臨床免疫學(xué)檢驗分析的影響因素探討及應(yīng)對措施

高志英

(臨汾市骨科醫(yī)院，山西 臨汾)

0 引言

臨床免疫學(xué)檢驗作為臨床疾病診療的重要檢驗項目，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗中占有重要地位。一份免疫學(xué)檢驗標(biāo)本，從標(biāo)本采集到報告發(fā)出，檢驗過程環(huán)節(jié)繁雜，任何環(huán)節(jié)的忽視，都會造成失誤，最終影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，必須重視臨床免疫學(xué)檢驗的影響因素，加強(qiáng)實驗室人員的專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)和考核制度，從思想意識和實踐技能上，提高質(zhì)量管理水平，規(guī)避檢驗分析過程中的影響因素，嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，更好的為臨床診療工作奠定基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年3月至2019年12月于我院進(jìn)行診療并進(jìn)行免疫學(xué)檢驗的患者臨床資料210例作為研究對象，隨機(jī)將210例資料分為對照組(n=105例)與研究組(n=105例)。對照組中，男性67例，女性38例，平均(52.2±6.4)歲；研究組中，男性72例，女性33例，平均(50.2±7.3)歲。對照組與研究組患者的性別與年齡結(jié)構(gòu)等資料的對比無明顯差異，不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

1.2 方法

對照組采取常規(guī)方式進(jìn)行檢驗，包括標(biāo)本采集、運(yùn)送、檢測等環(huán)節(jié)。

研究組加強(qiáng)檢驗分析各個環(huán)節(jié)的風(fēng)險防控和質(zhì)量管理，方法如下：

1.2.1 加強(qiáng)人員管理體系

對護(hù)理人員在標(biāo)本采集方面進(jìn)行嚴(yán)格的培訓(xùn)與考核，嚴(yán)格按照采集手冊進(jìn)行操作，盡量避免不合格標(biāo)本的出現(xiàn)。加強(qiáng)實驗室人員的專業(yè)培訓(xùn)，定期開展有目的性的業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)知識講座，提高實驗室人員檢驗分析的質(zhì)量控制意識和專業(yè)技術(shù)水平[2]。實驗室人員在檢驗分析過程中嚴(yán)格執(zhí)行檢驗分析的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

1.2.2 強(qiáng)化標(biāo)本管理體系

標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)化，實驗室人員對標(biāo)本的接收與處理，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)與操作規(guī)程執(zhí)行，對于不合格標(biāo)本，如：標(biāo)本量不夠、標(biāo)本溶血，則不進(jìn)行檢測，并及時與臨床聯(lián)系，采取合理的應(yīng)對措施。

1.2.3 強(qiáng)化環(huán)境、儀器與試劑的管理體系

一份檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅與標(biāo)本自身有關(guān)，還與周圍環(huán)境相關(guān)，比如實驗室的溫度、濕度、是否潔凈等，因此，本次研究嚴(yán)格控制實驗室的環(huán)境因素，使實驗室溫度控制在18～25℃，濕度控制在45～65%，保持實驗室環(huán)境潔凈，適宜實驗操作，避免實驗室因為潮濕，塑料器皿帶電吸附空氣中的顆粒而污染樣品[3]。進(jìn)行實驗前，實驗室人員認(rèn)真檢查實驗所用儀器是否正常運(yùn)行，是否按時維護(hù)，水浴箱溫度是否正常等。檢查試劑是否在有效期內(nèi)，是否足量，是否與試劑盒名稱相符，外觀是否正常，保存是否得當(dāng)?shù)龋_保試劑合格，可以正常使用。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計數(shù)資料以(n，%)表示，以P＜0.05表示差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

