血清可溶性CD163水平與急性化膿性膽囊炎病情嚴重程度的關系研究

楚振飛，琚然，劉平，施有海，高航

急性膽囊炎是由膽囊管阻塞和細菌侵染造成的膽囊炎性反應[1]，若未得到及時有效治療，炎性反應惡化，感染膽囊壁全層，白細胞呈彌漫性侵染，進而形成急性化膿性膽囊炎，嚴重時可危及患者生命。據報道，急性化膿性膽囊炎多發生于老年人[2]，由于老年患者常伴有動脈硬化等合并癥，在炎性反應期間極易發生膽囊缺血、壞死、穿孔。血清可溶性血紅蛋白清道夫受體(sCD163)是一種重要的血清標志物，機體受到感染時，可引起炎性因子釋放入血[3]。近年來，sCD163引起了國內外學者廣泛關注。李志強等[4]研究發現，sCD163水平與心力衰竭嚴重程度有關，是心力衰竭發病的獨立危險因素，可用來作為診斷和監測相關炎性疾病的指標。Suzuki等[5]研究結果顯示，社區獲得性肺炎患者血清sCD163水平升高，與疾病嚴重程度和臨床結局有關，提示sCD163可作為新的預后標志物。筆者對sCD163與急性化膿性膽囊炎嚴重程度的關系進行研究，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年6月—2019年9月滁州市第一人民醫院急診外科診治急性化膿性膽囊炎患者150例作為研究組， 其中男83例，女67例，年齡52～69(61.10±6.82)歲；依據病情嚴重程度[6]分為輕度亞組47例，中度亞組55例，重度亞組48例。同期選取與患者性別、年齡相匹配的無急性膽囊炎健康體檢者100例為健康對照組，其中男54例，女46例，年齡50～68(59.58±6.74)。2組研究對象性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批，患者/家屬知情同意并簽署同意書。

1.2 選擇標準 (1)納入標準：①符合化膿性膽囊炎診斷標準[6]，經腹部B型超聲確診，膽囊直徑≥10 cm，膽囊壁厚度≥0.5 cm；②右上腹部可觸及腫塊且陣痛明顯；③癥狀持續時間>72 h。(2)排除標準：①全身性免疫性疾病或近期有免疫類/激素類藥物服用史；②心、肝、腎等重要器官發生器質性病變；③精神方面疾病。

1.3 觀測指標與方法

1.3.1 血清sCD163測定：所有患者于入院12 h內、健康體檢者空腹12 h于次日清晨取靜脈血5 ml，4℃下離心，上層清液轉移至干凈EP管中，-20℃保存待測。利用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清sCD163。試劑盒購自上海振譽生物科技有限公司，操作步驟嚴格按照說明書方法執行。

1.3.2 外周血細胞、血清總膽紅素和炎性因子測定：利用7180全自動生化分析儀(日本日立公司)檢測血清白細胞、中性粒細胞、血紅蛋白、血清總膽紅素水平，試劑盒均購自北京索萊寶科技有限公司。用ELISA法檢測血清C-反應蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、IL-1β、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和高遷移率族蛋白B1(HMGB1)水平，試劑盒均購自上海聯邁生物工程有限公司，所有操作均按照說明書步驟嚴格執行。

2 結 果

2.1 2組臨床資料比較 2組受試者性別、年齡、吸煙史、酗酒史、膽結石病史、BMI、收縮壓、舒張壓比較差異無統計學意義(P>0.05)，研究組白細胞、中性粒細胞、血紅蛋白、血清總膽紅素水平均高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

2.2 2組血清sCD163及炎性指標水平比較 研究組血清sCD163、CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α、HMGB1水平均顯著高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表2。

2.3 各亞組患者血清sCD163及炎性指標水平比較 研究組患者血清sCD163水平、CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α、HMGB1水平隨著病情加重均呈上升趨勢，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表3。

2.4 血清sCD163水平與炎性指標相關性分析 血清sCD163水平與CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α、HMGB1均呈正相關(P<0.01)，見表4。

表1 2組臨床資料比較

表2 2組血清sCD163水平及炎性指標的比較

表4 血清sCD163水平與炎性指標間的相關性分析

2.5 急性化膿性膽囊炎發病危險因素的Logistic回歸分析 以急性化膿性膽囊炎是否發生為因變量，以sCD163、CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α和HMGB1作為自變量進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示sCD163、CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α和HMGB1均為影響急性化膿性膽囊炎發生的危險因素，見表5。

3 討 論

急性化膿性膽囊炎是一種臨床急腹癥，主要特點為發病急驟、病因復雜、診治困難。由于患者臨床表現不具特異性，往往影響早期診斷及對病情嚴重程度的判斷，不利于針對性治療方案的確定，耽誤患者病情[7]。因此，需找到一種可以明確指示急性化膿性膽囊炎嚴重程度的指標，為臨床診斷提供依據。

