4種微生物殺蟲劑對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力及田間防效評價

張秀霞　白婷婷　毛曉紅　周仙紅　張安盛

摘要：本研究采用浸漬法測定4種微生物殺蟲劑對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力，并進行防治大蔥甜菜夜蛾的田間藥效試驗。室內(nèi)測定結果表明，4種微生物殺蟲劑對甜菜夜蛾的毒力順序為：甜菜夜蛾核型多角體病毒>金龜子綠僵菌CQMa421>蘇云金桿菌>球孢白僵菌，其中甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力較高，LC50值分別為11.145、128.249 mg/L。田間試驗結果表明，666.7m2 80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑用量50、60 mL，16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑用量80、100 g，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑用量3.5、5.0 g，藥后10 d的校正防效均可達90%以上，持效性較好。

關鍵詞：微生物殺蟲劑;甜菜夜蛾;室內(nèi)毒力;田間防效

中圖分類號：S482.3+9：S433.4文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2020）04-0141-05

Abstract The toxicity of four microbial insecticides to Spodoptera exigua in laboratory was determined by impregnation method， and their field control efficacy test was also carried out. The results showed that the indoor toxicity of the four tested insecticides to Spodoptera exigua was ranked as Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus>Metarhizium anisopliae CQMa421>Bacillus thuringiensis>Beauveria bassiana. Among them， the Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus and Metarhizium anisopliae CQMa421 had higher indoor toxicity to Spodoptera exigua with the LC50 value as 11.145 and 128.249 mg/L， respectively. The field control efficacy test results showed that 50 and 60 mL per 666.7m2of 8 billion spores per milliliter of Metarhizium anisopliae CQMa421 dispersible oil suspension agent， 80 and 100 g per 666.7m2of 16 000 IU/mg of Bacillus thuringiensis wettable powder preparation， 3.5 and 5.0 g per 666.7m2of 30 billion PIB per grams of Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus water dispersible granule agent preparation had higher long-last toxicity with the corrected control efficacy more than 90% after treated for 10 days.

Keywords Microbial insecticide; Spodoptera exigua; Indoor toxicity; Field control efficacy

甜菜夜蛾（Spodoptera exigua Hübner）又名貪夜蛾、玉米夜蛾，屬鱗翅目夜蛾科[1，2]，是一種分布廣、食性雜、寄主范圍廣的害蟲，為害35科108屬170多種植物，包括十字花科、茄科、葫蘆科、豆類等多種蔬菜，還嚴重為害大蔥等百合科作物[3，4]。該害蟲在大蔥上為害形式主要以幼蟲群集葉背，吐絲結網(wǎng)，嚼食蔥葉，啃食并鉆入蔥管內(nèi)隱藏，取食管內(nèi)葉肉形成缺刻、孔洞或網(wǎng)狀蔥葉，暴食期后可吃光蔥葉等[5，6]。

近年來，山東省大蔥主產(chǎn)區(qū)甜菜夜蛾發(fā)生面積大且為害嚴重，部分地區(qū)毀產(chǎn)絕收，嚴重影響大蔥產(chǎn)量和質量，但隨著農(nóng)藥的頻繁使用以及不合理用藥，甜菜夜蛾對有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥產(chǎn)生較高抗性，這對山東省大蔥安全生產(chǎn)造成重大威脅[7-9]。為了篩選控制大蔥上甜菜夜蛾的有效藥劑，本研究測定了4種微生物殺蟲劑對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力及其在大蔥甜菜夜蛾上的田間防治效果，以期為生產(chǎn)上安全控制甜菜夜蛾及藥劑的合理使用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試藥劑微生物殺蟲劑：80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑（重慶聚立信生物工程有限公司產(chǎn)品），16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑（武漢科諾生物科技股份有限公司產(chǎn)品），100億孢子/克球孢白僵菌可分散油懸浮劑（山西綠海農(nóng)藥科技有限公司產(chǎn)品），300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑（河南省濟源白云實業(yè)有限公司產(chǎn)品）。對照化學藥劑：15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑（山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司產(chǎn)品）。均為市場購買。

