象親內皮皰疹病毒及其研究進展

楊 念 張 立

（北京師范大學生命科學學院，生物多樣性與生態工程教育部重點實驗室 北京 100875）

亞洲象（Elephasmaximus）為全球僅存約5萬頭的瀕危物種，其中我國境內僅有約250頭［1］。棲息地喪失與破碎（例如土地開發、農作物種植）、人象沖突、非法盜獵等各種干擾使得亞洲象的生存環境日益嚴峻，使其種群數量不斷下降。傳染性疾病的出現給原本已很艱難的亞洲象保育工作帶來新的打擊，象親內皮皰疹病毒（elephant endotheliotropic herpesviruses，EEHV）感染可導致系統性出血性疾病，造成亞洲象急性死亡，致死率極高，是威脅亞洲象種群數量增長的主要因素之一［2-3］。

本文將從象親內皮皰疹病毒的探究過程及特性、其傳播對亞洲象保育的影響，以及目前的防控措施及其局限性3個方面簡單介紹象親內皮皰疹病毒，最后總結并提出對未來研究方向的展望。

1 象親內皮皰疹病毒的探究過程及特性

20世紀90年代初期，瑞士馬戲團一頭3歲齡的亞洲象急性死亡，在對其剖檢及組織病理學切片檢查時發現疑似皰疹病毒包涵體，但因當時技術有限，未能將死亡象所感染的皰疹病毒定種［4］。直至1999年，借助PCR技術，史密森動物園的研究人員在10頭亞洲象的樣本中發現了該種新型皰疹病毒，并因其展現出的親上皮細胞特性而將其命名為象親內皮皰疹病毒［5］。

皰疹病毒為大型雙鏈DNA病毒，象親內皮皰疹病毒目前屬皰疹病毒科，乙型皰疹病毒亞科，長鼻病毒屬［2］，現共發現7種亞型（EEHV1～7）［7］。然而值得注意的是，對所發現的象親內皮皰疹病毒進行全基因組測序，得知這幾種亞型分為A-T豐富及G-C豐富2個分支，且這2個分支可能早在3 500萬年前就已出現［8］；同時，基因及蛋白質層面的系統發生分析皆提示長鼻病毒屬并不屬于現有的甲、乙、丙3種皰疹病毒亞科，故研究團隊已提議將其劃分為新的亞科——丁型皰疹病毒亞科［7-9］。象親內皮皰疹病毒可同時感染亞洲象及非洲象，亞洲象感染可導致出血性疾病，但對非洲象致病性較弱，感染非洲象僅造成皮膚或肺部結節，其傳播機制現今仍知之甚少［2，10］。對圈養及野生亞洲象危害最大的為EEHV1的嵌合變種（EEHV1A及EEHV1B）［7］，感染可導致出血性疾病，其中1～8歲幼齡亞洲象易感，且致死率高達80%。據統計北美洲及歐洲60%死亡幼齡象的死因均為象親內皮皰疹病毒感染［3］。感染幼象病程較快，發病急，但癥狀有時并不明顯，例如乏力、厭食等；由圖1可見感染象可出現頭面部腫脹、舌腫大發紺等癥狀，大體剖檢可見心包積液伴心內、外膜及心肌點狀或斑狀淤血，在小腸等部位還可見潰瘍灶等［2-3，11］。已有成年健康亞洲象隱性帶毒及向環境中排毒的報道［12］。因野生亞洲象樣本獲取較為困難，大多數的感染案例為圈養亞洲象，但已在亞洲發現因象親內皮皰疹病毒感染致死的野生亞洲象［6］。同時，研究人員還從健康象的結膜拭子、口腔拭子等樣本中分離出一種新的象皰疹病毒——象丙型皰疹病毒（elephant gammaherpesviruses，EGHV），現發現其5種亞型及1種嵌合變體，目前并未有其具有致病性的報道［10］。目前我國在這一領域的研究尚屬空白。