表5 急性化膿性膽囊炎危險因素Logistic回歸分析

清道夫受體(SRs)是一種多結構域膜相關蛋白，最初發現其可以識別和內化性改造脂蛋白，如氧化低密度脂蛋白[8]。隨后發現SRs在機體生理、病理活動中起關鍵作用，包括清除病原體，運輸脂質，保持體內平衡，具有免疫作用等[9]。根據SRs序列和結構特點，可將SRs分為10類[10]，其中Ⅰ類SRs包括CD163、類CD163同系物、WC1和SCART1。CD163是活化的巨噬細胞和單核細胞表面特異性表達的清道夫受體，參與結合血紅蛋白—珠蛋白復合物的形成過程，介導血紅蛋白的清除作用，可分為膜性CD163(mCD163)和可溶性CD163(sCD163)[11]。

sCD163是抗炎性巨噬細胞的特異性標志物[12]，炎性因子刺激巨噬細胞活化，促使單核巨噬細胞由M0/M1向CD163+M2轉化，激活特異性金屬蛋白酶，使mCD163從單核巨噬細胞表面脫落，sCD163大量生成，產生促炎作用。蘇柳杭等[13]利用免疫組化法探究動脈粥樣硬化斑塊CD163與腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導因子(TWEAK)的表達，細胞實驗結果顯示，CD163顯著抑制TWEAK蛋白的表達，降低核因子κB(NF-κB)水平，提示CD163可通過抑制TWEAK/NF-κB途徑來阻止動脈粥樣硬化形成。Sapa等[14]研究sCD163、降鈣素原和新喋呤在ICU膿毒癥患者中的應用比較，結果發現sCD163和新喋呤對膿毒癥有較好的診斷價值。在各種皮膚癌病變中，CD163+巨噬細胞是腫瘤浸潤性淋巴細胞的主要組成部分，可通過刺激癌特異性基質因子如POSTN、IL-4、RANKL等產生多種趨化因子[15]。研究表明，血清sCD163水平在肺炎、類風濕關節炎、肝硬化等疾病中升高，反映疾病炎性因子活性[16-18]。本研究結果發現，與健康對照組相比，急性化膿性膽囊炎患者血清sCD163水平明顯升高，且隨著患者嚴重程度加重，sCD163水平呈上升趨勢，提示血清sCD163與急性化膿性膽囊炎發病、發展有關。

表3 各亞組患者血清sCD163及炎性指標水平比較

注：與輕度亞組比較，aP<0.05；與中度亞組比較，bP<0.05

本研究還探究了其他炎性指標在急性化膿性膽囊炎中的水平。CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α作為機體內重要的炎性因子，可以較為敏感地反映患者體內的炎性反應狀態[19]。這些炎性因子在正常人體內處于低水平，一旦發生急性感染，表達水平明顯上升。HMGB1由巨噬細胞產生，自身可介導刺激人單核細胞產生促炎細胞因子，已逐漸在感染性和無菌性炎性反應信號傳導和協調中發揮核心作用[20]。Aucott等[21]研究發現，在建立中樞神經系統炎性反應模型的小鼠體內出現明顯血腦屏障破壞，免疫組織化學顯示HMGB1表達上調，表明細胞HMGB1可引起血腦屏障破壞，并激活其他神經炎性成分，阻斷HMGB1表達可能改善腦卒中和創傷性腦損傷的臨床結局。本研究結果顯示，急性化膿性膽囊炎患者血清CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α、HMGB1水平與健康對照組相比均呈高表達狀態，且隨患者病情進展而升高，提示急性化膿性膽囊炎患者體內存在炎性反應，各炎性因子的水平變化可體現炎性反應程度，進而對患者病情程度具有一定的預測作用，可能機制為分布于人體各臟器細胞的HMGB1在受到細菌感染刺激時，其B-box結構域特異性結合炎性因子，炎性反應被激活，進而發揮促炎作用[22]。

本研究通過Pearson相關性分析發現，血清sCD163與CRP、IL-6、IL-1β、TNF-α、HMGB1均呈正相關；多因素Logistic回歸分析顯示，血清sCD163與急性化膿性膽囊炎的發生獨立相關，提示血清sCD163是影響急性化膿性膽囊炎發生的獨立危險因素，監測其水平對急性化膿性膽囊炎的發生具有一定預測價值。

綜上所述，急性化膿性膽囊炎患者血清sCD163水平呈高表達，且隨著病情加重而呈上升趨勢，提示血清sCD163水平可作為指示急性化膿性膽囊炎病情嚴重程度的指標，具有一定的臨床價值。