860例女性高危型HPV 感染結果分析

鄭婷，韓迎莉，陶玉梅，趙佩瑤，鄒夢琦，謝田田，王靖

（河南大學第一附屬醫院，河南 開封）

0 引言

子宮頸癌（Cervical cancer,CC）是危害全球女性健康最常見的生殖系統惡性腫瘤，具有多階段、多因素、長期性以及全球分布等特點，多基因相互作用及生物學因素是引起宮頸癌的重要原因。研究表明高危型人乳頭狀瘤病毒（high-risk human papillomavirus，HR-HPV）持續感染在宮頸癌和宮頸癌前病變的發生發展過程中發揮著極為重要的作用[1,2]。人體感染HR-HPV 后，病毒基因整合進人基因組，E6 和E7 癌基因蛋白異常表達可以引發宮頸癌的發生。國際癌癥研究署（International Agency for Research onCancer，IARC）調查數據顯示，宮頸癌是女性第四大惡性腫瘤，2018年全球子宮頸癌新發病例約57 萬，死亡31 萬；另有報道發現宮頸癌發病率與國家經濟發展水平具有相關性，在經濟不發達國家中，其發病率僅次于乳腺癌，居第二位，死亡率位于第一位[3,4]。在我國，近年來由于人們生活方式和環境等的影響，宮頸癌發病率和死亡率均呈上升趨勢，發病率由1988年5.04/10 萬上升到2015年16.56/10 萬，死亡率由1.71/10 萬上升到3.29/10萬[5,6]。宮頸癌如此高的發病率，為了控制其不斷增長的形勢，需要加強宣傳宮頸癌相關知識和擴大宮頸癌篩查，確保宮頸癌在全球范圍內被高度重視。雖然宮頸癌患病情況嚴峻，但是卻是目前唯一病因明確的癌癥，因此，可以通過早期快速、準確的篩查女性宮頸HR-HPV 感染情況從而對宮頸癌進行徹底防治[4]。本研究通過對860例女性進行HR-HPV 檢測，分析HR-HPV 的感染情況,為宮頸癌的診斷預防提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年3月至2019年11月于河南大學第一附屬醫院就診的女性患者宮頸脫落細胞標本，共860例(年齡16歲-95歲，去除重復住院及復診病例)，分別來自于婦產科門診（315例）、皮膚科（237例）、健康體檢中心（214例）及住院病房（94例），進行15 種高危型人乳頭瘤病毒（HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/53/56/58/59/66/68）基 因分型檢測。分析HR-HPV 的感染情況、基因亞型分布特征、不同年齡段的陽性感染率及在婦產科門診、皮膚科、健康體檢中心和住院病房女性中的感染情況。本研究已經獲得患者及家屬同意且已簽署知情同意書，并且所有標本獲得河南大學第一附屬醫院醫學倫理研究委員會批準通過，批準文號為倫理L2019-539。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集

采集宮頸脫落細胞前，要求受檢者處于非月經期，48小時內不應有性行為，檢查3 天內禁止進行陰道沖洗或使用避孕藥膏等陰道內用藥。使用一次性宮頸細胞采集器(潮州凱普生物化學有限公司生產)進行樣本采集，對于婦女宮頸可疑感染患者，采集宮頸口脫落細胞。采集前先清理干凈宮頸口的分泌物，用宮頸刷輕輕搓動使其順時針旋轉3-4 圈，然后慢慢取出將其放入裝有細胞保存液的無菌樣本管中，密閉立即送檢。

1.2.2 高危型HPV分型檢測試劑和儀器

采用湖南圣湘生物科技有限公司提供的15 種HRHPV 核酸檢測試劑盒及ABI 7500 熒光定量PCR 檢測儀，嚴格按照試劑說明書進行試劑準備、加樣、擴增及結果判讀，用于體外定性檢測女性宮頸脫落上皮細胞樣本中的15種HR-HPV 的核酸DNA，最低檢測限為1000 copies/mL。

1.3 統計學處理

采用SPSS 24.0 軟件對數據進行統計分析，計數資料以例數（n）或百分率(%)表示, 組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡段HR-HPV 陽性感染率