210例患者，共計檢驗300次，分析失誤66例(22%)，見表1。

3 討論

3.1 標(biāo)本采集

正確采集血液標(biāo)本是獲得準(zhǔn)確、可靠檢驗結(jié)果的關(guān)鍵。患者不配合或行為不當(dāng)、護(hù)理人員采集標(biāo)本的操作不規(guī)范等，是導(dǎo)致采集的標(biāo)本不合格的主要影響因素。而一份不合格的標(biāo)本是導(dǎo)致檢驗失誤，結(jié)果不準(zhǔn)確的直接原因。在臨床免疫學(xué)檢驗中，不合格標(biāo)本，比如標(biāo)本溶血，會造成檢驗差錯，結(jié)果誤判，以至于造成嚴(yán)重的臨床錯誤判斷后果。因為標(biāo)本溶血時，血紅蛋白被釋放(其含有的血紅素基團(tuán)，有類似過氧化物的活性)，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中，高濃度的血紅蛋白很容易在溫育過程中吸附于固相，從而與HRP底物反應(yīng)顯色，影響結(jié)果的正確判斷[4]。因此，護(hù)士在采集標(biāo)本前，應(yīng)認(rèn)真了解患者信息，根據(jù)年齡不同，選擇不同的采血針，采集標(biāo)本時，正確使用壓脈帶，盡量縮短壓脈帶的壓迫時間，一般小于1min,在見到血液進(jìn)入采血容器時，立即解開壓脈帶，以防造成血液標(biāo)本的溶血現(xiàn)象。護(hù)士應(yīng)該按照采集手冊要求，嚴(yán)格認(rèn)真的執(zhí)行，并經(jīng)常進(jìn)行學(xué)習(xí)和培訓(xùn)，不斷提高操作技能，以便更好的完成醫(yī)務(wù)工作。

表1 結(jié)果

3.2 標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)與接收

標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)與接收在檢驗分析的過程中，如果處理不當(dāng)，也會影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。如標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)時，由非專業(yè)人員轉(zhuǎn)運(yùn)，因為程序不熟悉造成標(biāo)本混肴，標(biāo)本顛倒晃動以至于標(biāo)本溶血等現(xiàn)象，進(jìn)而對檢測結(jié)果造成不良影響。因此，標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)應(yīng)由經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)務(wù)人員負(fù)責(zé)，轉(zhuǎn)運(yùn)時使用專用的有蓋的無菌轉(zhuǎn)運(yùn)箱，轉(zhuǎn)運(yùn)過程中保持平穩(wěn)，切勿震蕩，以免造成標(biāo)本溶血或損壞。而標(biāo)本到達(dá)實驗室，實驗室人員應(yīng)做好接收工作。否則，不合格標(biāo)本被接收，如標(biāo)本管上信息與申請單上信息不符、信息不清晰、標(biāo)本量不合格、標(biāo)本溶血等，則會給檢測分析造成很多麻煩，所以實驗室人員在接收標(biāo)本時，首先，應(yīng)認(rèn)真核對涉及標(biāo)本的各種信息，真空管上患者信息與申請單上是否一致，真空管選擇是否符合申請檢測的項目要求，所有接收的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)記錄在登記本、工作表、計算機(jī)或其他類似系統(tǒng)中，并記錄標(biāo)本接收日期與時間、接收人員、送檢人員。對于不合格的標(biāo)本，實驗室人員應(yīng)根據(jù)不同檢測項目要求制定標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)文件，嚴(yán)格按照文件標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。因情況特殊接收的不合格標(biāo)本，其檢驗報告上應(yīng)注明標(biāo)本存在的問題，供臨床醫(yī)生參考，在解釋結(jié)果時特別說明。

