消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠降血糖作用研究

蔡自立，馬紅梅，蘭 衛*,趙翡翠

(1.新疆醫科大學中醫學院，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆醫科大學附屬中醫學院，新疆 烏魯木齊 830002)

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一組以血漿葡萄糖水平升高為特征的疾病群。近年來，隨著社會與經濟的高速發展，全球糖尿病的患病率和病死率已呈快速上升的趨勢，成為世界上繼腫瘤、心血管病之后第三種嚴重危害人類健康的疾病[1]。據 2015年國際糖尿病聯盟(IDF)公布的數據顯示，全球糖尿病患者達 4.15 億人[2]。在我國患糖尿病人群中，以2型糖尿病(T2DM)為主，占 93.7%，其中成人占90%[3]。

消渴健脾膠囊是由葛根、白術、梔子、丹參、木瓜等13味藥材組成的復方制劑，具有健脾、消渴等功效，主要用于糖尿病的輔助治療。作者通過小鼠體重、空腹血糖(FBG)值、糖耐量(GT)、糖化血清蛋白(GSP)水平及血清胰島素(INS)水平等指標的測定，探究消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠的降血糖作用。

1 實驗

1.1 材料、試劑與儀器

昆明種雄性小鼠，體重(20.0±2.0) g，購自新疆醫科大學動物實驗中心[生產許可證SYXK(新)2011-0001]。

鹽酸二甲雙胍(批號180835)，北京京豐制藥集團有限公司；檸檬酸(批號6261041)、檸檬酸鈉(批號1114A0121)、鏈脲佐菌素(STZ，批號1228M035)，北京索萊寶科技有限公司；小鼠血清胰島素(INS)檢測試劑盒(ELISA法)(批號07/2019)，上海將來實業有限公司；糖化血清蛋白(GSP)測試盒(批號A037-2-1)，南京建成生物工程研究所；消渴健脾膠囊(批號20190503)，新疆金世康藥業有限公司。

DZKW-S-4型水浴鍋，北京永光眀醫療儀器有限公司；AB135-S型電子天平，瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司；MULTI-SKAN型酶標儀，美國Thermo Scientific公司；安穩血糖儀，三諾生物傳感股份有限公司。

1.2 動物造模與分組

取昆明種雄性小鼠75只，適應性飼養7 d后，隨機抽取10只為正常對照組，其余65只小鼠腹腔注射65 mg·kg-1STZ溶液 (STZ粉末用pH值4.5的構椽酸緩沖溶液溶解)，3 d后腹腔注射90 mg·kg-1STZ溶液，7 d后尾靜脈采血測定血糖，血糖值>11.1 mmol·L-1者即為造模成功。將50只2型糖尿病模型小鼠隨機分為模型組，陽性組(鹽酸二甲雙胍150.00 mg·kg-1)，消渴健脾膠囊低(238.88 mg·kg-1)、中(477.75 mg·kg-1)、高(955.50 mg·kg-1)劑量組，每組10只；正常對照組和模型組給予0.1 mL·(10 g體重)-1蒸餾水，連續給藥28 d。

1.3 指標測定

記錄給藥前及給藥后28 d內的小鼠體重，并每7 d檢測小鼠禁食12 h后空腹血糖值。末次給藥后，小鼠灌胃葡萄糖水溶液(2 g·kg-1)進行葡萄糖負荷，分別在負荷前(0 min)及負荷后30 min、60 min、120 min剪鼠尾取血，用血糖儀測定血糖值。將小鼠麻醉后頸動脈取血，分離血清，檢測GSP和INS水平。

1.4 統計分析

2 結果與討論

2.1 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠體重的影響(表1)

從表1可知，與正常對照組比較，給藥7 d后，模型組小鼠體重顯著降低，差異具有統計學意義(P<0.05)；與模型組比較，給藥28 d后，鹽酸二甲雙胍組、消渴健脾膠囊各劑量組小鼠體重顯著增加，差異具有統計學意義(P<0.05)。

2.2 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠空腹血糖值的影響(表2)

從表2可知，與正常對照組比較，模型組小鼠的空腹血糖值極顯著升高，差異具有統計學意義(P<0.01)；與模型組比較，給藥28 d后，鹽酸二甲雙胍組、消渴健脾膠囊各劑量組小鼠的空腹血糖值顯著降低，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。

表1 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠體重的影響

表2 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠空腹血糖值的影響

2.3 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量的影響(表3)

表3 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量的影響

從表3可知，與正常對照組比較，模型組小鼠的血糖值、曲線下面積(AUC)極顯著升高，差異具有統計學意義(P<0.01)；與模型組比較，消渴健脾膠囊中、高劑量組小鼠的血糖值、AUC值均顯著下降，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。

