動物源性食品中藥物殘留HPLC法測定的應(yīng)用實(shí)踐

戴琳 詹承勇 王祎

摘 要：長期以來，中國一直處于食物供應(yīng)短缺的狀態(tài)，尤其是動物源性食品的進(jìn)口量很大。動物源性食品流通檢驗(yàn)，是保證武漢及其周邊省市的市民“舌尖安全”的必要舉措，在我單位的工作中越來越重要。動物源性食物是人類飲食的重要組成部分。藥物殘留是危害動物源性食品安全的主要因素。安全優(yōu)質(zhì)、無污染、無殘留的動物源食品是人們追求的目標(biāo)。在其中HPLC測定法起到非常重要的作用，本文主要對在動物源性食品藥物殘留檢驗(yàn)中HPLC法的具體應(yīng)用進(jìn)行研究。

關(guān)鍵詞：動物源性食品;藥物殘留;HPLC法測定法;應(yīng)用實(shí)踐

1、動物源性食品藥物殘留問題分析

1.1 動物源性食品殘留藥物來源

因缺乏科學(xué)喂養(yǎng)的技能，一些養(yǎng)殖場和養(yǎng)殖個體使用非法藥物、濫用抗生素，過度用藥的現(xiàn)象普遍存在。動物性食品中最重要、最常見的檢驗(yàn)就是獸藥檢驗(yàn)。根據(jù)過去幾年的檢測結(jié)果和經(jīng)驗(yàn)，常見獸藥殘留有42種，包括鎮(zhèn)靜劑、磺胺類藥物、苯并咪唑類藥物和糖皮質(zhì)激素等，最為大眾知曉的“禁藥”是“瘦肉精”（鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇等藥物的統(tǒng)稱）。但根據(jù)近年來國家查處非法獸藥生產(chǎn)銷售和使用的案例頻頻出現(xiàn)，在利益的驅(qū)使下，獸藥檢測為首的動物源性食品檢測不能停止。

1.2 動物源性食品藥物殘留的危害

長期攝入含獸藥的動物性食品后，藥物會在人體內(nèi)不斷積累。當(dāng)積累到一定程度時(shí)，會對人體產(chǎn)生毒性作用，從而導(dǎo)致急性和慢性中毒。用作家畜和家禽生長促進(jìn)劑的抗微生物劑在低劑量使用時(shí)也會使一些細(xì)菌對抗生素產(chǎn)生耐藥性。長期接觸這些低濃度的藥物后，人類病原體容易產(chǎn)生耐藥菌株。一旦細(xì)菌的耐藥性傳播給人類，就可能產(chǎn)生用抗生素也控制不住人類的細(xì)菌疾病感染的風(fēng)險(xiǎn)。

2、HPLC法在動物源性食品藥物殘留檢測中的應(yīng)用

2.1 HPLC法原理

HPLC法全稱高效液相色譜法，是一種在檢驗(yàn)藥物殘留中非常常見的檢驗(yàn)方法，HPLC法的檢測原理為，當(dāng)流動相中各組通過固定相時(shí)，由于與固定相的相互作用（如吸附、分布、排斥、親和等）的分子大小和作用強(qiáng)度不同，在固定相中的保留時(shí)間也不同，因此從固定相連續(xù)流出。

2.2 HPLC法在動物源性食品藥物殘留檢測中的應(yīng)用

本文以獸藥的殘留檢驗(yàn)為例進(jìn)行分析，為了方便研究，以四種具有代表性的動物源性食品為基質(zhì)檢驗(yàn)。檢驗(yàn)為肉類及肉制品，分別為鮮肉（牛肉、豬肉）;肉干（豬肉脯、牛肉干）;火腿腸、風(fēng)干類香腸。以分散固相萃取結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測。檢測之前需要準(zhǔn)確稱取2.50克均質(zhì)樣品，放入50毫升塑料離心管中加入3毫升水渦旋混合，時(shí)間為1分鐘，進(jìn)行檢驗(yàn)前的預(yù)處理。

2.2.1 樣品處理

（1）鮮肉制品

①渦旋混合。加入5毫升5%（v/v）甲酸乙腈，渦旋混合1分鐘，超聲提取10分鐘;

②加入4克萬達(dá)柏QuEChERS多種動物殘?jiān)崛≡噭瑒×覔u動1分鐘，在10℃條件下，以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘;

③將1毫升上清液轉(zhuǎn)移至萬達(dá)帕克QuEChERS多動物殘余物純化試劑中，渦旋混合1分鐘，以12000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心5分鐘。

④上清液通過0.22微米微孔濾膜過濾，濾液通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析。

（2）干肉制品

以下步驟同鮮肉制品檢驗(yàn)操作。

2.2.2 色譜分析

為了保證HPLC檢測的準(zhǔn)確性，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置色譜條件，具體指標(biāo)見表1。

2.2.3 質(zhì)譜分析

為了保證HPLC檢測的準(zhǔn)確性，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置質(zhì)譜條件，具體指標(biāo)見表2。

2.2.4 樣品分析

利用HPLC法檢測出來的數(shù)據(jù)，在一定的程度上謹(jǐn)代表大致的樣品性質(zhì)，檢測結(jié)果僅供參考，尤其是大批貨物，檢驗(yàn)結(jié)果不做準(zhǔn)確性研究。不同的動物源性食品按照其是基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，如果用該方法篩選出目標(biāo)化合物，那么就需要加入相應(yīng)的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線，做到準(zhǔn)確的定量計(jì)算。

3、結(jié)語

總而言之，HPLC方法靈敏度高，檢測限制低，該方法采用代表性矩陣匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線定量計(jì)算，不會對樣品中的危險(xiǎn)物質(zhì)監(jiān)測造成假陰性結(jié)果，因此保證了比較高的檢測準(zhǔn)確率。同時(shí)，HPLC法的整體檢測時(shí)間短，非常適用于海關(guān)的動物源性食品藥物檢測。因此在實(shí)際的工作中該方法的應(yīng)用也是非常廣泛。但是基于現(xiàn)實(shí)的考慮，目前還缺少一套完善的殘留藥物檢測標(biāo)準(zhǔn)，這需要在未來的工作中不斷落實(shí)完善。

參考文獻(xiàn)

[1]祝海珍.HPLC法測定動物肝臟中維生素A含量的不確定度評定[J].食品研究與開發(fā)，2018，39（07）：160-165.

[2]徐容.高效液相色譜法和生物效價(jià)測定法在縮宮素注射劑質(zhì)量控制中的對照研究[J].安徽醫(yī)藥，2016，20（10）：1868-1871.