2015～2019年廣西北海地區淋球菌耐藥結果分析

陳 鎮，鐘永軍，朱邦勇，廖家順，韋海鵬，蘇騰良，林小芳

（1.北海市人民醫院，廣西 北海 536000；2．廣西壯族自治區皮膚病防治研究所，廣西 南寧 530007）

淋病是性傳播疾病之一，近年來，由于臨床上抗生素的濫用和不規則治療，淋球菌對抗生素的耐藥率逐年上升，日趨嚴重。為了了解本地區淋球菌耐藥情況以及淋病治療方案的有效性，本研究對（2015～2019）年廣西北海地區STD門診患者分離的91株淋球菌進行耐藥檢測分析，為合理選擇抗生素提供依據，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本采集 研究對象為2015年1月至2019年12月北海地區性病門診患者，有尿頻、尿急、尿痛或宮頸炎癥等臨床癥狀，泌尿生殖道分泌物培養陽性患者共91例，男83例，女8例，年齡（15～70）歲，平均年齡34.4歲。經鑒定（革蘭染色、氧化酶和糖發酵陽性）為奈瑟氏，傳代1次，送廣西壯族自治區皮膚病防治研究所進行耐藥檢測。

1.2 抗菌藥物與培養基 大觀霉素（美國Upjohn公司）、阿奇霉素（中國Sinopharm公司）、頭孢曲松（瑞士Roche公司）、頭孢克肟（中國Sinopharm公司）、環丙沙星（德國Bayer Lever kussen公司）、青霉素（美國Simith Kline Beecham公司）和四環素（美國Sigma公司）。各種藥物的濃度范圍：大觀霉素（4～64）mg/L，阿奇霉素（0.03～4）mg/L，頭孢曲松（0.008～0.5）mg/L，頭孢克肟（0.008～0.5）mg/L，環丙沙星（0.015～8）mg/L，青霉素（0.015～4）mg/L，四環素僅測1個濃度為8mg/L，以檢測質粒介導的高度耐四環素淋球菌（TRNG）。培養基為GC基礎培養基（Oxoid公司）加入10%脫纖維新鮮羊血。

1.3 方法 β內酰胺酶陽性菌株（PPNG）采用紙片酸度定量法測定，讓濾紙吸足青霉素溶液（pH值為8.0的0.05mol/L磷酸緩沖液100ml，加0.2g溴甲酚紫和5.0g結晶青霉素）后放于空平皿中，用接種環取（10～20）個淋球菌菌落在濾紙上涂成一小點（直徑約為5mm），蓋好平皿后，再37℃孵育30min，涂點變黃者為陽性，未變者為陰性。瓊脂稀釋法測定各種抗菌藥物對淋球菌的最小抑菌濃度（MIC）[1]，即先精確稱取純品抗菌藥物，溶于合適的溶劑中，用無菌蒸餾水稀釋后加到培養基中，配成含系列濃度抗生素的瓊脂平皿，將分純后的淋病奈瑟菌配成107cfu/ml的菌懸液，用多頭接種器接種到含不同濃度藥物的瓊脂平皿上，置36℃，5% CO2培養箱中培養，36h后觀察結果，以淋病奈瑟菌不生長的最低藥物濃度為MIC。每批實驗均以WHO參考菌株（由中國醫學科學院皮膚病研究所提供）作為質控菌株。

1.4 結果判定標準 以WHO西太區淋球菌耐藥監測項目推薦的標準判斷[2]，大觀霉素MIC≤64mg/L為敏感，≥128mg/L為耐藥；阿奇霉素MIC≤0.5mg/L為敏感，≥1mg/L為耐藥；頭孢曲松MIC＜0.125mg/L為敏感，≥0.125mg/L為低敏；頭孢克肟MIC＜0.25mg/L為敏感，≥0.25mg/L為低敏；環丙沙星MIC≤0.03mg/L為敏感，（0.06～0.5）mg/L為中敏，≥1mg/L為耐藥；青霉素MIC≤0.03mg/L為敏感，（0.06～0.5）mg/L為中敏，≥1mg/L為耐藥；四環素≥16mg/L為TRNG陽性菌株。

