豆粕影響日本鰻鱺黑仔鰻飼料中發酵豆粕對魚粉的替代效果：生長、抗氧化能力以及生化指標

李寧宇，劉利平，華雪銘，李 向，姚靜婷，吳 盟

（1.農業農村部魚類營養與環境生態研究中心，上海海洋大學，上海 201306；2.農業農村部淡水水產種質資源重點實驗室，上海海洋大學，上海 201306；3.水產科學國家級實驗教學示范中心，上海海洋大學，上海 201306）

日本鰻鱺（Anguilla japonica）是一種富含蛋白質和脂肪的優良食用魚類，其味道鮮美、營養豐富，具有一定的藥用功能，自古以來都是我國民間珍貴的滋補食物，被視為“水中人參”。日本鰻鱺仔魚期的餌料是其存活和變態的關鍵［1］，但可供參考的相關營養飼料學資料非常有限，嚴重阻礙了日本鰻鱺養殖業的發展。魚粉一直以來是鰻鱺飼料中不可或缺的優質蛋白源［2］，但國內魚粉資源有限，高度依賴進口。隨著世界范圍內水產品消費量的增加，水產養殖業對魚粉的需求量急劇上升，魚粉價格一直居高不下并成為飼料行業可持續發展的瓶頸［3］。因此減少對魚粉的依賴是日本鰻鱺仔魚期飼料研發需要重點關注的問題之一。

豆粕蛋白含量較高，是較為理想的蛋白源［4］。已有的應用研究表明，在不同水產動物間，雖然豆粕替代魚粉的最適量存在較大差異，但普遍呈現水產動物的生長隨豆粕用量增大而下降的趨勢［5-8］。蛋氨酸含量不足和抗營養因子含量較高是限制豆粕利用的主要原因，飼料中氨基酸不平衡對水產動物產生的負面效果與飼料中豆粕對魚粉的替代量成正比［9］。豆粕中的抗營養因子易導致水產動物腸胃炎癥，從而影響其生長和生理功能［10］。有研究表明，利用微生物發酵法對原料豆粕進行發酵能更加有效地利用豆粕，減少其負面效果。發酵過程產生的豐富酶類可把大分子量的大豆蛋白高效轉化為大豆肽，與具有相同氨基酸組成的大豆蛋白相比，大豆肽表現出許多特有的生化特性和優勢［11］。在條石鯛（Oplegnathus fasciatus）［12］、 雜 交 羅 非 魚（Oreochromis nilolicus×O.aureus）［13］、鯉（Cyprinus carpio）［14］等多種水產動物的研究中發現，飼料中用發酵豆粕分別替代60%、34.2%和100%的魚粉并不會顯著影響實驗動物的生長和存活；適量添加發酵豆粕還有助于改善水產動物的消化生理特性，如飼料中添加20%發酵豆粕使黑鯛（Acanthopagrus schlegelii）腸指狀絨毛高度增加、數量增多，絨毛間隙變小，腸絨毛彎曲度增加［15］。也有研究發現，相比只使用發酵豆粕的飼料，在含有15%發酵豆粕的飼料中輔以15.45%的豆粕會促進羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）的生長［16］。

豆粕發酵后營養特性發生明顯改變，其成本也顯著高于普通豆粕，因此配方中發酵豆粕和普通豆粕的配比將直接影響飼料質量、價格以及水產動物的生長和健康，但相關研究對此鮮有報道。鑒于此，本文以日本鰻鱺黑仔鰻為研究對象，研究發酵豆粕替代部分魚粉對其生長性能、血清和肝臟的抗氧化能力以及生化指標的影響，并在此基礎上探討豆粕在不同發酵豆粕替代水平下可能發揮的作用，旨在為日本鰻鱺黑仔鰻飼料中魚粉、發酵豆粕和豆粕的合理使用提供理論依據，為后續研究的開展提供參考。