1.1.2 供試蟲源[HTSS] 甜菜夜蛾蛹購自河南省濟源白云實業(yè)有限公司，室內(nèi)人工飼料飼養(yǎng)，建立穩(wěn)定種群。飼養(yǎng)條件：（25±2）℃，相對濕度70%左右，光周期為16 h∶8 h（L∶D）。挑選體長一致且健康的2齡幼蟲備用。

1.2 主要儀器設備

RXZ型人工氣候箱（寧波江南儀器廠產(chǎn)品）;養(yǎng)蟲盒，由直徑6 cm、高7 cm的塑料食品盒改造而成，盒蓋上有15 mm×15 mm十字型通氣孔。

1.3 試驗方法

1.3.1 室內(nèi)毒力測定采用浸漬法。將各藥劑分別用蒸餾水按等比配制成7個系列質量濃度備用。將新鮮甘藍菜葉剪成直徑為6 cm圓片，清洗干凈，各藥液梯度均浸泡4個圓片，每個圓片浸泡10 s，取出，用濾紙吸除多余藥液并晾干，然后放入墊有濕潤濾紙的養(yǎng)蟲盒中，以浸清水為空白對照。各取40頭甜菜夜蛾2齡幼蟲放入浸蟲籠中，置于對應梯度藥液中浸漬10 s，每重復10頭幼蟲，以清水浸漬為對照。用毛筆將2齡幼蟲挑入養(yǎng)蟲盒中，盒蓋封口，置于26℃、相對濕度70%、光周期為16 h∶8 h（L∶D）的光照培養(yǎng)箱中，48 h后統(tǒng)計幼蟲死亡數(shù)量。

1.3.2 田間藥效試驗在山東省濟南市章丘區(qū)繡惠鎮(zhèn)綠竹園村的蔥地中進行。大蔥品種為‘百脈泉，2018年5月26日定植，種植密度為666.7m2 22 000～25 000株。試驗設計每666.7 m2 80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑用量分別為40、50、60 mL，16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑用量分別為50、80、100 g，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑用量分別為2.0、3.5、5.0 g，以15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑10 mL為標準對照，以清水為空白對照。每處理重復4次，小區(qū)面積40 m2。于7月15日噴藥，用水量為900 kg/hm2，此時甜菜夜蛾2～3齡幼蟲占85%左右。

于藥前調查小區(qū)蟲口基數(shù)，藥后1、3、7、10 d調查殘存活蟲數(shù)。采用5點取樣法取樣，每點4株大蔥。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2007及SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析，計算LC50值及95%置信區(qū)間、斜率等，并采用鄧肯氏新復極差法對田間試驗結果進行多重比較，計算蟲口減退率及校正防效。

蟲口減退率（%）=（施藥前活蟲數(shù)-施藥后活蟲數(shù)）/施藥前活蟲數(shù)×100 ;

校正防效（%）=（處理區(qū)蟲口減退率-對照區(qū)蟲口減退率）/（100-對照區(qū)蟲口減退率）×100。

2 結果與分析

2.1 供試藥劑對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力測定

由表1可以看出，各藥劑對甜菜夜蛾LC50的95%置信區(qū)間均不重疊，表明它們對甜菜夜蛾的毒力存在顯著差異。4種微生物殺蟲劑中以甜菜夜蛾核型多角體病毒的毒力最高，藥后48 h的LC50值為11.145 mg/L;其次為金龜子綠僵菌CQMa421，藥后48 h的LC50值為128.249 mg/L;蘇云金桿菌的毒力較低，藥后48 h的LC50值為1 978.474 mg/L;球孢白僵菌的毒力最低，藥后48 h的LC50值為4747.436 mg/L（表1）;而高效氯氟氰菊酯藥后48 h的LC50值為0.407 mg/L ，顯著高于4種微生物殺蟲劑的室內(nèi)毒力。通過室內(nèi)毒力測定，甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌對甜菜夜蛾毒力較高，可進行田間藥效試驗驗證。

