CgA、UⅡ、CK-MB水平變化與小兒病毒性心肌炎病情嚴重程度的關系研究

關浩，李海濤，李偉佳

（南陽醫學高等專科學校第一附屬醫院兒二科，河南 南陽 473000）

病毒性心肌炎是小兒常見的危重癥, 病情重, 進展快,容易并發心衰,因此對患兒的病情進行適時有效的評估對預后的判斷及治療方案的選擇具有重要的意義[1,2]。病毒性心肌炎的心肌損害過程有多種細胞因子、血管活性肽類物質的參與,并且其表達水平與心肌損害的程度具有相關性。嗜鉻粒蛋白A（CgA）是腎上腺髓質細胞分泌的糖蛋白，其能夠通過誘導血管加壓素的分泌，提高血管的收縮和痙攣程度,進而加劇心肌細胞的缺血性損傷和心肌細胞的凋亡[3]；尾加壓素Ⅱ（UⅡ）的表達能夠影響到血管的收縮程度, 提高血管內皮細胞的損傷，進而導致血流動力學的紊亂，促進心臟血流灌注水平的下降[4]；肌酸激酶同工酶-MB（CK-MB）的表達，能夠反應心肌細胞膜完整性的破壞程度，進而評估心血管病情的進展程度[5]。為了揭示CgA、UⅡ、CK-MB 的表達與小兒心肌炎患者的病情關系，為小兒病毒性心肌炎的病情評估提供有意義的血清學指標,本文對此進行了相關研究，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2015 年 1 月至 2018 年 1 月在我院治療的小兒病毒性心肌炎患兒98 例（觀察組），根據ROSS 評分分級，無心衰患兒23 例，輕度心衰患兒33 例，中度心衰25 例，重度心衰17 例。納入標準：⑴診斷符合《小兒病毒性心肌炎診斷標準》中標準；⑵年齡＜12 歲；⑶患兒監護人知情同意。排除標準：⑴先天性心臟病；⑵合并有肝腎功能障礙、惡性腫瘤等其他嚴重基礎性疾病。同時選取健康體檢兒童100 例作為對照組,觀察組和對照組一般資料比較見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 標本的采集與檢測

1.2.1 CK-MB 檢測 患者清晨空腹采取外周靜脈血3~5ml，室溫下放置5~10min，自然分層后抽取上層清亮液體待測。采用貝克曼庫爾特UniCel DxI 800 化學發光免疫分析儀進行CK-MB 的檢測，EasyBlot ECL 化學發光顯色試劑盒購自賽默飛公司,檢測過程由本院檢驗科完成。

1.2.2 CgA 和UⅡ檢測 采集患者的肘部靜脈血5ml，3000r/min 低溫離心 15min，取上清液分 2 管，深低溫保存，分批檢測，CgA 和UⅡ（試劑盒購自上海研謹生物科技有限公司） 檢測采用ELISA 法，多孔酶標板及試劑平衡至室溫，標準品梯度稀釋，多孔板自動洗板,手工甩板，標本室溫解融，稀釋至合適濃度，多孔板設樣品孔，標準品孔及空白對照孔，依次加入100μl 待測樣品、標準品及稀釋液，輕輕晃動混勻，酶標板覆膜，37℃溫育2h，棄去液體，甩干,洗滌液洗滌5 次，每孔加入現配制的生物素標記的抗體工作液100μl，37℃溫育1h,棄去液體，甩干洗板，每孔加入酶標試劑 100μl，37℃溫育30min 后洗板3 次,然后依次加入顯色劑A、B 顯色后加入終止液,酶標儀（Multiskan Sky 型，美國賽默飛公司）空白調零，450nm 處檢測各孔OD 值，依據標準曲線計算樣品孔濃度。

1.3 超聲心動圖檢查 儀器為美國飛利浦公司生產的IE33，儀器探頭設置為3.5~5.0MHZ，檢測左心室射血分數（LVEF）和左室縮短分數（LVFS），檢測過程由本院特檢科高級職稱醫師完成。

1.4 統計學處理 統計分析采用SPSS19.0 軟件，計量資料用（)表示，組間比較使用t 檢驗或方差分析，計數資料采用χ2檢驗，相關性采用Pearson 相關分析。檢驗標準α=0.05。

2 結果

2.1 觀察組和對照組血清CgA、UⅡ、CK-MB 及超聲心動圖指標比較 觀察組血清CgA 和CK-MB明顯高于對照組（P＜0.05），而 UⅡ、LVEF 和 LVFS明顯低于對照組（P＜0.05）。見表2。

2.2 觀察組不同病情患兒血清CgA、UⅡ、CK-MB及超聲心動圖指標比較 重度心衰患兒血清CgA和CK-MB 明顯高于無心衰、輕度心衰和中度心衰患兒（P＜0.05），而 UⅡ、LVEF 和 LVFS 明顯低于無心衰、輕度心衰和中度心衰患兒（P＜0.05）。見表3。