1 材料與方法

1.1 飼料配方及制作

參考日本鰻鱺黑仔鰻營養需求（SC／T 1004-2010），設計5組實驗飼料。根據發酵豆粕的用量，分別將各組定義為對照組T0（60%魚粉+5%豆粕）、試驗組分別為T10（53%魚粉+5%豆粕+10%發酵豆粕）、T20（47%魚粉+5%豆粕+20%發酵豆粕）、T14.5（53%魚粉 +14.5%發酵豆粕）、T24.5（47%魚粉 +24.5%發酵豆粕）。將飼料原料充分粉碎，過100目篩網，按照各種飼料原料的質量由小到大逐級混勻，隨后密封、干燥，并在避光、低溫條件保存。另制備分別添加100 mg·kg-1稀土元素作為外源指示劑的5組飼料，用于表觀消化率的測定。每次投喂前根據飼料配方添加魚油，重復2次過100目篩，加入少量水（飼料∶水 ＝1∶0.7），將飼料制作成面團狀后投喂。飼料配方及成分分析見表1。

1.2 飼養管理

本實驗在上海海洋大學濱?；剡M行。實驗前對水泥池進行消毒處理，使用漂白粉浸泡后用水槍沖洗干凈。實驗所用日本鰻鱺由長江口捕撈而得，在上海海洋大學實驗室循環水系統中用搖蚊幼蟲將日本鰻鱺玻璃鰻暫養至黑仔鰻時期，再轉至本次實驗所在的濱?；剡M行為期2周的適應，期間使用對照組飼料投喂。之后挑選外觀正常、機體健康以及規格大小相近的實驗魚（0.405±0.003）g放入網箱中。按飼料分成 5組，每組3重復，在水泥池中架設共15個網箱（長 ×寬×高 ＝1 m×1 m×1.5 m），每網箱投放25尾實驗魚。分組后繼續使用對照組飼料暫養1周，待日本鰻鱺生理狀況趨于穩定后，正式開始實驗。日投喂量為體質量的5%～10%，視攝食情況酌情調整，每日早晚各投喂一次（6∶00、18∶00），每次各占總投喂量的50%。實驗周期為76 d，養殖水體24 h充氣，水溫25～30℃，水溶氧≥6 mg·L-1，氨氮含量≤0.3 mg·L-1。養殖期間不定期吸污換水，始終保持養殖水體清澈干凈，每日記錄攝食情況及死亡率。

1.3 樣品采集

養殖實驗結束前5周改用投喂含有稀土元素指示劑的飼料，適應1周后開始收集糞便樣本持續4周。每次投喂飼料0.5 h后收集殘餌，投喂2 h后采用虹吸法收集新鮮糞便，冷凍干燥至恒重后得到糞便樣本，放置于室溫條件下的干燥器中保存。

表1 飼料配方及營養水平Tab.1 Com position and nutrient levels of diets （air dry basis，%）

養殖實驗結束后，實驗魚饑餓24 h。隨后逐個網箱對實驗魚稱總重、計數。從每個實驗網箱內隨機取13尾魚，用丁香酚麻醉后，分別量體長、稱質量；取3尾魚獲取肌肉樣品，用于常規營養組成（水分、蛋白、脂肪和灰分）分析；取7尾魚采用斷尾的方式獲取全血并置于1.5 mL的無菌離心管中，隨后在4℃下靜置6 h，3 500 r·min-1離心15 min，取上清液即得血清；取3尾魚的肝臟，同血清用于抗氧化和生化指標的測定。所有樣品均放置在無RNA酶、無菌的離心管中，并暫時保存于液氮中，隨后轉入-20℃的冰箱中保存以待后續分析測定。

