食品添加劑葡萄糖醇含量的測(cè)定方法研究

趙順新

（南京康寧司法鑒定中心，江蘇南京 210000）

葡萄糖醇，又稱山梨糖醇，可由葡萄糖還原而制取，作為保濕劑和界面活性劑應(yīng)用廣泛。日本最早允許葡萄糖醇作為食品添加劑使用，用于提高食品保濕性，或作為稠化劑使用，或可作甜味劑，制造無(wú)糖口香糖。

目前國(guó)內(nèi)外研究中多采用高效液相色譜測(cè)定葡萄糖醇的含量，本研究以A公司失水葡萄糖醇溶液成品為供試品，采用高效液相色譜法測(cè)定其中的葡萄糖醇含量。

1 儀器與試藥

1.1 色譜系統(tǒng)及色譜條件

儀器：高效液相色譜儀；色譜柱：賽分Carbomix （7.8*300mm，10μm）；檢測(cè)器：示差（40℃）；流動(dòng)相：純化水；流速：0.6mL/min；柱溫：55℃；進(jìn)樣量：20μL；稀釋劑：水；

1.2 樣品信息

一失水葡萄糖醇標(biāo)準(zhǔn)品，Sigma試劑，R0200Y0；葡萄糖醇標(biāo)準(zhǔn)品，Sigma試劑，G145145；失水葡萄糖醇溶液成品，A公司，20190901/20190902/20191001批。

2 物質(zhì)測(cè)定方法的建立

系統(tǒng)適用溶液的制備：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇，二失水葡萄糖醇和甘露醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg、二失水葡萄糖醇4mg和甘露醇1mg的溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。

供試品溶液的制備：取失水葡萄糖醇溶液樣品適量，精密稱定，加水溶解并制成每1mL含20mg的溶液，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液的制備：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

失水葡萄糖醇溶液含量按以下公式計(jì)算：

一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）含量%=Cs*At/As*Ct*100

式中Cs、As分別作為對(duì)照品溶液圖譜中一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）的濃度、峰面積。Ct和At分別作為供試品液圖譜中一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）的濃度、峰面積。

限度：按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，一失水葡萄糖醇不得少于15%，葡萄糖醇不得少于25%。

3 結(jié)果與討論

3.1 線性范圍

取一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇對(duì)照品適量，加水配制成葡萄糖醇濃度20mg/mL和一失水葡萄糖醇濃度8mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液。分別取標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液適量，加水稀釋至葡萄糖醇濃度分別為20、16、8、4、3.2、1.6mg/mL的溶液，一失水葡萄糖醇濃度分別為8、6.4、3.2、1.6、1.28、0.64mg/mL的溶液作為不同濃度的對(duì)照液，分別取20μL注入液相色譜儀，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行直線回歸，結(jié)果表明一失水葡萄糖醇濃度0.64～8mg/mL和葡萄糖醇濃度在1.6～20mg/mL時(shí)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好。

3.2 進(jìn)樣精密度試驗(yàn)

對(duì)照品準(zhǔn)備：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg的溶液，作為對(duì)照品溶液（20191211）。取對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6針，對(duì)比峰面積的變化，結(jié)果表明一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇進(jìn)樣的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD小于2.0%，說(shuō)明測(cè)定數(shù)據(jù)間的波動(dòng)性小，即本方法精密度試驗(yàn)符合要求。

3.3 重復(fù)性

取批號(hào)20191001失水葡萄糖醇溶液樣品適量，精密稱定，加水溶解并制成每1mL含20mg的溶液，作為供試品溶液平行測(cè)定6份，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明6份供試品測(cè)定的含量基本一致，RSD%為0.3%左右，該方法的重復(fù)性良好。

3.4 中間精密度試驗(yàn)

不同儀器測(cè)算同一批樣品中一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇含量，考察中間精密度。RSD%均不超過(guò)0.3%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明該方法的精密度良好。

3.5 回收率試驗(yàn)

精密稱取失水葡萄糖醇溶液（20191001）0.32g、0.40g、0.48g各3份，每份稱3次，共稱9份，用純化水定容至20ml。取供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，按外標(biāo)法計(jì)算含量，計(jì)算RSD%均在0.5%左右。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法測(cè)定失水葡萄糖醇溶液含量，回收率良好。

3.6 耐用性試驗(yàn)

取20191001批失水葡萄糖醇溶液樣品適量，加水溶解配制成濃度為20mg/mL的供試品溶液。選用賽分的不同編號(hào)的Ca-NP柱，按照測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本方法在同一型號(hào)不同批號(hào)的色譜柱上可以得到重現(xiàn)，有較好的耐用性。

3.7 專屬性和系統(tǒng)適用試驗(yàn)

3.7.1 系統(tǒng)適用性

取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇，二失水葡萄糖醇和甘露醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg、二失水葡萄糖醇4mg和甘露醇1mg的溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。進(jìn)樣1針，主峰的RSD小于2.0%，三個(gè)峰之間的分離度符合要求，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該色譜條件下系統(tǒng)適用。

3.7.2 專屬性

取失水葡萄糖醇溶液供試品適量，加水溶解成20mg/mL的溶液，作為未破壞樣品；取本品400mg，置20mL量瓶中，加適量水使溶解，加入3%雙氧水1mL，25℃放置60min，取出，加水稀釋至刻度，作為氧化破壞樣品；取本品400mg，置20ml量瓶中，加適量水使溶解，加入1mol/L鹽酸1mL，25℃放置60min，取出，加1mol/L氫氧化鈉溶液1mL中和，加水稀釋至刻度，作為酸破壞樣品；取本品400mg，置20mL量瓶中，加適量水使溶解，加入1mol/L氫氧化鈉1mL，25℃放置60min，取出，加入1mol/L鹽酸中和，加水稀釋至刻度，作為堿破壞樣品；取本品置于80℃放置1h，取出，按照供試品配制方法配制，作為高溫破壞樣品；取上述未破壞供試品和破壞供試品20μl，注入液相色譜儀，考察降解雜質(zhì)峰，并計(jì)算失水葡萄糖醇溶液含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明該色譜條件下，無(wú)降解雜質(zhì)產(chǎn)生，樣品經(jīng)破壞后與未破壞的含量基本一致，破壞對(duì)結(jié)果無(wú)干擾，本法專屬性良好。

3.8 樣品中含量檢測(cè)結(jié)果

對(duì)樣品進(jìn)行含量檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明三批失水葡萄糖醇溶液的一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇含量符合規(guī)定，為合格品（如表1）。

表1 失水葡萄糖醇溶液樣品測(cè)定結(jié)果

4 結(jié)論

通過(guò)對(duì)供試品中葡萄糖醇的含量進(jìn)行分析，本文所述分析方法得到多批次檢測(cè)結(jié)果，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。本檢測(cè)方法在含量的測(cè)定中的專屬性、定量限、適應(yīng)性、線性、重復(fù)性、精密度、回收率等在所用色譜設(shè)備上均表現(xiàn)出較好水平。