血清一氧化氮、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平與喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

李志勇，馬鵬，彭濤，馮俊，楊荃荃

南充市中心醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，四川 南充637000

喉癌是最常見(jiàn)的頭頸部惡性腫瘤之一，占全身惡性腫瘤的1.2%～1.6%，其發(fā)生與吸煙、飲酒、病毒感染及空氣污染等因素有關(guān)[1]。研究顯示，在喉癌患者死亡病例中，因頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移導(dǎo)致的患者死亡數(shù)占絕大部分[2]。早期發(fā)現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶并進(jìn)行有效治療，對(duì)延長(zhǎng)喉癌患者的生存時(shí)間，提高其生存質(zhì)量具有積極意義。腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移依賴(lài)于血管生成，在相關(guān)指標(biāo)中，一氧化氮（nitric oxide，NO）參與了細(xì)胞凋亡、血管生成、細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的過(guò)程，在腫瘤的進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用[3]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）具有較強(qiáng)的促進(jìn)血管生成的作用，可刺激腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移[4]。目前鮮有研究報(bào)道NO、VEGF在喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的預(yù)測(cè)價(jià)值。本研究通過(guò)比較喉癌患者、喉部良性病變患者和健康者的血清NO、VEGF水平，并分析兩者與喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，旨在提高喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的早期檢出率，改善患者預(yù)后，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2017年10月至2018年12月于南充市中心醫(yī)院就診的39例喉癌患者和34例喉部良性病變患者，分別作為喉癌組和喉部良性病變組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)臨床診斷確診為喉癌或喉部良性病變[5]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重感染性疾病；②合并其他惡性腫瘤；③合并心、肝、腎功能障礙；④合并血液系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病；⑤入組前接受過(guò)放化療或手術(shù)治療；⑥患有精神疾病或?qū)Ρ狙芯恳缽男圆睢Ａ磉x取36例同期健康體檢者為健康對(duì)照組。3組研究對(duì)象的性別、年齡、體重指數(shù)（body mass index，BMI）比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)，所有研究對(duì)象均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。

表1 3組研究對(duì)象的基線特征

1.2 檢測(cè)方法

抽取3組研究對(duì)象的清晨空腹靜脈血5 ml，離心后分離血清，置于-70℃冰箱中保存?zhèn)溆茫捎孟跛徇€原酶法檢測(cè)血清NO水平，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清VEGF水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，多組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。采用Spearman相關(guān)分析法進(jìn)行相關(guān)性分析。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線和曲線下面積（area under the curve，AUC）評(píng)價(jià)VEGF、NO單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值，0.5＜AUC＜0.7表示診斷價(jià)值低，0.7≤AUC＜0.9表示診斷價(jià)值中等，AUC≥0.9表示診斷價(jià)值較高。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組研究對(duì)象血清NO、VEGF水平的比較

喉癌組、喉部良性病變組、健康對(duì)照組的血清NO、VEGF水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。喉癌組患者的血清NO、VEGF水平均高于喉部良性病變組和健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；喉部良性病變組患者的血清NO、VEGF水平均高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

表2 3組研究對(duì)象血清NO、VEGF水平的比較（±s）

表2 3組研究對(duì)象血清NO、VEGF水平的比較（±s）

注：a與健康對(duì)照組比較，P＜0.05；b與喉部良性病變組比較，P＜0.05

組別喉癌組（n=39）喉部良性病變組（n=34）健康對(duì)照組（n=36）F值P值88.47±15.23a b 79.64±12.17a 53.21±11.37 72.135 0.000 2.13±0.51a b 1.35±0.41a 0.78±0.22 106.850 0.000 NO（μmol/L）VEGF（μg/L）

2.2 不同頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況喉癌患者血清NO、VEGF水平的比較

39例喉癌患者中，14例發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，25例未發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的血清NO、VEGF水平均高于頸部淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表3）

表3 不同頸部淋巴-結(jié)轉(zhuǎn)移情況喉癌患者血清NO、VEGF水平的比較（±s）

表3 不同頸部淋巴-結(jié)轉(zhuǎn)移情況喉癌患者血清NO、VEGF水平的比較（±s）

頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況轉(zhuǎn)移（n=14）未轉(zhuǎn)移（n=25）t值P值NO（μmol/L）97.45±12.48 82.58±16.41 2.941 0.006 VEGF（μg/L）2.33±0.62 1.93±0.44 2.347 0.024