1.4 樣品測定與分析

1.4.1 生長性能測定

成活率（survival rate，SR，%）＝實驗結束時魚尾數／實驗初始時魚尾數×100

增重率（weight gain rate，WGR，%）＝（終末平均體質量-初始平均體質量）／初始平均體質量×100

特定生長率（specific growth rate，SGR，%·d-1）＝（ln終末平均體質量-ln初始平均體質量）×100／實驗周期

準確稱取0.100 0 g已恒重的飼料或糞便置于坩堝中，碳化灰化后，加入混合酸（濃硝酸∶高氯酸＝10∶3），加熱消解至澄清透明，冷卻至室溫，用超純水定容到100 mL容量瓶中。經過0.22μm濾膜過濾后放入進樣瓶中。使用ICPMS 7700型電感耦合等離子體質譜儀（安捷倫，美國）對樣品中稀土元素進行定量測定，根據以下計算公式得出各飼料組的表觀消化率：

表觀消化率（apparent digestibility，AD，%）＝（1-飼料中稀土元素的含量／糞便中稀土元素的含量）×100。

1.4.2 肌肉常規成分

肌肉常規檢測：粗灰分（crude ash，CA）在550℃馬弗爐中（GB／T 6438-2007）測定，粗蛋白質（crude protein，CP）采用全自動凱氏定氮儀（GB／T 6432-94）測定，粗脂肪（crude lipid，CL）采用氯仿甲醇法測定，水分（moisture，M）采用（GB／T 6435-2014）方法在105℃條件下烘干測定。

1.4.3 血清及肝臟抗氧化及生化指標

將血清和冰浴勻漿后的肝臟勻漿液（1∶10，w／v）分別稀釋至適宜濃度后，使用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒測定總超氧化物歧化酶（T-SOD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）、總抗氧化能力（T-AOC）、谷丙轉氨酶（AST）、谷草轉氨酶（ALT）、白蛋白（ALB）、總蛋白（TP）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、堿性磷酸酶（AKP）以及肝臟蛋白含量等抗氧化及生化指標。

1.5 數據處理和統計分析

實驗結果用平均數±標準差（Mean±SD）表示，所有數據使用SPSS 17.0分析軟件中的單因素方差分析（One-Way ANOVA）和Duncan氏法多重比較進行差異顯著性分析，其中P＜0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻生長性能的影響

由表2可知，除T14.5組外，其余4組之間存活率無顯著性差異（P＞0.05）；豆粕5%含量不變的條件下，在T0、T10、T20 3組中，隨著發酵豆粕用量的增加，存活率、特定生長率、增重率、表觀消化率均呈現逐漸升高的趨勢；豆粕被發酵豆粕替代后，在T10組與T14.5組、T20組與T24.5組的比較中，T10組的特定生長率、增重率以及存活率均顯著高于 T14.5組（P＜0.05），表觀消化率無顯著性差異（P＞0.05）；T20組的特定生長率、增重率、存活率以及表觀消化率與T24.5組無顯著性差異（P＞0.05）。

2.2 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻肌肉營養成分的影響

由表3可知，在 T0、T10、T20 3組中，肌肉粗蛋白含量隨著發酵豆粕用量的增加呈先降后增的趨勢，且3個組間差異顯著（P＜0.05）；肌肉粗脂肪的趨勢則相反。在T10組與T14.5組、T20組與T24.5組的比較中，T10組粗蛋白含量顯著低于 T14.5組（P＜0.05），T20組粗蛋白含量顯著高于 T24.5組（P＜0.05），粗脂肪結果均與粗蛋白相反。各組水分均顯著低于對照組（P＜0.05），粗灰分除 T24.5組外各組與對照組相比無顯著性差異（P＞0.05）。

表2 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻生長性能的影響Tab.2 Effects of replacement of FM and SBM by FSBM on the grow th performance of Anguilla japonica black fry

表3 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻肌肉營養成分的影響Tab.3 Effects of rep lacement of FM and SBM by FSBM on muscle nutritional components of Anguilla japonica black fry（%dry basis）