2.2 供試藥劑對大蔥甜菜夜蛾的田間防治效果

由表2可以看出，藥后1～10 d，不同用量的300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑的校正防效為29.13%～92.43%，藥后10 d的校正防效達85%以上。藥后1～3 d，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑的校正防效均極顯著低于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑;藥后7 d與15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑的無顯著差異（2.0 g用量的除外）;藥后10 d的校正防效均極顯著高于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑。因此，300億PIB/克甜菜夜蛾核型多角體病毒水分散粒劑的持效性相對較高，666.7m2用量3.5、5.0 g 10 d的校正防效高達90%以上，可用于甜菜夜蛾的田間防治。

由表3可以看出，藥后1～10 d，不同用量80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑的校正防效為33.86%～93.22%，藥后10 d的校正防效達到87.01%～93.22%。藥后1～7 d，80億孢子/毫升金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑的校正防效均極顯著低于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑;藥后10 d，則極顯著高于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑。因此，該微生物殺蟲劑具有較高的持效性，666.7m2用量50、60 mL 10 d的校正防效高達90%以上，適用于田間防治甜菜夜蛾。

由表4可以看出，藥后1～10 d，不同用量16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑的校正防效為32.32%～92.85%，藥后10 d的校正防效最好，均達86%以上。藥后1～7 d，16 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑的校正防效均極顯著低于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑;藥后10 d的則極顯著高于15%高效氯氟氰菊酯可溶液劑。該微生物殺蟲劑的持效性也較高，666.7m2用量80、100 g 10 d的校正防效達到90%以上，田間防治效果更好。

3 討論與結論

生物防治已成為甜菜夜蛾綜合防治中的一項重要措施。甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌等可通過病毒復制或真菌侵染產(chǎn)生大量菌體并釋放毒素，使害蟲中毒并停止取食，導致害蟲因饑餓及血液和神經(jīng)中毒死亡[10-13]。該類微生物殺蟲劑具有持效期長、防效好、對天敵無傷害、害蟲不易產(chǎn)生抗性、不污染環(huán)境、對人畜安全等特點，是當前蔬菜、水果及其它農(nóng)作物上較為理想的一類綠色生物農(nóng)藥?[14]。但在使用過程中存在成本較高、持續(xù)作用和穩(wěn)定性較差等弊端，嚴重阻礙其廣泛應用。本研究發(fā)現(xiàn)，甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力較高，這與羅冰[13]、劉琴[15]等對甜菜夜蛾核型多角體病毒的研究報道一致。此外，田間藥效試驗中甜菜夜蛾核型多角體病毒藥后10 d的防效達85%以上，與徐愛仙[16]、楊妮娜[17]等在花椰菜上防治甜菜夜蛾的研究結果一致;蘇云金桿菌對大蔥甜菜夜蛾的防治藥后10 d的防效達86%以上，與祝延力[18]、張興國[19]等在甜菜、西蘭花上的防效有差異，這可能與甜菜夜蛾防治時期的蟲齡有關;對于金龜子綠僵菌CQMa421在甜菜夜蛾上的防治尚未見報道，但彭國雄等[20]報道了金龜子綠僵菌CQMa421可侵染鱗翅目害蟲，本研究中其藥后10 d防效可達87%以上。

防治時，室內(nèi)與自然環(huán)境之間有一定差距，主要是因為生物殺蟲劑的作用效果易受紫外線照射、光照、氣溫等環(huán)境條件影響。實際應用中可結合甜菜夜蛾幼蟲的習性及為害特點，選擇傍晚施藥，同時建議在甜菜夜蛾卵孵化盛期至低齡幼蟲高峰期施藥防治，以阻止幼蟲鉆入蔥葉內(nèi)為害。此外，還要嚴格按照試驗劑量施藥，以免產(chǎn)生藥害[21]。田間防治過程中，微生物殺蟲劑還應盡量與其它化學藥劑交替使用，減少用藥次數(shù)，避免長期、單一用藥。

甜菜夜蛾核型多角體病毒、金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌等微生物殺蟲劑具有低毒、安全、對環(huán)境無污染等優(yōu)點，代表了當今害蟲防治和抗性治理的一個新方向，應用前景廣闊。后續(xù)還需深入進行微生物殺蟲劑對甜菜夜蛾的毒力等研究來驗證其在生產(chǎn)中的應用效果，以便于更好地指導生產(chǎn)者科學用藥。

參 考 文 獻：

[1] 丁錦華，蘇建亞.農(nóng)業(yè)昆蟲學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002.