2.3 相關性分析 將患兒血清CgA、UⅡ、CK-MB與 LVEF、LVFS 進行相關分析，結果顯示：CgA 與LVEF、LVFS 呈正相關 (r=0.410、0.378，P＜0.05)；CK-MB 與 LVEF、LVFS 呈正相關 (r=0.367、0.382，P＜0.05)；UⅡ與 LVEF、LVFS 呈負相關 (r=-0.402、-0.410,P＜0.05)。

表2 觀察組和對照組血清CgA、UⅡ、CK-MB 及超聲心動圖指標比較

表3 觀察組不同病情患兒血清CgA、UⅡ、CK-MB 及超聲心動圖指標比較

3 討論

病毒性心肌炎是小兒危重癥之一,相比于成年心肌炎患者，兒童心肌炎的病情進展速度更快，遠期臨床預后的惡化更為明顯,同時兒童心肌炎患者合并惡性心血管臨床結局的發生風險較高[7]。神經內分泌機制的調節機能及血管活性物質的釋放與心肌炎發病過程中心臟結果及功能的損害密切相關，其在適宜的范圍內能夠調節心臟節律、功能的變化,但在病理狀態下血管活性肽神經內分泌調節機制的失常是導致心功能損害及惡性心臟結局的原因之一[8,9]。CgA 是是嗜酸性髓質細胞及其他神經內分泌細胞分泌的可溶性糖蛋白,其包括了439 個氨基酸結構，能夠拮抗腎上腺素、去甲腎上腺素及血管內皮素的分泌及縮血管作用,從而引起冠脈及外周血管的擴張，降低其對縮血管物質的敏感度，與心臟功能衰竭的關系十分密切,并且參與心臟重構的過程；UⅡ是強烈的縮血管物質,通過影響到心血管系統的血流灌注穩定性,導致血管壁壓力的增加，影響到心肌細胞組織的血流灌注量，提高了灌注阻力，進而影響到了心肌炎的病情進展[10]；CKMB 是心肌細胞損傷相關因子，在冠心病患者心肌梗塞患者中，CK-MB 的表達可明顯的上升。部分研究者探討了CK-MB 的表達與心肌炎患者的病情關系，認為CK-MB 的表達上升與心肌炎患者的病情密切相關[11]，但缺乏對于CgA、UⅡ的表達與心肌炎的病情關系研究。

本次研究發現，在心肌炎患兒中，血清CgA、CK-MB 的表達濃度均明顯的上升，高于正常對照組人群，UII 的表達明顯下降，低于對照組，差異較為明顯,提示了CgA、UⅡ、CK-MB 的差異性表達均能夠參與到心肌炎的病情進展過程。CgA、UⅡ、CK-MB 對于心肌炎患者的病情綜合性影響，在于CgA、UⅡ、CK-MB 的表達濃度的改變，能夠通過下列方式或者途徑進而影響到心肌炎病情[12,13]：⑴CgA 的表達上升能夠通過提高心肌炎患者的心肌細胞的重塑性改變,導致心肌細胞收縮和舒張功能的障礙,進而促進心肌炎患者的病情進展；⑵UII 的表達下降,能夠引起心臟收縮功能及外周血管張力的降低,其可能間接導致心臟及外周循環功能的衰竭；⑶CK-MB 的表達上升主要由于心肌細胞線粒體的損傷或者膜完整性的破壞有關。曹學雷等[14]研究者也認為，CK-MB 的表達濃度的上升與心肌細胞的溶解程度或者缺血壞死程度密切相關,在心肌細胞壞死較為徹底的患者中，CK-MB 的表達濃度可翻倍上升。在探討 CgA、UⅡ、CK-MB 的表達與心肌炎患者病情關系的過程中,可以發現在重度心衰組患者中，CgA、CK-MB 的表達明顯上升，而U II 的表達明顯下降，提示了相關指標與心肌炎患者的病情存在密切的關系,這主要由于患者的心衰程度越高，心肌細胞的損害越為明顯，心臟的病理生理性相關進展程度越高, 從而導致CgA、UⅡ、CKMB 的差異性表達更為顯著。但部分研究者并不認為CK-MB 的表達與心肌炎患者的病情相關，存在不同的臨床結論主要考慮與CK-MB 指標檢測的時間節點的不同有關[15]。左心室射血分數（LVEF）和左室縮短分數（LVFS）是評估患者心功能的相關指標，相關關系分析研究可見，CgA、CK-MB 的表達與患者的心功能指標正相關，而UII 的表達與心功能患者的病情成負相關, 進一步提示了CgA、UⅡ、CK-MB 的表達與心肌炎患者的病情關系。

綜上所述,在心肌炎患兒中，CgA、CK-MB 的表達濃度均明顯上升，UII 的表達明顯下降, 同時CgA、UⅡ、CK-MB 的表達與心肌炎患兒的心功能或者心衰程度密切相關。