2.3 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻血清抗氧化能力和生化指標的影響

如表4所示，總超氧化物歧化酶（T-SOD）除T10組外均與對照組差異顯著（P＜0.05），在T0、T10、T20 3組間隨著發酵豆粕用量的增加呈現先降低升高的趨勢；T10組顯著低于T14.5組（P＜0.05），T20組顯著高于 T24.5組（P＜0.05）。丙二醛（MDA）含量各組均顯著低于對照組（P＜0.05），在 T0、T10、T20 3組中隨著發酵豆粕用量的增加呈先降低后升高的趨勢；T10組顯著小于T14.5組（P＜0.05），T20組顯著高于 T24.5組（P＜0.05）?？偪寡趸芰Γ═-AOC）除 T14.5組外均顯著高于對照組（P＜0.05），在 T0、T10、T20 3組中隨著發酵豆粕用量的增加呈逐漸上升的趨勢；T10組顯著高于 T14.5（P＜0.05），T20組與T24.5差異不顯著（P＞0.05）。

血清生化指標見表5，在T0、T10、T20 3組間隨著發酵豆粕用量的增加，白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、堿性磷酸酶（AKP）、總膽固醇（TC）呈現逐漸增加的趨勢，谷草轉氨酶（AST）、總蛋白（TP）呈現先增加后減少的趨勢，谷丙轉氨酶（ALT）呈現逐漸降低的趨勢；在T10與T14.5兩組間，T10組 TP、AKP、AST、GLB、AKP顯著高于T14.5組（P＜0.05），T10組白球比（A／G）顯著低于 T14.5組（P＜0.05），其余各項指標差異不顯著（P＞0.05）；在 T20與 T24.5兩組間，T20組TP、TC、TG、ALB、GLB、AKP、A／G顯著高于 T24.5組（P＜0.05），ALT和 AST兩組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻肝臟抗氧化能力和生化指標的影響

肝臟抗氧化指標見表6。4個試驗組的肝臟T-SOD、T-AOC、CAT活性顯著高于對照組（P＜0.05），MDA含量各組均低于對照組。在 T0、T10、T20 3組間，隨著發酵豆粕用量的升高，TSOD、T-AOC和CAT的活性呈現逐漸增加的趨勢，MDA呈現減少的趨勢。在T10與T14.5兩組之間，T10組 T-SOD、T-AOC、CAT活性顯著低于T14.5組（P＜0.05）；在 T20與 T24.5兩組之間，T20組 T-SOD、T-AOC、CAT活性顯著低于 T24.5組（P＜0.05）；MDA在 T10組顯著低于 T14.5組（P＜0.05），T20組與 T24.5組無顯著差異（P＞0.05）。

表4 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻血清抗氧化指標的影響Tab.4 Effects of replacement of FM and SBM by FSBM on antioxidant indices in serum of Anguilla japonica black fry （%dry basis）

肝臟生化指標見表7。在 T0、T10、T20 3組間，隨著發酵豆粕用量的增加，ALT、AST呈現先減少后增加的趨勢，TG呈現逐漸減少的趨勢，AKP呈現逐漸增高的趨勢。在T10與T14.5兩組間，T10組的ALT和TG均顯著小于T14.5組（P＜0.05），AKP顯著大于 T14.5組（P＜0.05），AST兩組間差異不顯著（P＞0.05）；在 T20與T24.5兩組間，T20組 AST顯著小于 T24.5組（P＜0.05），AKP、ALT顯著大于 T24.5組（P＜0.05），TG兩組間差異不顯著（P＞0.05）。

表5 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻血清生化指標的影響Tab.5 Effects of rep lacement of FM and SBM by FSBM on serum biochem ical indices of Anguilla japonica black fry

表6 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻肝臟抗氧化指標的影響Tab.6 Effects of replacement of FM and SBM by FSBM on antioxidant indices in liver of Anguilla japonica black fry

表7 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻肝臟生化指標的影響Tab.7 Effects of rep lacem ent of FM and SBM by FSBM on biochem ical indices in liver of Anguilla japonica black fry