2.4 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠GSP、INS水平的影響(表4)

從表4可知，與模型組比較，消渴健脾膠囊各劑量組小鼠GSP水平顯著降低，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾膠囊高劑量組小鼠INS水平顯著升高，差異具有統計學意義(P<0.05)，但促進作用不及鹽酸二甲雙胍組。

表4 消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠GSP、INS水平的影響

2.5 討論

用STZ誘導2型糖尿病模型的機制是選擇性地破壞胰島β細胞，模型建立后，穩定性好，動物存活率高，是評價藥物療效及安全性最常用的糖尿病模型之一[4]。糖耐量是診斷糖尿病和評價藥物治療效果的指標之一，2型糖尿病的發生與糖耐量受損(IGT)有關，且與糖尿病慢性并發癥的發生發展關系密切[5]。本研究表明，消渴健脾膠囊能夠有效改善2型糖尿病小鼠的糖耐量，其中以中、高劑量組對糖耐量的影響顯著。GSP為血清葡萄糖與白蛋白及其它血清蛋白分子N末端的氨基上發生非酶促糖化反應，形成的高分子酮胺結構可以有效反映患者7～21 d的血糖水平，不受臨時血糖濃度波動影響[6]。

賀紅梅等[7]研究表明，2型糖尿病患者在基礎治療+鹽酸二甲雙胍片的基礎上予以消渴健脾膠囊，能更有效控制血糖水平，增強胰島細胞功能，進而優化臨床療效。張亞瓊[8]報道消渴健脾膠囊可降低脾虛濕盛型2型糖尿病患者血糖水平，明顯改善IR程度，有效降低IL-6、TNF-α水平。賀紅梅[9]研究表明，消渴健脾膠囊對維吾爾族痰濕體質2型糖尿病患者的中醫癥狀有一定改善作用。李娜等[10]研究表明，消渴健脾膠囊可提高2型糖尿病患者機體對胰島素的敏感性、改善胰島素抵抗、降低炎性因子水平，進而有助于改善血糖水平及臨床癥狀。肖艷等[11]研究表明，維吾爾族IGT患者在消渴健脾膠囊干預治療下，糖尿病發生率降低。賀紅梅等[12]研究表明，消渴健脾膠囊對維吾爾族2型糖尿病患者痰濕體質的治療效果比單用西藥效果好，干預期間無不良反應。馬丹等[13]研究表明，消渴健脾膠囊能提高胰島素敏感性，改善胰島功能，降低血糖。鄧德強等[14]研究表明，通過健脾活血化濕能夠改善2型糖尿病患者胰島β細胞功能，改善胰島素抵抗，降低早期2型糖尿病患者血清炎癥因子水平。

本研究中，消渴健脾膠囊中、高劑量組能顯著降低糖尿病小鼠的GSP水平，促進INS的分泌，進一步說明消渴健脾膠囊具有降糖作用。其作用機理可能是，中藥材中有些成分促進胰島素分泌或有些成分降低胰島素抵抗，使胰島素進一步發揮作用。

3 結論

為研究消渴健脾膠囊對2型糖尿病小鼠的降血糖作用，取75只昆明種雄性小鼠，除正常對照組10只外，其余小鼠腹腔注射鏈脲佐菌素建立2型糖尿病小鼠模型，將造模成功的2型糖尿病小鼠隨機分為模型組，陽性組(鹽酸二甲雙胍150.00 mg·kg-1)，消渴健脾膠囊低(238.88 mg·kg-1)、中(477.75 mg·kg-1)、高(955.50 mg·kg-1)劑量組，每組10只，正常對照組和模型組給予0.1 mL·(10 g體重)-1蒸餾水，連續給藥28 d后，測定小鼠體重、FBG值、GT、GSP水平及INS水平。結果表明，與模型組比較，給藥28 d后，消渴健脾膠囊各劑量組小鼠體重顯著增加，差異具有統計學意義(P<0.05)；消渴健脾膠囊各劑量組小鼠FBG值顯著降低，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾膠囊中、高劑量組小鼠GT顯著降低，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾膠囊各劑量組小鼠GSP水平顯著降低，差異具有統計學意義(P<0.05或P<0.01)；消渴健脾膠囊高劑量組小鼠INS水平顯著升高，差異具有統計學意義(P<0.05)。消渴健脾膠囊對糖尿病小鼠FBG值、GT、GSP水平有降低作用，提高INS水平，對鏈脲佐菌素所致2型糖尿病小鼠有一定的治療作用，為今后的臨床深入研究奠定了一定基礎。