豌豆蚜危害對四種苜蓿品種（系）可溶性蛋白和單寧含量變化的影響

王明春

（甘肅省武山縣城關鎮農業技術推廣與綜合服務中心，甘肅 武山 741300）

豌豆蚜是苜蓿上重要害蟲之一，在世界各地均有分布（包括中國）[1]。苜蓿對苜蓿斑蚜、苜蓿蚜、薊馬危害的生理變化均有研究，但苜蓿對豌豆蚜危害的生理變化未見報道，因此本試驗針對不同抗性苜蓿品種（系）受豌豆蚜危害前后體內可溶性蛋白、單寧的變化進行比較研究, 為抗蟲育種提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試苜蓿材料

供試苜蓿品種（系）為HA-3、甘農3號（G3）、金皇后(Golden Empress)、獵人河（Hunter river）, 其抗性于 2009 年 6月在室內采用大量蚜蟲幼苗侵染法鑒定結果見表1。

表1 苜蓿品種（系）來源及抗性

1.1.2 供試蟲源

試驗供試蟲源采自甘肅農業大學試驗田苜蓿植株上自然發生的蚜蟲，經鑒定為豌豆蚜。在養蟲室內飼養繁殖, 溫度(20±3)℃，相對濕度50±10%，光照16L:8D，其后代供實驗使用。

1.2 實驗處理

1.2.1 可溶性蛋白含量的測定

從苜蓿植株剪下葉片，稱取0.2g葉片組織，用蒸餾水洗2次后，用濾紙吸干表面水分，加0.1mol/L的0.1mol/LpH8.0的Tris-HCL緩沖液、約0.4g石英砂充分研磨后，5000rpm/min離心5min，收集上清液，用緩沖液定容至10ml,以0.1mol/LpH8.0的Tris-Hcl緩充液調零，測定260nm和280nm處的光密值，利用經驗公式計算出蛋白質濃度和每克鮮葉中的蛋白質含量。

1.2.2 單寧的測定方法

將新采的苜蓿葉片在烘箱中烘干、研碎，稱取苜蓿干粉0.3g,加醇溶液30ml置70℃水浴中浸提30分鐘，過濾殘渣用醇液洗滌，重復浸提1～2次，用5% FeCl3false溶液檢查不產生蘭色或綠色為止，收集浸提液和洗滌液于250毫升容量瓶中，定容。在100毫升容量瓶中盛約70毫升水，加10毫升浸提液，5毫升F—D試劑，10毫升飽和碳酸鈉溶液，加水定容，搖勻，30分鐘后，在760nm下，測定吸光度A。

1.3 數據處理

采用Excel2003統計分析軟件對數據進行處理、作圖，使用SPSS進行數據分析。

2 結果與分析

2.1 蚜蟲危害脅迫對可溶性蛋白含量的影響

紫花苜蓿不同抗性品種（系）與蚜蟲互作中可溶性蛋白含量的變化結果表明：蚜蟲危害脅迫前HA-3和HR的可溶性蛋白含量高于G3和JH，經方差分析表明感蟲品種、抗蟲品種和低抗品種的可溶性蛋白含量差異極顯著（F=34.86，P=0.0001＜0.01）；蚜蟲危害脅迫后，各抗性品種（系）的可溶性蛋白含量均隨危害脅迫的加劇有不同程度的下降，在接蚜后第三天的含量最低，低抗品種G3下降最快，其次是感蟲品種獵人河，HA-3和金皇后下降的最慢；在接蚜后的1-3天，獵人河的可溶性蛋白含量均較低（除第3天G3）。

2.2 蚜蟲危害脅迫對單寧含量的影響

紫花苜蓿不同抗性品種（系）與蚜蟲互作中單寧含量的變化結果（圖1）表明：蚜蟲危害脅迫前HA-3和HR的單寧含量高于G3和JH，經方差分析表明感蟲品種、抗蟲品種和低抗品種的單寧含量差異極顯著（F=11.22，P=0.0031＜0.01＝；蚜蟲危害脅迫后，各抗性品種（系）的單寧含量均隨危害脅迫的加劇有不同程度的上升，在接蚜后第三天的含量最高，抗蟲品系和感蟲品種上升較快，而低抗品種上升較慢；在蚜蟲危害脅迫的過程中內，抗蟲品系HA-3的單寧含量始終高于低抗品種和感蟲品種。

3 討論

3.1 單寧含量變化與抗蚜性的關系

本實驗中抗蟲品種的單寧含量在整個危害脅迫的過程中始終高于低抗品種、感蟲品種，表明單寧含量與苜蓿的抗性密切相關。

3.2 可溶性蛋白含量變化與抗蚜性的關系

本實驗中，接蚜前感蟲品種和抗蟲品種的可溶性蛋白含量低于低抗品種；在蚜蟲危害脅迫過程中，感蟲品種、低抗品種和抗蟲品種的SOD活性均有所下降。可溶性蛋白含量變化與抗蚜性的關系不明顯，有待于進一步研究。