3 討論

3.1 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺生長性能的影響

研究發現，隨著飼料中發酵豆粕含量的增加，斑點叉尾鮰（Ietalurus punetaus）［17］、羅氏沼蝦［18］、點帶石斑魚（Epinephelus coioides）［19］的生長性能均呈現先升高后降低的趨勢，但最適宜用量存在顯著的種間差異，分別為2.5%、8%和7%。多數資料顯示水產動物對發酵豆粕的耐受性大都在15%以下，當超過此含量時，水產動物的生長性能會有一定程度的下降。而在本實驗中，隨著發酵豆粕替代魚粉比例的增加，日本鰻鱺的存活率、增重率、特定生長率以及表觀消化率均呈現上升趨勢。斑點叉尾鮰［17］的表觀消化率也隨著發酵豆粕用量的增加而上升，由此推測發酵豆粕有促進日本鰻鱺黑仔鰻腸道吸收的效果。當發酵豆粕用量到達20%時，日本鰻鱺黑仔鰻的各項生長性能都優于其他試驗組，可見其對發酵豆粕表現出較高的耐受性。肝、腸、胃等消化酶活性的顯著降低與鰻鱺的緩慢生長關系密切［20］，在本實驗中高用量的發酵豆粕中存在的消化酶可能在一定程度上改善了鰻鱺的生長性能［21］。

有關水產飼料中豆粕替代魚粉的研究發現，隨著豆粕含量的升高，水產動物的生長性能逐漸下降［22-24］。究其原因，是因為豆粕中含有大量的抗營養因子以及限制性氨基酸不足等對水產動物腸道健康產生了負面影響［25-29］。但也有學者發現，在水產動物飼料中添加少量豆粕反而會促進羅氏沼蝦的生長［16］，本研究中T10組的生長性能顯著優于T14.5組、T20組略微優于T 24.5組的結果與其相似。單寧和凝結素作為兩種常見的抗營養因子，其單獨存在時，會對胰淀粉酶活性產生抑制作用，但二者同時存在時，抑制作用消失［30］。IWASHITA等［31］的研究中也發現，飼料中只添加大豆皂苷會對虹鱒（Oncorhynchus mykiss）腸道產生有害影響，但同時添加大豆皂苷和大豆凝集素時，有害作用便減弱，這說明大豆皂苷和大豆凝集素的聯合效應會對虹鱒的腸道形態產生有益影響。由此推測，飼料中一定量的豆粕與發酵豆粕混合使用時所產生的抗營養因子聯合效應可能對鰻鱺產生了積極的效應，但產生聯合效應的適宜混合比例及其作用機制仍需進一步研究。

3.2 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺肌肉營養成分的影響

程成榮和劉永堅［13］研究發現，發酵豆粕部分代替魚粉對雜交羅非魚中粗灰分和粗脂肪的含量無顯著影響；冷向軍等［32］發現，發酵豆粕用量不影響凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）肌肉中的水分和粗蛋白質含量。然而馮建等［33］對大黃魚（Pseudosciaena crocea）的研究發現，隨著發酵豆粕用量的上升，粗灰分含量呈現上升的趨勢。李程瓊等［34］發現，發酵豆粕用量為16%和21%時，對日本鰻鱺肌肉中的粗蛋白含量和粗灰分含量的影響不同。上述結果說明發酵豆粕對肌肉成分的影響因水產動物種類而異。本研究中隨著飼料中發酵豆粕含量的升高，日本鰻鱺黑仔鰻肌肉粗蛋白、粗灰分與粗脂肪含量也呈現不同的變化。但目前對于發酵豆粕和魚粉用量影響肌肉營養成分的機制尚不清楚。有研究表明，日本鰻鱺口感主要來自其高脂肪［35］。在本研究中，發酵豆粕的用量為10%時，日本鰻鱺肌肉中的粗脂肪含量顯著升高，說明T10組飼料有改善日本鰻鱺黑仔鰻口感的潛質，但其中的機理仍待進一步的研究。

