兒童血液培養病原菌的分布及耐藥性分析

張薇薇，申美靜，吳凱峰

(遵義醫科大學第三附屬醫院(遵義市第一人民醫院)兒童保健科，貴州 遵義)

0 引言

血流感染是病原體及毒素通過各種途徑侵入血液循環中引起的一種全身性、嚴重性的一種感染疾病。兒童敗血癥病情比較復雜、病情發展較迅速、兒童抵抗力十分低下，所以兒童血流感染的發病率和死亡率均較高。近年來由于免疫抑制劑的廣泛應用、免疫力低下病人不斷升高以及抗菌素大量使用，使血流感染病人數量不斷增加，病死率也逐年不斷增加，高達20%-40%[1]。診斷兒童血流感染的最可靠方法是進行兒童血液細菌培養，進行兒童血液細菌培養對控制和治療兒童血流感染具有非常重要作用。

1 實驗資料與方法

1.1 實驗研究對象

收集2019年01月至01日至2019年12月31日在遵義醫科大學第三附屬醫院(遵義市第一人民醫院)住院并進行血液培養的兒童病人標本共計13906份，其中513份血培養標本中培養出病原菌。

1.2 血液培養標本采集方法

兒童患者溫度大于38.5℃或寒顫時，遵循無菌操作方式抽取3-5mL肘靜脈血，然后注入含抗生素吸附瓶的兒童血液培養瓶內，混勻后立刻送到檢驗科，并放入法國梅里埃的全自動血液培養系統中進行培養。

1.3 主要試劑及儀器

購買血平板(BA)；購買不含抗生素巧克力平板；陰性桿菌鑒定卡；酵母菌鑒定卡；陽性球菌鑒定卡；非發酵桿菌藥敏卡；肺炎鏈球菌藥敏卡；VITEK MS基質液；質譜分析系統(VITEK MS)；細菌鑒定及藥敏分析統(VITEK2)；全自動血液培養系統(法國梅里埃3D)；抗生素吸附兒童血培養瓶。

1.4 細菌培養鑒定及藥物敏感試驗

血培養儀器報警陽性后，將陽性瓶卸載并轉種于血平板和不含抗生素巧克力平板上，接種后放于二氧化碳孵育箱中過夜培養，第二天挑取單個菌落用質譜分析系統或細菌鑒定系統進行細菌的鑒定和藥物敏感試驗。

1.5 室內質量控制

采用美國菌種貯存中心購買標準菌株，包括鉛黃腸球菌、霍氏腸桿菌、肺炎鏈球菌、葡萄牙念珠菌、糞腸球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、光滑念珠菌等標準菌株進行室內質量控制，標準菌株的選用和判斷標準遵循CLSI(臨床和實驗室標準化協會)抗微生物藥物敏感試驗標準文件、法國梅里埃廠家說明書或全國臨床檢驗第四版操作規程[2-4]的要求。

2 結果

2.1 病原菌分類

2019年01月至01日至2019年12月31日，共檢測兒童血液培養標本13906份，檢測出病原菌513株，陽性率占比3.7%；其中452株為革蘭陽性球菌，所占比率為88.10%；53株為革蘭陰性桿菌，所占比率為10.34%；8份為酵母樣真菌，所占比率為1.56%，病原菌分類及占比數據一覽表，見表1。

表1 病原菌分類一覽表

2.2 病原菌的分布

513株陽性菌株中，共檢測出178株人葡萄球菌，所占比率34.69%；132株表皮葡萄球菌，所占比率25.73%；36株溶血葡萄球菌，所占比率7.02%；15株大腸埃希氏菌占比2.93%；15株肺炎鏈球菌，占比2.93%；137株其它細菌，所占比率26.70%等。兒童血液培養分離病原菌分布構成比見表2。

表2 病原菌分布一覽

2.3 藥物敏感結果

革蘭陽性球菌分離率居首位的是人葡萄球菌，對萬古霉素、利奈唑胺、替加環素均敏感；對左氧氟沙星敏感率為74.8%；對紅霉素敏感率為19.8%；對青霉素敏感率為2.7%；對苯唑西林的敏感率為90.1%。革蘭陰性桿菌中以大腸桿菌分離率為主，對亞胺培南、厄他培南、美羅培南和頭孢替坦均敏感；對頭孢他啶的敏感率為88.9%；對頭孢吡肟的敏感率為77.8%；對氨芐西林的敏感率為53.3%；對頭孢唑啉的敏感率為63.6%；對頭孢呋辛的敏感率為55.6%。肺炎鏈球菌對萬古霉素、厄他培南、左氧氟沙星、青霉素、利奈唑胺、莫西沙星的敏感率為100%；對紅霉素的敏感性為7.14%；對美羅培南的敏感性為71.4%。

3 討論

根據此次實驗結果顯示在我院兒童血液培養標本13906份樣本中，全自動血液培養儀器報警陽性瓶數量為513份，兒童血液培養陽性分離率占比3.7% ，兒童血培養陽性率略低于國內外文獻報道陽性率，可能與地域不同、標本送檢量、送檢人群、標本污染、標本采集方法、采集血量的多少和采血時間等因素有關系[5-6]。在兒童血流感染中分離的病原菌中，革蘭陰性桿菌明顯低于革蘭陽性球菌，凝固酶陰性的葡萄球菌在革蘭陽性球菌中居首位，其中以人葡萄球菌分離率最高，均未分離出對萬古霉素、利奈唑胺和替加環素耐藥的菌株，對紅霉素和青霉素的耐藥性均大于20%；大腸埃希菌在革蘭陰性桿菌分離中占主要地位，其中大腸埃希菌對亞胺培南、厄他培南、美羅培南、阿米卡星和頭孢替坦的敏感性為100%；肺炎鏈球菌對萬古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、青霉素和莫西沙星的敏感性均大于90%。

兒童的身體條件較差，機體免疫系統不完善，抵抗力較差，非常容易引起細菌感染，進而引起細菌進入到血循環中引進血流感染，臨床應多采集兒童血液標本進行培養，并重視兒童血液培養病原菌的分布情況及耐藥性特點，減少抗生素使用不規范性以及減少多重耐藥菌株的產生。

綜上所述，我院兒童血液培養病原菌檢測中以革蘭陽性球菌居首位，革蘭陰性桿菌感染次之，酵母樣真菌感染最少。現今，兒童血流感染的病死率和耐藥率逐年增加，臨床醫生應依據病原菌的分布特點以及病原菌的藥物敏感情況進行抗生素的合理化、規范化選擇，降低病人的死亡率，提高兒童患者血流感染的治療效果。