基于市售重樓飲片質量研究對重樓飲片標準的思考

賈天穎 高巖 王海麗 辛潔萍 白玉瑩 王敏 韓婷 劉夢楠 李向日 林瑞超

摘要?目的：對重樓市售飲片進行基于性狀鑒別、浸出物、含量測定等多方面分析，以期為重樓的質量評價和重樓飲片市場的良性發展提供數據支持。方法：建立了重樓飲片浸出物測定方法，采用熱浸法測定其醇溶性浸出物，對重樓飲片炮制方法進行了研究，測定了重樓飲片外觀性狀及重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量。結果：重樓飲片浸出物含量之間的差異性較大，云南產地浸出物的平均含量略小于四川產地浸出物含量;市售重樓飲片大部分為厚片，少數為段，均不符合《中華人民共和國藥典》（2015年版）“重樓”炮制項“切薄片”的規定;重樓飲片皂苷含量差異較大，四川產地重樓飲片皂苷含量略大于云南產地，多數重樓飲片所含皂苷以重樓皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅶ為主，少數樣品重樓皂苷Ⅵ含量較高，可能存在摻偽現象。結論：為保證臨床使用需求及藥效，建議《中華人民共和國藥典》修訂飲片炮制項、含量測定項，并補充性狀項。

關鍵詞?重樓飲片;質量研究;《中華人民共和國藥典》;標準修訂;炮制;含量測定;飲片性狀

Abstract?Objective：To conduct analysis based on character identification，extracts，content determination and other aspects of Chonglou′s commercially available Decoction pieces，with a view to providing data support for Chonglou′s quality evaluation and the benign development of Chonglou′s Decoction Pieces market.Methods：The determination method of extracts of Chonglou Decoction Pieces was established，and the alcohol-soluble extractives were determined by hot dip method.The processing method of Chonglou Decoction Pieces was studied.The appearance characteristics of Chonglou Decoction Pieces and Chonglou SaponinⅠ，Ⅱ，Ⅵ，Ⅶ content was determined.Results：The difference in extract content of Chonglou Decoction Pieces was large.The average content of extract from Yunnan origin was slightly smaller than that in Sichuan; the majority of commercially available Chonglou Decoction Pieces were thick tablets，and a few were segments，which were not in line with “Chonglou” item of cutting thin slices in The Pharmacopoeia of the People′s Republic of China（2015 edition）; the content of saponins in Chonglou Decoction Tablets is quite different，the content of saponins in Sichuan province is slightly larger than that in Yunnan，and saponins IN most of the tablets contained in Zhonglou Decoction were Chonglou saponins Ⅰ，Ⅱ，and Ⅶ.A few samples have a high content of Chonglou saponins VI，and adulteration may exist.Conclusion：In order to ensure the clinical use requirements and efficacy，it is recommended that in Chinese Pharmacopoeia we should revise the processing items and content determination items of decoction pieces，and supplement the trait items.

Keywords?Chonglou Decoction Pieces; Quality Research; Chinese Pharmacopoeia; Standard revision; Processing; Content determination; Decoction characteristics

中圖分類號：R283;R921.2文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.13.007

《中華人民共和國藥典》（2015年版）規定重樓為百合科植物云南重樓Paris polyphylla Smith var.yunnanensis（Franch.）Hand.-Mazz.或七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis（Franch.）Hara的干燥根莖[1]。重樓始載于漢代《神農本草經》，列為下品，其味苦，性微寒;有小毒，歸肝經。主要用于驚癇，搖頭弄舌，下三蟲，去蛇毒等癥[2]。其臨床應用歷史悠久，效果顯著，具有抗腫瘤[3-4]、抗炎[5-6]、鎮靜鎮痛[7-8]和止血[9]等作用，是中醫常用藥之一，也是多種常用傳統復方中成藥的原料藥之一。

近年來，由于重樓需求量逐漸增加，重樓野生資源趨于枯竭，再加上重樓種植難度大、培育時間久等因素，導致重樓市場缺口不斷加大，價格急劇上升。致使重樓在市場流通中以劣充優，以假充真的現象屢見不鮮。為此，有必要對全國范圍內重樓飲片的質量現狀進行研究，為合理利用重樓資源、維護市場正常流通秩序，進一步優化市場交易的公平性提供依據。