3.3 標(biāo)本檢測前準(zhǔn)備

標(biāo)本檢測前準(zhǔn)備主要分為三個部分：標(biāo)本處理、試劑準(zhǔn)備、儀器調(diào)試，這三個部分任何環(huán)節(jié)處理不當(dāng)，都會對檢測結(jié)果造成影響。對于臨床免疫學(xué)檢驗分析，標(biāo)本的處理至關(guān)重要。標(biāo)本處理時，如果血液還未開始凝固即分離血清，則會因為血液沒有完全凝固，分離出的血清中仍會殘留部分纖維蛋白原，在加入微孔后，在免疫測定過程中形成肉眼可見的纖維蛋白塊，這樣易造成假陽性結(jié)果，因此實驗室人員在血清分離前，水浴充分再分離。實驗室人員在進(jìn)行標(biāo)本檢測前，應(yīng)將試劑從冰箱提前拿出來，與實驗室溫度平衡至少30分鐘[5]。標(biāo)本檢測前，應(yīng)檢查試劑是否完整，試劑是否在有效期內(nèi)，儲存條件是否合格[6]。需要配制的試劑，按要求配好備用，配制時注意比例，使用新鮮蒸餾水。在標(biāo)本檢測時，如果出現(xiàn)儀器運(yùn)行失常、讀數(shù)錯誤、數(shù)據(jù)紊亂、甚至罷工等一系列問題，則會影響檢驗分析的正常進(jìn)行。所以為了檢測儀器正常運(yùn)行，精準(zhǔn)檢測，實驗室人員要按時對儀器進(jìn)行合理維護(hù)和保養(yǎng)，使儀器光路潔凈、管道通暢、波長穩(wěn)定，從根本上保證儀器運(yùn)行的穩(wěn)定性和可靠性，為檢驗分析的順利進(jìn)行、結(jié)果的準(zhǔn)確可靠奠定基礎(chǔ)[7]。

3.4 標(biāo)本檢測中

標(biāo)本檢測作為檢驗分析過程的中心環(huán)節(jié)，對于臨床免疫學(xué)檢驗，是一場重頭戲，對實驗室人員的專業(yè)素質(zhì)和實驗操作流程要求很高，任何一點(diǎn)小細(xì)節(jié)都會影響到檢驗結(jié)果的正確判讀[8]。標(biāo)本和試劑吸取的重復(fù)性差或加樣錯誤、加樣量不準(zhǔn)確、試劑未混勻、洗滌不充分溫育時間及環(huán)境條件一致性不佳、試劑校準(zhǔn)品不對或變質(zhì)、顯色底物變質(zhì)、試劑受到污染、試劑因貯存不當(dāng)失效、儀器光路不潔、比色波長不對，管道堵塞等等，都是標(biāo)本檢測時可能出現(xiàn)的問題，它們會嚴(yán)重影響檢驗結(jié)果。這就要求實驗室人員具有較高的專業(yè)素養(yǎng)，能熟練掌握實驗操作規(guī)程，以精準(zhǔn)的操作規(guī)避問題的出現(xiàn)。因此，實驗室應(yīng)建立質(zhì)量管理小組，定期對實驗室人員進(jìn)行培訓(xùn)考核，不斷加強(qiáng)學(xué)習(xí)，提高專業(yè)水平和人員素質(zhì)，時刻以認(rèn)真嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度要求自己，能夠發(fā)現(xiàn)問題、解決問題，保證檢測的準(zhǔn)確性。

3.5 標(biāo)本儲存

標(biāo)本如無法及時檢測，應(yīng)妥善儲存。血清標(biāo)本如以無菌操作分離，則可以2～8℃下保存一周進(jìn)行檢測，但不可保存時間過長，因為標(biāo)本中的IgG可聚合成多聚體，在間接法免疫測定中會導(dǎo)致本底過深，甚至造成假陽性。標(biāo)本的分離如以有菌操作，則建議冷凍保存，因為血液若被細(xì)菌污染，細(xì)菌生長所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用。某些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖甘酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾，從而對結(jié)果產(chǎn)生影響。冷凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融，標(biāo)本反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。

綜上所述，臨床免疫學(xué)檢驗分析的質(zhì)量保證，涉及到臨床與實驗室每一個環(huán)節(jié)，是一個綜合性的行為，需要整體的努力。實驗室應(yīng)始終以檢測分析的準(zhǔn)確性為宗旨，與臨床多溝通，嚴(yán)格要求自己，不斷學(xué)習(xí)，不斷提高專業(yè)素養(yǎng)，為提供高質(zhì)量的檢驗分析結(jié)果而努力。