非小細胞肺癌VEGFR-2與XAGE-1b基因表達關系研究

劉輝 志蘭

【摘要】目的 非小細胞肺癌VEGFR-2與XAGE-1b基因表達關系進行研究。方法 抽取我院于2017年5月～2019年5月間收治的患有非小細胞肺癌的20例患者作為研究的對象，提取所選患者的總RNA，利用RT-PCR技術將XAGE-1b基因擴增，同時檢測VEGFR-2的表達。研究其表達是否具有相關性。結果 XAGE-1b陽性的患者其體內VEGFR-2的表達量也越高，通過多元回歸分析顯示，病理類型和VEGFR-2的表達量影響XAGE-1b基因。結論 對于非小細胞肺癌的患者來說，VEGFR-2和XAGE-1b基因的表達量成正相關，抗血管生成療法和免疫療法相結合的治療措施適宜的患者可能為VEGFR-2的表達量高且體內含有XAGE-1b基因。

【關鍵詞】非小細胞肺癌;VEGFR-2;XAGE-1b基因

【中圖分類號】R734.2 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095.6681.2020.15..01

近幾年，在結直腸癌以及肺癌等腫瘤疾病中抗血管生成療法取得顯著的療效。形成新生血管時VEGFR-2發揮著重要的作用，同時亦是許多抗血管生成藥物[1]。用CTA承載樹突狀細胞以此來組成腫瘤疫苗為一種比較常見的抗腫瘤免疫治療措施，此次研究采用的便是CTA中的一員— XAGE-1b蛋白，其負載樹突狀細胞在體外組建肺癌疫苗[2]。為了評價非小細胞肺癌VEGFR-2與XAGE-1b基因表達關系，我院對其開展了深入的探究，現詳細報道如下：

1 材料與方法

1.1 標本

使用已經檢測XAGE-1b基因表達水平的20例非小細胞癌患者的mRNA/cDNA標本，進行mRNA的提取、鑒定質量以及將mRNA通過逆轉錄使其生成cDNA。

1.2 探針與引物

以GenBank （Accession No.：NM_ 002253.1）之中VEGFR-2的序列為參考設計探針與引物，其內參為β-actin。

為了構建實時的PCR標準曲線，利用特異性引物通過逆轉錄PCR將β-actin與VEGFR-2擴增，鑒定測序，利用A260將標準品DNA進行定量，使用超純水來使其連續稀釋以致范圍在每微升107～101拷貝，取出1 uL將其當作樣本檢測的一個定量標準。

1.3 實時PCR定量

20 uL的反應體系之中檢測β-actin與VEGFR-2的含量，首先進行PCR反應。實施PCR反應的條件主要包括：2分鐘50℃，10分鐘95℃，隨后進行15秒95℃以及1分鐘60℃ ，進行40個循環。所有的樣本均需進行重復兩次測定，定量檢測的結果為其均值。

若患者XAGE-1b為陽性其VEGFR-2的表達量也偏高。在α為0.05時，把VEGFR-2的表達量與患者的臨床特征一起代入多元logistic的回歸分析之中，結果表明，VEGFR-2的表達量 （其比值比為14.812 ， 95%可信區間為1.281～172.150，P為0.032）與病理類型（其比值比為0.071， 95%可信區間0.006～0.779，P為0.032）為影響XAGE-1b表達的因素。

2 討 論

為了研究在非小細胞癌治療之中免疫治療聯合抗血管生成療法的可行性，本次研究中檢測同時分析了在免疫治療中其靶點XAGE-1b和抗血管生成治療中其靶點VEGFR-2表達的關聯性，結果表面，XAGE-1b和VEGFR-2的表達量呈現正相關，即XAGE-1b表達陽性的患者其VEGFR-2的表達量偏高，同時多元logistic回歸分析表明，VEGFR-2的表達量影響XAGE-1b的表達。研究結果表明，抗血管生成療法和免疫療法相結合的治療措施適宜的患者可能為VEGFR-2的表達量高且體內含有XAGE-1b基因。

參考文獻

[1] 樊慧杰，袁 靜，吳晶晶，et al.VEGFR2多態性對貝伐珠單抗聯合化療一線治療晚期非小細胞肺癌患者效果及安全性的影響[J].中華醫學雜志，2019，99（2）：99-104.

[2] 盧鑒財，黃 俊，徐韞健，et al.Super-ARMS法在檢測非小細胞肺癌EGFR基因突變中的應用分析[J].熱帶醫學雜志，2019（004）：430-433，458.

基金項目：2019年度河南省重點研發與推廣專項（科技攻關）項目，項目編號：192102310316;

項目名稱：XAGE-1b新型疫苗在非小細胞肺癌免疫治療中的作用及機制研究