圖1 象親內皮皰疹病毒感染象剖檢圖［6］

2 象親內皮皰疹病毒對亞洲象保育的影響

北美及歐洲僅有圈養亞洲象，故象親內皮皰疹病毒感染對其保育的主要威脅在于如何保持可持續的圈養亞洲象種群；因圈養亞洲象繁育過程中遺傳多樣性降低，新產出幼象可能對EEHV易感 性增加［3］。

擁有野生亞洲象的亞洲各國，還需面對象親內皮皰疹病毒感染對野生種群數量的負面影響。象親內皮皰疹病毒在野生亞洲象種群中的擴散可能具有不確定性、不可控性及延遲性。雖已知野生亞洲象種群中有象親內皮皰疹病毒感染案例，但野生亞洲象樣本獲取難度極大，幾乎無法測得野生亞洲象種群的感染率［6］。因為監測有難度，野生亞洲象種群可能出現象親內皮皰疹病毒感染地區性疫情爆發的情況，且治療野生亞洲象也有很大難度，故具不可控性。該事件如果發生，無疑會對數量正在下降中的小種群造成嚴重打擊。同時，幼象為象親內皮皰疹病毒感染致死的主要對象，且亞洲象壽命較長，長期發展下去，野生亞洲象的種群年齡結構可能被改變，所以象親內皮皰疹病毒對于野生亞洲象種群數量及結構的影響可能會有滯后性。

3 防治措施及局限性

象親內皮皰疹病毒感染的防治措施為定期監測和及時治療。通常采集鼻洗及全血作為檢測樣本，常用的實驗室分子檢測方法包含PCR及實時PCR［10，12］。傳統PCR主要用于診斷是否為象親內皮皰疹病毒感染及對所得病毒分型；相比于傳統PCR，實時PCR檢測更加敏感，可進行定量且實時監測［2］。一些研究團隊也在著手研究更加高效的檢測方法［13］。對于感染象，通常給予治療皰疹病毒感染的人用抗生素例如泛昔洛韋、噴昔洛韋等，伴以支持療法例如補液等進行治療，雖然存活率仍然較低，但此治療方案對于處在病程早期患象有較好效 果［2，7，11］。 需要指出的是，因為 象親 內皮皰疹病毒感染病程發展迅速，需要盡快作出診斷及治療處置，這就需要一線人員根據臨床表現及平日經驗及時作出判斷。因為象親內皮皰疹病毒尚未成功進行體外細胞培養，所以疫苗的研發仍是一個難題［2］。

目前，象親內皮皰疹病毒感染監控及防治措施還面臨一些困難及不足。首先，很難獲得野生亞洲象及未經訓練的圈養象的樣本。對圈養象進行行為訓練耗時長且需要專業人士操作。其次，樣本采集后需進行實驗室分子檢測，對實驗室、實驗設備、研究人員專業技能要求更高，可能導致檢測人員短缺。再次，PCR等檢測需要4 h左右，但因該病發病急且快，可能出現實驗室診斷結果未出而患象已經死亡的情況，這對于象親內皮皰疹病毒的臨床防控工作非常不利［14］。最后，還需要考慮成本的調控。密集的監測及實驗室檢測需要較多勞動和材料成本；且因亞洲象體重大，治療時所需藥物劑量多，故治療成本較高。因此，如何完善象親內皮皰疹病毒監測防治計劃，并使其可持續的推行應用仍是需考慮的問題。

4 總結及展望

本文簡單介紹了象親內皮皰疹病毒的研究成果及現狀，總結其對當前亞洲象種群的影響，并討論主要的解決措施及其不足，希望能對今后我國象親內皮皰疹病毒研究提供一些基礎認知。同時，如何建立一套有效的象親內皮皰疹病毒預防措施，例如疫苗的研發，以及開發一些便捷且簡易的象親內皮皰疹病毒感染檢測方法，從而提高檢查效率并降低研究成本，仍是今后研究應關注的領域。