吳 桐,黃 彧,侯萬超,夏建麗,劉春明,李賽男
(長春師范大學中心實驗室,吉林長春 130032)
葛花(PuerariaeFlos)為豆科植物野葛的干花蕾,又名葛條花,具有降低血壓[1]、擴張冠狀動脈血管、增加冠狀動脈血流量[2]、解酒保肝[3]、抗炎解熱、抗氧化等作用,是中國傳統醫學中具有代表性的解酒藥物[4]。異黃酮類化合物,如鳶尾苷元和鳶尾苷,是葛花的主要有效成分之一[5]。現代藥理研究表明,異黃酮類化合物可以通過激活肝臟內的ADH和ALDH活性來解酒,從而保護胃黏膜,因此葛花作為異黃酮含量豐富的植物,開發利用價值較高[6]。由于傳統中藥成分復雜,分離難度較大,因此,建立一個快速篩選分離中藥活性成分的方法是必要的。
傳統的分離葛花異黃酮方法有硅膠柱色譜法、中低壓柱色譜法、高效液相色譜法[7,8],這些常規方法存在耗時長、死吸附大的缺點造成樣品的缺失。高速逆流色譜(HSCCC)具有進樣量大、分離能力強、樣品損失小、樣品回收率高等優點,克服了固相載體對樣品的吸附損失、變性等缺點[9],已被廣泛應用于天然藥物成分的分析鑒定及分離制備[10]。超濾活性篩選法是一種以生物靶分子為目標,快速篩選天然藥物活性成分的一種方法[11]。使用超濾技術可以更快速的發現天然藥物中的活性成分。超高效液相色譜-串聯質譜(UPLC-MS/MS)技術可提供準確、可靠的相對分子質量及一些結構信息,在各領域中發揮著重要作用[12,13]。
本研究采用高速逆流色譜及超濾質譜聯用技術,從葛花粗提物中分離鑒定得到染料木苷、鳶尾苷、葛根素(圖1)三個高純度異黃酮單體化合物,旨在為葛花異黃酮類活性化合物的分離與純化提供科學有效的技術支持。……