石墨烯-管尖固相萃取-高效液相色譜-串聯質譜法測定貝類中3種原多甲藻酸貝類毒素

萬譯文，楊 霄*，黃向榮，索紋紋，何 詠，曾春芳

(1.湖南省水產科學研究所，湖南長沙 410153；2.水產高效健康生產湖南省協同創新中心，湖南常德 415000；3.農業部漁業產品質量監督檢驗測試中心(長沙)，湖南長沙 410153)

原多甲藻酸(Azaspiracids，AZAs)貝類毒素于1995年發現自愛爾蘭的紫貽貝(Mytilusedulis)中，它們是一類脂溶性聚醚生物毒素[1]，具有一個獨特的螺旋環和一個脂肪族羧酸基，屬氨代螺旋酸類貝類毒素。目前共發現32種AZAs的同系物，已確定化學結構的有11種，其中最常見且毒性最大的分別為AZA1、AZA2及AZA3 3種[2，3]。AZAs貝類毒素比較穩定，在酸性、堿性和高溫條件都不能使其毒性降低，人食用含有AZAs貝類毒素后會發生胃腸道紊亂，主要的中毒癥狀有惡心、嘔吐、腹瀉、胃痙攣等。2002年，歐盟規定雙殼類水產品中AZA1，AZA2和AZA3的最大允許濃度為160 μg/kg(以貝肉計)[4]。

目前，AZAs貝類毒素的檢測方法主要有生物測試法和高效液相色譜-串聯質譜法。生物測試法只能測定毒素總量，靈敏度和準確度均欠佳，可能產生假陽性結果而導致無法對其準確定性定量[5]。高效液相色譜-串聯質譜(HPLC-MS/MS)具有靈敏度高、特異性強的特點，因此，人們開始重點研究建立分析AZAs貝類毒素的液相色譜-質譜分析方法，并對AZAs貝類毒素的分布地域和范圍進行調查研究[6 - 8]。貝類產品基質較為復雜，目前已報道的AZAs貝類毒素的樣品前處理方法多為C18和功能性聚合物吸附劑填充的固相萃取柱[9，10]或基質分散固相萃取技術[11 - 14]。管尖固相萃取(Pipette Tip Solid-phase Extraction，PT-SPE)是一種新型的小型化固相萃取技術，相較于傳統的固相萃取，其具有萃取裝置制作簡單、成本低，吸附劑選擇范圍寬，萃取吸附劑和溶劑用量少，萃取效率高等優點，近年來在復雜基質樣品前處理中引起了學者們的廣泛關注[15-17]。……