在860例 篩 查 樣 本 中，HR-HPV 陽 性 感 染 率19.88%（171/860）。按年齡將受檢者分為7 組，在HR-HPV感染的各年齡組中，呈現兩個年齡高峰期，分別為≤20歲陽性率34.09%（15/44）和41～50歲陽性率29.72%（85/286），51～60歲年 齡 段 陽 性 率 最 低11.76%（14/119），其 余 各年 齡 段 的 感 染 情 況：21～30歲14.18%(19/134）、31～40歲13.82%(30/217）、61～70歲12.5%(6/48） 及 ≥71歲16.66%(2/12），不同年齡段女性HR-HPV 感染率比較差異有統計學意義(χ2=35.733，P＜0.05)，檢測結果詳見表1。

表1 高危型HPV 感染在不同年齡組的分布

2.2 HR-HPV 各基因亞型感染情況

本研究中，HR-HPV 基因亞型感染前5 位為HPV52(6.05%)、HPV16 (5.0%)、HPV53 (3.84%)、HPV58 (2.33%)、HPV51 (1.98%)，HPV18 型感染率較低（0.81%）； HPV16型單一感染率為2.44%(21/860)；HPV18 型單一感染率為0.23%(2/860)， HPV16 及HPV18 型雙重感染率為0.35%(3/860)，不同HR-HPV 基因亞型感染率比較差異有統計學意義(χ2=178.121，P＜0.05)，檢測結果詳見表2。

表2 高危型HPV 各基因亞型感染情況

2.3 HR-HPV 感染類型的陽性率及構成比

根據感染HR-HPV 亞型的數量將860例受檢女性分為四組，分別是單一型別感染率13.14% (113/860)，雙重型別感染率5.17% (44/860)，三重型別感染率0.93%(8/860)，四重及以上型別感染率0.70% (6/860)，其中單一型別感染率最高，且感染HR-HPV 不同亞型數量陽性率比較差異有統計學意義(χ2=184.846，P＜0.05)，檢測結果詳見表3。

表3 感染不同數量高危型HPV 亞型的陽性率及構成比

2.4 不同科室HR-HPV 感染情況分析

通過不同科室HR-HPV 感染情況分析，發現婦產科門診感染率25.40%（80/315），皮膚科感染率28.27%（67/237），健康體檢中心感染率為8.41%（18/214），住院病房感染率為6.38%（6/94），婦產科門診和皮膚科感染率較高，不同科室比較差異有統計學意義（χ2=44.910，P＜0.05），檢測結果詳見表4。

表4 不同科室高危型HPV 感染分布情況

3 討論

流行病學調查發現宮頸癌患者中高達99.7%的人合并有HPV 感染,絕大多數為高危型，少部分為低危型，也有兩種型別混合感染，其中HR-HPV 持續感染（尤其是HPV16/18 型）與宮頸癌的發生發展密切相關。HPV 主要通過性行為傳播，絕大多數女性感染人乳頭瘤病毒為一過性，無明顯的臨床癥狀體征，且能被自身免疫系統清除，只有少部分人HPV 呈持續感染，若感染時間超過10-20年，可發展為癌前病變或癌[7,8]。研究表明我國女性HR-HPV感染率為16.8%，＜25歲和41～45歲感染率最高，常見的HR-HPV 型別（感染率）為HPV52（2.8%）/16（2.7%）/58（1.7%）/33（1.1%）/18（1.1%），其感染率高低主要取決于初次性行為年齡和性行為習慣，若女性性生活過早、存在多個性伴侶、多孕多產或者長期口服避孕藥等，其HR-HPV 感染率較普通人群高[9]。