2.3 血清NO、VEGF水平與喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

血清NO、VEGF水平均與喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（r=0.399、0.385，P＜0.05）。

2.4 血清NO、VEGF單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值

血清NO、VEGF單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的AUC分別為0.740（95%CI：0.566～0.860）、0.731（95%CI：0.575～0.867）和 0.814（95%CI：0.657～0.920）。（圖1）

圖1 NO、VEGF單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的ROC曲線

3 討論

隨著空氣污染的日益加重以及人們生活習(xí)慣的改變，近年來(lái)喉癌的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢(shì)[6]。喉癌患者早期無(wú)明顯癥狀，60%～70%的患者就診時(shí)已進(jìn)展至中晚期，且部分患者已發(fā)生局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[7]。有研究指出，喉癌患者的預(yù)后與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)，發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的喉癌患者的5年生存率下降超過(guò)50%[8]。因此，盡早預(yù)測(cè)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移并實(shí)施規(guī)范治療，對(duì)提高患者的生存率具有重要意義。目前，臨床上尚無(wú)評(píng)估頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的精確方法，主要以影像學(xué)檢查為主，如磁共振成像（MRI）和增強(qiáng)計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT），但其準(zhǔn)確度和靈敏度仍無(wú)法滿(mǎn)足喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床預(yù)測(cè)需求[9]。

近年來(lái)，血清標(biāo)志物在惡性腫瘤中的預(yù)測(cè)價(jià)值逐漸引起臨床工作者的重視。有學(xué)者認(rèn)為，血管生成在腫瘤轉(zhuǎn)移中具有促進(jìn)作用，當(dāng)血管生成因子表達(dá)紊亂時(shí)，可使腫瘤由無(wú)血管狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橛醒軤顟B(tài)，腫瘤的增殖能力將大幅度提高，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移[10]。NO、VEGF均為反映血管內(nèi)皮功能的活性物質(zhì)，其中NO是機(jī)體內(nèi)重要的活性和信號(hào)分子，由一氧化氮合酶催化左旋精氨酸生成，可調(diào)節(jié)VEGF水平，參與腫瘤的生長(zhǎng)過(guò)程，包括遷移和血管生成等[11]。VEGF是一種具有高度特異性的促血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，具有增加血管通透性及促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、細(xì)胞外基質(zhì)變性和血管生成等作用，在腫瘤血管生成及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮關(guān)鍵作用[12]。

梁宇等[13]研究認(rèn)為，血清VEGF水平可評(píng)估動(dòng)脈化療栓塞對(duì)肝癌患者的治療效果，其可作為預(yù)測(cè)患者預(yù)后的血清標(biāo)志物之一。另有文獻(xiàn)報(bào)道，來(lái)源于小鼠乳腺癌細(xì)胞的NO可促進(jìn)腫瘤血管生成及遷移[14]。本研究結(jié)果顯示，喉癌患者的血清NO、VEGF水平均高于喉部良性病變患者和健康者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的喉癌患者血清NO、VEGF水平均高于頸部淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移的喉癌患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血清NO、VEGF水平均與喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P＜0.05）。提示NO、VEGF可能對(duì)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有較好的預(yù)測(cè)價(jià)值。

Cheng等[15]研究指出，NO是導(dǎo)致多種惡性腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。黃靜等[16]研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺乳頭狀癌患者的VEGF水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者。以上研究均進(jìn)一步證實(shí)NO、VEGF在惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移中發(fā)揮了促進(jìn)作用。為探究NO、VEGF對(duì)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值，本研究比較了兩者單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的AUC，發(fā)現(xiàn)兩者聯(lián)合檢測(cè)的AUC最大，說(shuō)明NO、VEGF聯(lián)合檢測(cè)對(duì)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有較好的預(yù)測(cè)價(jià)值。這是因?yàn)镹O、VEGF均在腫瘤血管生成和轉(zhuǎn)移中具有重要意義，兩者聯(lián)合檢測(cè)可進(jìn)一步提高診斷價(jià)值，進(jìn)而更好地預(yù)測(cè)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

綜上所述，喉癌患者的血清NO、VEGF水平較高，且其在頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的水平高于無(wú)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，兩項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)喉癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有較好的預(yù)測(cè)價(jià)值。