1?材料與方法

1.1?材料

1.1.1?分析樣品

本實驗的30批重樓樣品收集于全國范圍內各重樓飲片生產公司、藥材流通市場和藥店，主要產地為云南、四川及其他省份，具體信息見表1。

1.1.2?對照品

重樓皂苷Ⅰ對照品（批號：111590-201604，純度為93.6%）、重樓皂苷Ⅱ對照品（批號：111591-201604，純度為91.4%）、重樓皂苷Ⅵ對照品（批號：111592-201604，純度為97.0%）、重樓皂苷Ⅶ對照品（批號：111593-201604，純度為94.0%），以上對照品均購于中國食品藥品檢定研究所。

1.1.3?試劑與儀器

乙腈（色譜純，Fisher公司，批號：387L-25962U）;乙醇（分析純，北京化工廠，批號：20190110）;甲醇（分析純，北京化工廠，批號：20190115）;娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團有限公司，批號：06GH 02685）。

高效液相色譜儀（Waters公司，型號：Waters 2489）、色譜柱（Agilent公司，Agilent Zorbax SB-C18，4.6 mm×250 mm，5 μm）、十萬分之一電子天平（北京賽多利斯儀器系統公司，型號：BT25S）、電子天平（上海越平科學儀器有限公司，型號：FA1104B）。

1.2?方法

1.2.1?外觀性狀測定方法

中藥飲片的外觀性狀是鑒定飲片來源真偽的重要基礎資料，也是中藥飲片加工原藥材質量、加工方法、儲藏方法和周期是否得當的關鍵判斷信息。本實驗對重樓市售飲片的表皮顏色、斷面顏色、飲片質地和相關片型等指標進行測定。

1.2.2?浸出物測定

1.2.2.1?浸出物測定方法的建立

浸出物測定法為水或其他適宜溶劑對藥材或飲片中可溶性物質總量的測定方法，一般情況下，藥材浸出物可更加全面的反映藥材的內部質量。根據藥典規定，浸出物測定方法分為水溶性浸出物測定法，醇溶性浸出物測定法和揮發性醚浸出物測定法。

重樓的主要含甾體皂苷類成分，因此對重樓浸出物測定方法的建立應在水溶性浸出物測定法和醇溶性浸出物測定法中進行篩選。為此，依照2015年版藥典第四部中通則2201“浸出物測定法”中的水溶性浸出物測定法和醇溶性浸出物測定法進行實驗，本實驗以濾液能否完全濾過及濾液中化學成分種類為評測指標，評價不同浸出物方法是否適用于重樓。

實驗表明不同產地的重樓飲片和藥材的水溶性浸出物不能完全濾過，以乙醇、80%乙醇、稀乙醇為溶劑分別對重樓進行醇溶性浸出物冷浸法預實驗，發現以上浸出液均難以濾過或不能完全濾過。造成該問題的原因可能是重樓中淀粉等多糖類成分含量較高，黏度較高堵住濾紙，因此放棄應用水溶性浸出物法和醇溶性浸出物冷浸法對重樓質量的評定。

對醇溶性浸提物所使用的乙醇濃度進行預實驗篩選：95%、80%、75%、70%、60%、50%，見表2。

實驗發現，50%、60%、70%乙醇的浸提液不能完全濾過，75%、80%、95%乙醇浸提液能過濾完全，但80%和95%乙醇成分溶出率較低，故選擇75%乙醇為溶劑對樣品進行熱醇溶性浸出物含量測定。

1.2.2.2?樣品浸出物測定方法

以75%乙醇為溶劑對樣品進行醇溶性浸出物熱浸法測定。

1.2.3?HPLC含量測定方法

根據《中華人民共和國藥典》（2015年版）中重樓含量測定項對市售飲片進行含量測定。

2?結果

2.1?外觀性狀測定結果

性狀鑒別具體信息見圖1、表3。

樣品多為近圓形、橢圓形，表面多為白色、黃白色，少數為淺棕色，周邊表皮黃棕色至棕褐色，兼有粉性和角質。

2.2?市售重樓飲片浸出物測定結果?結果見表4。

重樓飲片浸出物最大值為32.0%，最小值為9.0%，極差為23.0%，均值為17.4%。其中云南產地重樓飲片浸出物最大值為32.0%，最小值為9.0%，極差為23.0%，均值為16.7%。四川產地重樓飲片浸出物最大值為26.9%，最小值為9.6%，極差為17.3%，均值為17.8%。