HPV 屬于乳頭瘤病毒科，是一種嗜上皮組織的小DNA 病毒,呈雙鏈環狀并且無包膜，主要侵襲生殖器官。根據HPV 病毒L1 基因片段不同，目前發現約有200 多種型別，其中30 多種HPV 亞型與宮頸癌的發生密切相關；根據其致癌潛力，可分為高危型（HR-HPV）和低危型(LR-HPV)兩種：HR-HPV 感染主要引起宮頸癌等惡性病變，包括HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/53/56/58/59/66/68 等基因型別；LR-HPV 感染主要導致生殖器疣等良性病變，包括HPV6/11 等基因型別[10,11]。子宮頸癌依據累及宮頸上皮程度不同分為子宮頸低級別鱗狀上皮內病變（Low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL），即輕度子宮頸癌上皮內瘤變（CIN1），和高級別鱗狀上皮內病變（High～grade squamous intraepithelial lesion，HSIL），即部分中度CIN（CIN2）和重度CIN（CIN3）。研究表明，在HSIL 和宮頸癌的發展進程中，不同亞型的HR-HPV 多重感染與單一感染比較,其致病風險更高，且相互之間可能發揮協同作用。HPV16、HPV18、HPV52 和HPV58 多重感染在宮頸癌的發生發展中意義重大，其中HPV16 和HPV18 混合感染最高，HPV16 和HPV18 的感染率隨著宮頸癌病變程度的增加而顯著升高，且HSIL 中HPV16 和HPV18 的感染率44.1%高于LSIL 中的22.3[12,13]。

本研究結果表明，860例女性患者共檢出HR-HPV 陽性171例,總感染率為19.88%。HPV 感染存在兩個年齡高峰期，分別為≤20歲陽性率33.33% 和41～50歲陽性率23.49%，不同年齡段比較差異有統計學意義(P＜0.05)，這與我國HR-HPV 感染流行病學大致相符[9]。年輕女性（≤20歲）HPV 感染率偏高，可能是由于初次發生性行為年齡過早，性伴侶數量較多，性教育知識缺乏，自我保護意識薄弱以及宮頸上皮及免疫系統發育不夠成熟等因素，當初次或多次發生性生活時，極易感染HPV；中年女性（41～50歲）HPV 感染率偏高，則可能因為隨年齡增長而免疫力下降，病毒清除力較弱以及絕經期前后體內雌孕激素水平變化較大，生理和免疫調節功能紊亂，導致HPV易感。健康女性進行HR-HPV 篩查，≤20歲和41～50歲的HR-HPV 感染患者，應該引起臨床足夠重視，加強HPV健康宣教，提高防護意識，同時加強隨訪，從而降低宮頸癌的發病率。HR-HPV 感染的優勢型別為HPV52 (6.05%)、HPV16 (5.0%)、HPV53 (3.84%)、HPV58 (2.33%)、HPV51(1.98%)，HPV18 型感染率較低（0.81%），這與溫江濤等人的研究結果有一定差異[14]，且不同型別感染率比較差異有統計學意義（P＜0.05），表明HR-HPV 基因亞型感染具有明顯的地域性，不同地區的經濟文化水平及人們生活習慣不同，是造成HPV 感染率存在差異的主要原因，可以根據不同地區HR-HPV 基因亞型感染特點指導當地女性有針對性的接種不同類型HPV 疫苗，從而對宮頸癌進行有效預防。一般認為，HPV16/18 型持續感染與宮頸癌的發生密切相關，本研究發現健康人群篩查HPV52/16 型感染率較高，HPV18 型感染率偏低，健康人群HPV52 型高感染率是否可導致宮頸癌的發生目前尚無定論，有待進一步研究。婦產科門診及皮膚科HR-HPV 感染率明顯高于健康體檢中心及住院病房，分別為25.39%、27.66%、8.41%、和8.33%，差異有統計學意義（P＜0.05）。婦產科門診和皮膚科高感染率可能是由于大多數女性觀念上還是傾向專科專治，婦產科和皮膚科就診人數多，陽性率高，建議加強普通人群HPV 健康宣教。

綜上所述，860例女性HR-HPV 感染率為19.88%，HPV52 型感染率最高,其次為16/53/58/51 型，以單一型別感染為主,≤20歲和41～50歲感染率較高, 婦產科門診和皮膚科感染率較高。應該對于≤20歲和41～50歲篩查出HR-HPV 陽性的女性加強HPV 知識宣教，同時做好隨訪，大力提倡和普及HPV 基因型的檢測,尤其是高危基因亞型,以便指導臨床更準確、更及時的對宮頸病變的進展作出預判和有效干預。