與細(xì)菌耐藥性無(wú)關(guān)；三是無(wú)藥殘風(fēng)險(xiǎn)，使用抗生素會(huì)造成藥物在動(dòng)物體內(nèi)殘留，而噬菌體會(huì)隨著細(xì)菌宿主的消失而死亡，不會(huì)殘留在動(dòng)物體內(nèi)。總之，噬菌體生物制劑對(duì)治療細(xì)菌性疾病很有吸引力，是一種很有應(yīng)用前景的抗生素替代療法。