從以上結果可知，重樓飲片浸出物之間的差異性較大，云南產地浸出物的平均值略小于四川產地浸出物含量，如圖2。

2.3?樣品含量測定結果

具體結果見表5。

重樓飲片皂苷含量差異較大，四川產地重樓飲片皂苷含量略大于云南產地，見圖3。多數重樓飲片重樓皂苷Ⅵ檢出含量對其限度標準是否合格并未造成影響，少數樣品出現重樓皂苷Ⅵ含量較高現象。

3?討論

3.1?對《中華人民共和國藥典》重樓藥材含量測定項的思考

含量測定實驗結果發現，多數重樓飲片重樓皂苷Ⅵ檢出含量對其限度標準是否合格并未造成影響，少數樣品重樓皂苷Ⅵ含量較高，課題組前期研究可知，重樓易混淆品延齡草中重樓皂苷Ⅵ含量較高，對重樓藥材及飲片真偽辨識影響較大[10]，因而樣品2、5、13、22、30可能存在摻偽現象。

3.2?重樓飲片厚度研究及對《中華人民共和國藥典》重樓飲片炮制項的思考

2015年版藥典中規定重樓飲片為薄片，其中第四部0213炮制總則規定，薄片為1～2 mm。通過對重樓飲片片厚相關信息進行測定和整理后，結果表明，30批飲片的片厚均超出2015年版藥典對重樓飲片的規定，其中大部分為厚片，少數為段，因此對重樓飲片切片厚度進行研究。

將潤制完全（潤制48～72 h，至藥材完全軟化）的重樓藥材，置于切藥機上，分別切制為薄片（1～2 mm）和厚片（2～4 mm）2種規格。結果表明：薄片的翹片率和敗片率要高于厚片。

切制飲片厚度的篩選評價指標為飲片收率、敗片率。

重樓藥材粉性較強、直徑較大，根據飲片切制原則“質堅宜薄，質松宜厚”，粉性強、直徑大的藥材如山藥、防己、天花粉等均為切厚片。經實驗可得，重樓手工切薄片敗片率達到24.15%，損耗過大。因而認為重樓適宜切厚片，重樓厚片于切制、運輸、貯藏等過程中不易破碎，敗片率降低。

同時根據重樓在各版藥典中的演變過程可知，1977年版《中華人民共和國藥典》中重樓藥材炮制項為“除去雜質，洗凈，潤透，切片，曬干”。

因此建議藥典更改飲片規格，對重樓飲片片厚不作要求，改切薄片為切片。

3.3?對《中華人民共和國藥典》重樓飲片性狀項的思考

2015年版藥典中未對重樓飲片的外觀性狀進行規定，因此借鑒重樓藥材外觀性狀對其飲片進行規范，具體規定如下：“本品為近圓形、橢圓形或不規則片狀。表面白色、黃白色或淺棕色，周邊表皮黃棕色或棕褐色，粉性或角質”。對重樓飲片表皮顏色、斷面顏色和質地相關信息進行整理，所有批次飲片基本與上述規定相一致。

2015年版藥典中未對重樓飲片的直徑進行規定，通過采集和測定重樓飲片的外觀性狀相關指標，結果表明其中橫切片有16批，縱切片14批，樣品4、10、11、19、22、30飲片直徑整體小于1.0 cm，因此擬不對其飲片直徑進行規范。

綜上所述，建議《中華人民共和國藥典》修訂飲片炮制項，改切薄片為切片;修訂含量測定項，去掉建議藥典重樓標準去掉重樓皂苷Ⅵ，保留重樓皂苷Ⅰ，Ⅱ，Ⅶ，但限度不變，仍為“總量不得少于0.60%”;并補充飲片性狀項。

近年來，隨著重樓的臨床需求量不斷增大，市場流通中的摻偽現象也愈發嚴重。該研究對市售重樓飲片的質量進行了分析研究，為重樓飲片的質量評價及《中華人民共和國藥典》重樓標準的修訂提供了理論依據。中藥飲片質量是影響臨床療效的關鍵，中藥飲片質量標準是否合理關系著飲片市場的發展和臨床用藥的安全性、有效性。多年生的藥用植物的根及根莖部位入藥，常面臨野生資源不能滿足藥用的情況，如人參、三七、重樓、防風[11]等，更應充分考慮其市場流通中的實際情況，對其標準進行合理地修訂和完善。

參考文獻

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（2020-06-10收稿?責任編輯：徐穎）