對奧尼羅非魚（O.niloticus×O.aureus）［22］、牙 鲆 （Paralichthys olivaceus）［23］和 軍 曹 魚（Rachycentron canadum）［36］等研究發現，隨著豆粕使用量的增加，肌肉粗蛋白含量逐漸下降，本實驗中魚粉用量由60%下降到53%時T10組與T14.5兩組間的對比結果與其一致；但當魚粉下降到46%時，豆粕的使用（T20組與T24.5組）反而使肌肉粗蛋白含量上升，粗脂肪的結果則相反。上述結果表明，魚粉與發酵豆粕的配比在一定程度上決定著豆粕對肌肉蛋白質含量的影響，但是否因為在日本鰻鱺黑仔鰻體內產生不同的聯合效應，從而在一定程度上影響其生長和生理，并最終在體成分上表現出一定的差異，還有待進一步研究。

3.3 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺黑仔鰻血清和肝臟抗氧化能力的影響

與其他水產動物相似，日本鰻鱺機體中也存在氧自由基（OFR）的動態平衡［37-39］?？偝趸锲缁福═-SOD）和過氧化氫酶（CAT）在清除氧自由基的穩態系統中發揮著重要的作用。T-SOD可以將O2-化為H2O2和O2，H2O2進而被CAT分解成H2O和丙二醛（MDA）是脂質過氧化后的負面產物，對機體損害嚴重［41］；而總抗氧化能力（T-AOC）是衡量魚體抗氧化能力的綜合指標［42］。在本研究中，比較 T0、T10和 T20 3組發現，發酵豆粕用量增加顯著提升了肝臟中TSOD、CAT、T-AOC的水平，降低了MDA的水平，這與劉韜等［43］在凡納濱對蝦中的研究結果一致，說明發酵豆粕可在一定程度上增強日本鰻鱺黑仔鰻肝臟的抗氧化能力；本次實驗中，血清T-SOD活性和MDA含量變化也顯示出發酵豆粕增強機體抗氧化能力的作用。與T10組相比，T14.5組無論是肝臟還是血清過氧化程度和T-SOD均高于T10組，可能是過高的MDA水平激發了機體清除氧自由基系統的負反饋調節所致。由此可見，當魚粉用量由60%下降到53%時，10%的發酵豆粕搭配5%的豆粕飼料配比較14.5%的發酵豆粕配比能更顯著地提升日本鰻鱺黑仔鰻的抗氧化能力。而T24.5組血清MDA含量顯著低于T20組、肝臟T-AOC顯著高于T20組，說明當魚粉用量下降到46%時，不含5%的豆粕可能更有利提升日本鰻鱺黑仔鰻的抗氧化能力。

3.4 發酵豆粕替代魚粉和豆粕對日本鰻鱺血清和肝臟生化指標的影響

堿性磷酸酶（AKP）可分解磷酸酯使磷酸鹽等物質沉積于魚骨之中，促進水產動物骨骼生長［44-45］。魚類與高等脊椎動物相似，體內均存在磷的穩態機制［46］。當水產動物血磷含量不足時，AKP便會大量合成并釋放進入血液。在T0、T10、T20 3組中，隨著發酵豆粕替代量的升高AKP呈現逐漸升高的趨勢，推測可能是發酵豆粕降低了日本鰻鱺黑仔鰻的血磷濃度或對磷的利用率，由此激發負反饋調節機制以維持體內磷穩態；在T10組與 T14.5組、T20組與 T24.5組的比較中發現，含有5%豆粕組的肝臟和血清中AKP均顯著高于不含5%豆粕組。結合生長指標認為，T10組相比生長緩慢的T14.5組更需要高水平的AKP持續分解產生無機礦物質來供應其骨骼生長；而T20組和T24.5組，生長雖無顯著差異，但前者的AKP活性遠高于后者，或預示T20組有良好的生長潛力。