[2] 姚經(jīng)武，曹春霞，陳偉，等.4種藥劑對甜菜夜蛾幼蟲毒力比較測定[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2004（1）：57.

[3] 鄭霞林，王攀，王小平，等.大蔥甜菜夜蛾主要生物學習性、暴發(fā)成因及防治[J].長江蔬菜，2009（18）：4-7.

[4] 李貝貝，邢帥軍，牛景景.雜食性害蟲甜菜夜蛾的發(fā)生規(guī)律及綜合防治策略[J].江西農(nóng)業(yè)，2016（15）：24.

[5] 李兆華，趙波，王彥起.大蔥甜菜夜蛾的發(fā)生規(guī)律與藥劑防治[J].山東省農(nóng)業(yè)管理干部學院學報，2008，23（5）：178-179.

[6] 陳志品，羅麗，華秀英，等.蔥田甜菜夜蛾發(fā)生危害特性及防治技術[J].中國農(nóng)村小康科技，2004（7）：10.

[7] 羅禮智，曹雅忠，江幸福.甜菜夜蛾發(fā)生危害特點及其趨勢分析[J].植物保護，2000，26（3）：37-39.

[8] 周傳金，徐學芹.甜菜夜蛾的生物學特性及防治研究[J].中國甜菜，1993 （1）：24-27.

[9] 吳世昌，顧言真，沈忠良，等.甜菜夜蛾的抗藥性監(jiān)測及防治[J].植物保護學報，1995，22（1）：95- 96.

[10]李艷麗，潘進軍，賈晴蔚，等.甜菜夜蛾核型多角體病毒生物殺蟲劑防治甜菜夜蛾田間藥效試驗[J].華中昆蟲研究，2012（8）：147-149.

[11]張爽，楊佳利，馬軍，等.蘇云金桿菌（Bacillus thuringiensis）與球孢白僵菌（Beauveria bassiana）復配對小菜蛾幼蟲（Plutella xylostella）的影響研究[J].生物災害科學，2017，40（4）：288-291.

[12]顧麗嬙，李春香，張淑紅.球孢白僵菌和布氏白僵菌對甜菜夜蛾的室內(nèi)毒力測定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學，2009（3）：118-120.

[13]羅冰，袁盛勇，田學軍，等.球孢白僵菌MZ041016菌株對甜菜夜蛾幼蟲的毒力測定[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2010，38（36）：20653-20654.

[14]陳其津，李廣宏，龐義，等.甜菜夜蛾核多角體病毒殺蟲劑研究進展[J].中國病毒學，2000（S1）：237-238.

[15]劉琴，徐健，殷向東，等.甜菜夜蛾核型多角體病毒對甜菜夜蛾幼蟲的毒力測定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學，2006（1）：60-61.

[16]徐愛仙.甜菜夜蛾核型多角體病毒防治蔬菜甜菜夜蛾田間藥效試驗[J].長江蔬菜，2013（6）：50-51.

[17]楊妮娜，武懷恒，李文靜，等.30億PIB/mL甜菜夜蛾核型多角體病毒懸浮劑防治甘藍甜菜夜蛾田間藥效試驗[J].農(nóng)村經(jīng)濟與科技，2017，28（S1）：47-48.

[18]祝延立，黃梟，包淑英，等.幾種低毒農(nóng)藥防治甜菜夜蛾藥效試驗[J].中國糖料，2005（4）：34-35.

[19]張興國，李維根.甜菜夜蛾防治藥劑篩選試驗[J].中國農(nóng)村小康科技，2007（7）：73-74， 85.

[20]彭國雄，謝佳沁，夏玉先.金龜子綠僵菌CQMa421與殺蟲劑、殺菌劑的兼容性[J].中國生物防治學報，2017，33（6）：747-751.

[21]代建法.10%氟苯蟲酰胺SC等藥劑防治大蔥田甜菜夜蛾藥效試驗[J].安徽農(nóng)學通報，2014，20（Z1）：88-89.