2 結果

2.1 淋球菌耐藥情況 詳見表1。從性病門診淋病患者中共收集91株菌株，未發現頭孢曲松、頭孢克肟和大觀霉素的耐藥菌株，阿奇霉素的耐藥性也比較低（4/91），對環丙沙星和青霉素耐藥率分別達到98.90%（90/91）和86.81%（79/91）。

2.2 質粒介導的淋球菌耐藥情況 詳見表1。PPNG菌株和TRNG菌株陽性菌株數目分別為51株（56.04%）和43株（47.25%）。其中PPNG陽性菌株在5年的監測中，2017年陽性菌株出現一個上升峰值（73.91%），其余年份陽性菌株總體上保持下降趨勢。TRNG陽性菌株五年基本保持一個下降的趨勢，由2015年的（71.43%）到2018年的（34.48%）再到2019年的（36.84%）。

表1 北海地區2015～2019年淋球菌抗生素的對七種抗生素的敏感性株(%)

3 討論

淋病是由淋病奈瑟菌感染引起的，淋病若得不到及時有效的治療，女性患者可能引起宮頸炎、附件炎、盆腔炎等，男性患者可能引起尿道炎、附睪炎、前列腺炎等，進而引起不孕不育。治療淋病的藥物主要是抗生素。

近年來淋病的發病率居高不下，抗生素的錯用濫用，尤其是不規范用藥易誘導淋球菌對抗生素產生耐藥性。淋球菌的耐藥性因時間和地區的變化而有所不同。因此世界各地有必要及時監測淋球菌對抗生素的敏感性。

在本地區開展淋球菌耐藥監測尚屬首次。（2015～2019）年廣西北海共檢出91株淋球菌，PPNG的檢出率是56.04%，低于廣西全區總檢出率66.82%[3]，遠高于南寧地區的29.17%[4]和廣州地區的21.43%[5]。本地區檢出率由2015年的57.14%到2019年的47.37%，說明本地區PPNG的流行在逐年下降，規范治療及合理應用抗生素有明顯效果。

質粒介導的四環素高度耐藥（TRNG）檢出率47.25%，低于全區檢出率56.29%[3]和南寧地區的59.38%，高于廣州地區的24.49%。本地區檢出率由2015年的71.43%下降到2019年的36.84%，說明本地區TRNG逐年下降。雖然PPNG和TRNG陽性率總體在下降，說明濫用抗生素和不規則治療有改善，但總陽性率也有47.25%，規范使用抗生素及規則治療淋病在臨床工作中仍至關重要。在本次監測中青霉素和環丙沙星的耐藥率分別為86.81%和98.90%，耐藥率極高，故青霉素和環丙沙星不能用于本地區治療淋病首選藥。

頭孢曲松是治療淋病的一線藥，本次監測91株菌株，頭孢曲松的低敏率為2.20%，低于全區的監測平均水平（3.66%）[3]，同時低于全國平均水平（4.40%）[6]。但近年來，有不少國家報道耐頭孢曲松淋球菌株的出現，本地區雖然沒有發現耐藥病例，但臨床上還是要密切監測。同為先鋒藥物，本次監測的頭孢克肟中低敏菌株為2.20%，與頭孢曲松可用于臨床首選藥物治療淋病，但要規范使用并監測敏感性，及時發現耐藥菌株與敏感性是否下降的情況，防止耐頭孢類藥物的菌株的爆發流行。

本次監測的阿奇霉素耐藥率為4.40%，可與頭孢曲松或者頭孢克肟聯合用藥，作為臨床一線抗生素治療淋病。本次監測的大觀霉素未發現耐藥菌株，敏感率達100%。由于國內大部分地區未廣泛使用該藥，當各地普遍使用該藥時，是否會引起耐藥菌株大范圍流行？相關人員應密切關注大觀霉素的敏感性，及時發現耐藥菌株。