隋欣
摘要:鵝細小病毒病也稱為代爾塞病、鵝肝炎、小鵝瘟,是雛鵝和雛番鴨的一種高度接觸性、致死性疾病。在歐洲和遠東的主要養鵝國家都有鵝細小病毒病的報道。依據特征性的臨床過程、發病日齡、大體病變和組織學病變,可初診。確診需經過實驗性的病毒分離。活苗和油乳劑滅活苗用于預防該病。
關鍵詞:鵝;細小病毒病;流行;臨床表現;病理變化;診斷;鑒別;預防
中圖分類號:$858.33 文獻標識碼:B 文章編號:2095-9737(2020)06-0112-02
1病原
鵝細小病毒是細小病毒科的一個成員,最近被證明與人依賴病毒屬相關。鵝細小病毒,除與番鴨細小病毒具有密切關系之外,與其他禽類或哺乳動物細小病毒無相似性。原發感染后,病毒主要在腸壁復制,在經過短暫的病毒血癥后,進入心臟、肝臟和其他器官。
2傳播與流行
感染禽經糞便排出大量病毒,直接或間接傳播造成發病。疾病暴發通常開始于感染種鵝經蛋傳播給易感雛鵝。有證據表明,亞臨床感染的老齡鵝可能是病原攜帶者。在之前無該病的國家或地區出現鵝細小病毒病暴發時,感染種蛋通常是病毒的來源。血清學證據表明,歐洲的多種野鵝都存在有該病毒。尚未發現其他禽類帶毒者或生物帶毒者。
3臨床表現
根據日齡的不同,易感雛鵝和雛鴨的臨床癥狀差異較大。1周齡之內的禽,病程發展快,伴隨有厭食,在2~5天內出現死亡。孵化室感染的雛禽,死亡率可達100%。日齡稍大的禽,病程較長,特征是鼻腔和眼有分泌物,出現腹瀉,虛弱。眼瞼和尾脂腺紅腫。急性期幸存的雛禽表現有生長遲緩,羽毛脫落,皮膚發紅,特別是背部皮膚。由于腹腔積液,雛禽常以企鵝狀姿勢站立。病毒對2~4周齡雛禽的致死率可達10%,但發病率可能更高。盡管成年禽可產生免疫應答,但是不表現任何臨床癥狀。
4病理變化
大體病變有舌頭和口腔覆蓋有纖維蛋白性假膜、肝周炎、心包炎、肺水腫、肝營養不良和卡他性腸炎。急性病例,心臟呈現特征性的心尖變圓,心肌蒼白。顯微病變主要是心肌細胞的明顯變性,在感染的細胞核內形成考德里A型包涵體。
5診斷
依據特征性的臨床過程、發病日齡、大體病變和組織學病變,可作出初步診斷。確診可使用來自易感鵝和番鴨的細胞培養物或胚胎進行病毒分離。通過電鏡檢查感染的細胞培養物,使用特異性鵝細小病毒抗血清進行中和試驗,都可用來確定細小病毒的存在。使用免疫熒光和PCR(聚合酶鏈式反應)方法,直接檢測感染禽組織中的抗原或病毒,也可確診該病。用于鵝細小病毒的血清學檢測方法,包括病毒中和試驗、瓊脂凝膠沉淀試驗和酶聯免疫吸附測定。
現介紹常用的實驗診斷方法一瓊脂免疫擴散試驗。
檢材的處理。血清:以0.01%的量加入硫柳汞,于4℃保存。鵝卵:吸取卵黃液20mL于鹽水瓶中,加入等量的生理鹽水充分振蕩均勻,再加入20mL氯仿振蕩30min。以3500r/min離心30min。取上清液約20mL裝入透析袋內,置40%聚乙二醇中濃縮6~12h至1~2mL,吸出濃縮液。再用等量的生理鹽水清洗透析袋,吸出合并于濃縮液中,控制最終濃縮倍數為5倍。最后以3500r/min離心30min,取上清液按0.01%量加入硫柳汞,凍結保存。
瓊脂平板制備。取瓊脂粉1g,加入CaCl20.2g,99mL生理鹽水,1%硫柳汞1mL,水浴煮沸融化。待冷至45~50℃,取瓊脂液5mL,平鋪于水平放置的潔凈載玻片(75mm×25mm)上,靜置凝固后使用。
檢驗方法。打孔:用直徑為5mm的金屬打孔器在瓊脂板上打孔,作成7孔1組的梅花圓形孔(外周6孔,中間1孔)。孔徑為5mm,孔間距4mm。用針尖挑出孔中的瓊脂。加樣:中心孔加抗原,外周第1、4孔加標準陽性血清,第2、3、5、6孔分別加被檢血清(或卵黃液)。每孔加滿以不溢出為度。靜置10min,放入濕盒,15~37℃反應。于24h進行第一次觀察,48h作第二次觀察,72h作最后觀察。
結果判定。若標準陽性血清孔與抗原孔之間應出現一條清晰的白色沉淀線,則試驗成立。若沒有沉淀線或沉淀線不明顯,則試驗應重做。①陰性反應:被檢血清孔與抗原孔之間不出現沉淀線,標準陽性血清孔與抗原孔之間的沉淀線直伸延到被檢血清孔邊緣無彎曲者。②可疑反應:被檢血清孔與抗原孔之間不形成沉淀線,鄰近的標準陽性血清孔與抗原孔之間的沉淀線末端偏向被檢血清孔的內側彎曲。③陽性反應:被檢血清孔與抗原孔之間出現明顯、清晰的白色沉淀線,并與標準陽性血清孔的沉淀線末端相融合。
6鑒別
雖然鵝細小病毒引起鵝和番鴨發病,但是番鴨也感染另外一種抗原性相關的細小病毒。這種病毒可引起番鴨出現嚴重的疾病,但不能造成鵝發病,可使用分子生物學方法進行檢測和鑒別。鑒別診斷也應包括鴨病毒性腸炎,該病可感染各種水禽。鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種致死性疾病,但不會引起鵝和番鴨發病。鴨疫里默氏桿菌和多殺性巴氏桿菌也可引起雛鵝和番鴨出現高死亡率,但是可通過細菌分離和鑒定進行鑒別。
7預防
孵化的種蛋必須來源于已確認無鵝細小病毒的鵝群,很多暴發都是由于將不同來源種蛋同時孵化引起的。只從確保無鵝細小病毒病的國家進口種蛋。疫病暴發后存活的鵝不能作為種用。活苗和油乳劑滅活苗都可使用,并已廣泛應用于疾病流行的國家。對種群進行免疫接種,可使其子代獲得高水平的母源抗體。