甘油三酯（TG）和總膽固醇（TC）是血清脂類的重要組成，均能反映機體脂類代謝的程度。血清中TG主要來源于營養物質消化吸收與糖元和脂肪酸的轉化。當血清TG在一定范圍內增高時，說明機體脂類代謝增強。膽固醇構成細胞膜的重要成分，當水產動物膽固醇缺失時，細胞容易破裂。卵磷脂膽固醇脂?；D移酶（lecithincholesterolacyltransferase，LCAT）是在肝臟催化生成血清膽固醇的重要酶類，可催化生成血清中70%～80%的膽固醇，當血清中膽固醇含量降低時，表示LCAT在肝臟中代謝受阻，且往往伴隨著血清轉氨酶的升高，故血清膽固醇可作為水產動物肝功能代謝的重要指標。在人類等高等動物中，脂類代謝能力較強，TG和TC變化趨勢往往一致［47-48］；對水產動物而言，由于脂類代謝能力較弱，機體的TC含量比TG更易受飼料脂肪水平影響，兩者的變化趨勢往往不一致［49］。但在本實驗中，血清中的TG和TC含量隨發酵豆粕用量增加均呈現逐漸升高的趨勢，由此推測日本鰻鱺黑仔鰻具有較強的脂類代謝能力，當魚粉用量由60%下降到46%時，5%的豆粕有助于機體維持較高的脂肪代謝水平，其中的機理有待進一步挖掘。

谷丙轉氨酶（ALT）和谷草轉氨酶（AST）是水產動物機體中參與氨基酸代謝的重要酶類，在健康情況下血清中含量較低，主要存在于肝臟中。當肝功能出現損傷時，ALT和AST可由肝臟釋放進入血液，使得血清中兩者的酶活性出現顯著升高，因此可作為反映肝功能的重要指標［50］。血液中的總蛋白（TP）由肝臟合成，包括白蛋白（ALB）和球蛋白（GLB），TP含量升高可以作為水產動物肝臟合成蛋白質能力增強的表現。ALB參與維持水產動物血液中的滲透壓并能以膠體的形式對球蛋白起到保護的作用，其含量與有功能的肝臟細胞數量成正比［51］。GLB由漿細胞分泌，其含量增加有利于提高機體的抗病力；ALB與GLB的比值，即白球比（A／G）也能夠反映機體的抵抗力，該值的降低說明體內有更多的球蛋白合成用于提高機體免疫機能［52］。T0、T10和 T20 3組間血清中的ALT呈下降的趨勢，說明發酵豆粕替代魚粉有助于減少日本鰻鱺肝臟受損傷的風險；同樣，AST分析結果認為，無論在10%還是20%發酵豆粕用量下，搭配5%豆粕比不含有豆粕更能體現保護肝臟的作用［16］。本實驗中TP、ALB和GLB含量在T0、T10和T20之間的比較，說明用發酵豆粕替代魚粉可以不同程度地增強肝功能及蛋白質合成能力，結合轉氨酶結果認為在此過程中谷丙轉氨酶發揮了重要作用；同不含豆粕的試驗組相比，含有5%豆粕提高了血清中的TP以及GLB含量，說明搭配5%豆粕有利于提高日本鰻鱺黑仔鰻的蛋白質合成能力及免疫能力，降低肝臟受損傷的風險，這在T24.5組表現的尤為明顯。

4 小結

在本實驗中，飼料中用發酵豆粕替代魚粉可以提高日本鰻鱺黑仔鰻的生長性能、抗氧化能力以及肝功能，且最佳用量為20%。豆粕影響發酵豆粕對魚粉的替代效果，但效果因發酵豆粕用量而異：用10%的發酵豆粕替代豆粕時，搭配5%的豆粕可以取得較好的生長、抗氧化和保肝效果；用20%的發酵豆粕替代魚粉時，搭配5%的豆粕能降低肝臟受損的風險，不含5%豆粕則更有利于肝臟的抗氧化能力。