高熒光淋巴細(xì)胞百分比對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷價(jià)值

劉 娟， 冀旭峰， 劉玲玲， 楊 春， 王伯玉

（吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130021）

傳染性單核細(xì)胞增多癥是兒童常見(jiàn)病毒感染性疾病，常見(jiàn)于EB病毒、巨細(xì)胞病毒感染，傳統(tǒng)診斷主要依據(jù)典型臨床表現(xiàn)（不規(guī)則發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、皮疹、水腫）[1]和相關(guān)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果[異型淋巴細(xì)胞百分比≥10%，EB病毒或巨細(xì)胞病毒抗原抗體檢測(cè)為陽(yáng)性]。異型淋巴細(xì)胞百分比增高診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥特異性高[2]，但需要采集患兒靜脈血進(jìn)行涂片染色和鏡下白細(xì)胞分類(lèi)，耗時(shí)長(zhǎng)（4 h），且需要閱片經(jīng)驗(yàn)豐富的操作人員，臨床應(yīng)用受限。EB病毒和巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測(cè)診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥特異性也較高，但成本高、耗時(shí)長(zhǎng)，不適合在基層醫(yī)院和普通二級(jí)甲等醫(yī)院開(kāi)展。高熒光淋巴細(xì)胞百分比（high fluorescence intensity lymphocyte percentage，HFLY%）可采用全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行檢測(cè)[3]，是可快速篩查傳染性單核細(xì)胞增多癥的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。本研究旨在分析HELY%對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷價(jià)值，同時(shí)探討其與異型淋巴細(xì)胞百分比、EB病毒和巨細(xì)胞病毒負(fù)荷水平的相關(guān)性，為傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷提供有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2019年6—8月吉林大學(xué)白求恩第一醫(yī)院兒科住院部傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒50例（疾病組），其中男30例、女20例，年齡1～13歲。傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）發(fā)熱、咽炎、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大、皮疹中至少3項(xiàng)陽(yáng)性；（2）淋巴細(xì)胞比例增高、異型淋巴細(xì)胞百分比≥10%、EB病毒抗體定量檢測(cè)陽(yáng)性、EB病毒或巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測(cè)陽(yáng)性中至少1項(xiàng)符合。以同期吉林大學(xué)第一醫(yī)院小兒發(fā)育咨詢(xún)門(mén)診50名兒童為對(duì)照組，其中男25名、女25名，年齡1～13歲，所有對(duì)照兒童無(wú)發(fā)燒、高熱等臨床癥狀，體檢無(wú)異常。

1.2 方法

采集住院患兒首次住院、門(mén)診患兒首次就診時(shí)肘靜脈血2管（3 mL），乙二胺四乙酸抗凝，1管用于HFLY%測(cè)定和異型淋巴細(xì)胞百分比檢測(cè)，另1管用于EB病毒和巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測(cè)。

1.3 主要儀器與試劑

XN-9000全自動(dòng)血液分析儀（日本Sysmex公司）及配套試劑、Multiskan MK3酶標(biāo)儀（美國(guó)ThermoFisher Scientific公司）、LightCycler480Ⅱ?qū)崟r(shí)熒光定量PCR儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑、ALLegraX-12高速離心機(jī)（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線(xiàn)評(píng)價(jià)HFLY%診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥的效能。采用Pearson相關(guān)分析評(píng)價(jià)HELY%與異型淋巴細(xì)胞百分比的相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 疾病組與對(duì)照組HFLY%測(cè)定結(jié)果比較

疾病組HFLY%為（3.95±2.72）%，顯著高于對(duì)照組[（0.31±0.26）%]（P＜0.05）。

2.2 疾病組與對(duì)照組異型淋巴細(xì)胞百分比測(cè)定結(jié)果

對(duì)照組異型淋巴細(xì)胞百分比均＜4%。疾病組異型淋巴細(xì)胞百分比均＞8%，其中5%～10%有4例，10%～20%有33例，20%～30%有10例，＞30%有3例。

2.3 疾病組與對(duì)照組EB病毒和巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測(cè)結(jié)果

對(duì)照組EB病毒和巨細(xì)胞病毒核酸檢測(cè)均為陰性。疾病組中，EB病毒核酸陽(yáng)性37例，巨細(xì)胞病毒核酸陽(yáng)性3例。

2.4 HFLY%診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥的性能

ROC曲線(xiàn)分析結(jié)果顯示，HFLY%診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥的曲線(xiàn)下面積為0.992，以0.85為臨界值，敏感性為94.7%、特異性為95.89%。見(jiàn)圖1。

圖 1 HFLY%診斷傳染性單核增多癥的ROC曲線(xiàn)

2.5 HFLY%和異型淋巴細(xì)胞百分比的相關(guān)性

Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，HFLY%與異型淋巴細(xì)胞百分比呈正相關(guān)（r=0.581，P＜0.05）。

3 討論

目前，臨床診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥主要通過(guò)臨床癥狀和外周血異型淋巴細(xì)胞百分比、EB病毒和巨細(xì)胞病毒核酸載量確診。異型淋巴細(xì)胞百分比是診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥的常用指標(biāo)，但此項(xiàng)檢查全過(guò)程為人工操作，耗時(shí)長(zhǎng)，1個(gè)病例檢查時(shí)間要3～4 h，不適合用于臨床兒科病毒感染性疾病初篩；而HFLY%可采用全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)，幾分鐘之內(nèi)可獲得結(jié)果，很好地彌補(bǔ)了這一不足。對(duì)HFLY%明顯升高的患兒，進(jìn)一步檢測(cè)其外周血異型淋巴細(xì)胞百分比，再結(jié)合臨床癥狀和EB病毒或巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測(cè)結(jié)果，即可做出診斷。

HFLY%是近年來(lái)新開(kāi)發(fā)的分析參數(shù)，主要反映活化的淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化，通過(guò)監(jiān)測(cè)由病毒感染引起的活化淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化，對(duì)EB病毒、巨細(xì)胞病毒引起的傳染性單核細(xì)胞增多癥進(jìn)行早期篩查。本研究中，疾病組HFLY%水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），提示傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒體內(nèi)可能存在病毒刺激，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞異常活化，高敏感的HFLY%明顯升高；而對(duì)照兒童因不存在外部病毒的刺激，未出現(xiàn)明顯的細(xì)胞免疫病理變化，故HFLY%數(shù)值無(wú)異常改變。

本研究ROC曲線(xiàn)分析結(jié)果顯示，HFLY%對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥有良好的診斷效能，曲線(xiàn)下面積為0.992，以0.85為臨界值，敏感性為94.7%，特異性為95.89%。

本研究發(fā)現(xiàn)，HFLY%與外周血異型淋巴細(xì)胞百分比呈正相關(guān)（r=0.281，P＜0.05），疾病組50例患兒中有45例HFLY%明顯升高，46例異型淋巴細(xì)胞百分比＞10%。有研究結(jié)果顯示，HFLY%升高與異型淋巴細(xì)胞可能密切相關(guān)[4]，二者相結(jié)合可更準(zhǔn)確、高效地診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥。但部分傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒HFLY%并未明顯升高[5]，在這種情況下，則需結(jié)合EB病毒或巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測(cè)和臨床癥狀等來(lái)明確診斷。

綜上所述，HFLY%對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥有較好的初篩價(jià)值。