DC-CIK免疫療法聯(lián)合放化療治療中晚期非小細(xì)胞肺癌療效觀察

陸婉玲，李小龍，黨亞正，趙宏亮，程才，喬松

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者確診時(shí)多已為中晚期，錯(cuò)過了手術(shù)根治治療的最佳時(shí)機(jī)，放化療為其主要治療手段[1]。雖然放化療治療有一定的療效，可以延長患者生存期，但同時(shí)也降低了患者機(jī)體免疫功能，帶來諸多不良反應(yīng)，對患者的生活質(zhì)量影響較大[2]。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步及對腫瘤免疫研究的深入，樹突狀細(xì)胞誘發(fā)的殺傷細(xì)胞(DC-CIK)治療為一種腫瘤生物免疫治療，以其抗腫瘤生長能力強(qiáng)和不良反應(yīng)少的特點(diǎn)逐漸應(yīng)用到腫瘤疾病的聯(lián)合治療中[3]。現(xiàn)以DC-CIK免疫療法聯(lián)合放化療治療中晚期NSCLC，并觀察治療前后患者免疫功能水平和生活質(zhì)量的變化，旨在更進(jìn)一步全面分析該方案在中晚期NSCLC中的應(yīng)用效果，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年4月—2018年4月中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)986醫(yī)院腫瘤科診治的中晚期NSCLC患者69例為研究對象，按隨機(jī)數(shù)字表法分成2組，對照組35例，研究組34例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬知情同意并簽署同意書。

1.2 選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①處于ⅢA～Ⅳ臨床分期；②有可測量病灶；③預(yù)計(jì)生存期在6個(gè)月以上；④KPS評分[4]在60分以上。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有不可控制的傳染病；②處于妊娠期或哺乳期；③內(nèi)臟器官嚴(yán)重功能不全者；④對生物免疫制劑過敏及正在使用者；⑤精神異常，無自主意識(shí)者。

1.3 治療方法 對照組：行同步放化療治療，使用直線加速器(PRECISE型，瑞士醫(yī)科達(dá)公司生產(chǎn))6mV-X 線三維適形照射技術(shù)進(jìn)行放療，2 Gy/d，5次/周，總照射劑量控制在50～60 Gy。化療前給予抗過敏和預(yù)防性止吐處理，均行DP方案化療：第1天給予多西他賽(山東齊魯制藥有限公司生產(chǎn))75 mg/m2靜脈滴注，第1～4天給予順鉑(山東齊魯制藥有限公司生產(chǎn))75 mg/m2靜脈滴注，28 d為1周期，與放療同步治療2周期，放療結(jié)束后間隔4周，再繼續(xù)進(jìn)行4周期的DP方案鞏固化療。研究組：行同步放化療聯(lián)合DC-CIK免疫療法治療。放化療方法同對照組，化療前抽取患者外周血100 ml(抗凝)，采用血細(xì)胞分離機(jī)分離采集單個(gè)核細(xì)胞行DC和CIK培養(yǎng)[5]，培養(yǎng)7 d收集成熟的DC和CIK，按1∶100混合再培養(yǎng)7 d，期間進(jìn)行無菌試驗(yàn)檢測，確認(rèn)結(jié)果為陰性，且保證細(xì)胞存活率在95%以上。從第2周期化療開始DC-CIK治療，于每次化療前2周進(jìn)行DC-CIK混合懸液(每次回輸1×109個(gè))靜脈回輸，共5次。

1.4 觀察指標(biāo)與方法

1.4.1 免疫功能相關(guān)指標(biāo)檢測：治療前和治療結(jié)束后，抽取患者外周血4 ml，抗凝，梯度離心獲取單個(gè)核細(xì)胞，分別加入相應(yīng)抗體混勻，避光孵育(15 min)和PBS液洗滌(2次)后重懸細(xì)胞于NovoCyte流式細(xì)胞儀檢測(上海然哲儀器設(shè)備有限公司)，分別檢測T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和NK細(xì)胞的表型和百分率。

1.4.2 生活質(zhì)量評分[7]：治療前和治療結(jié)束后，依據(jù)KPS評分標(biāo)準(zhǔn)對患者近期生活質(zhì)量進(jìn)行評價(jià)，KPS評分百分制，從正常(無癥狀)至死亡共10個(gè)分級，以100～0分計(jì)：改善，KPS評分升高≥10分；穩(wěn)定，KPS 評分升高或降低幅度<10分；惡化，KPS評分下降≥10分。提高率=改善率+穩(wěn)定率。

1.4.3 不良反應(yīng)發(fā)生情況：放療損傷依據(jù)美國放射治療腫瘤協(xié)作組對急性放射損傷的分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評價(jià)[8]；化療毒性反應(yīng)依據(jù)美國國立癌癥研究所常見不良反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)4.0版[9]進(jìn)行評價(jià)；生物免疫治療過程中和結(jié)束后觀察患者有無過敏、發(fā)熱等不良反應(yīng)。

1.5 近期療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 治療1個(gè)月后，CT檢查腫瘤病灶變化，采用實(shí)體瘤療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)[6]評價(jià)。完全緩解，病灶完全消失，未發(fā)現(xiàn)新病灶，持續(xù)4周以上時(shí)間；部分緩解，病灶最長徑總和減少30%以上，持續(xù)4周以上時(shí)間；疾病穩(wěn)定，病灶最長徑總和減少低于30%，或增加低于20%；疾病發(fā)展，病灶最長徑總和增加20%以上，或出現(xiàn)新病灶。以(完全緩解+部分緩解)/總例數(shù)×100%表示疾病治療有效率，以(完全緩解+部分緩解+疾病穩(wěn)定)/總例數(shù)×100%表示疾病治療控制率。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0軟件統(tǒng)計(jì)處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)或率(%)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，等級資料采用秩和檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組內(nèi)、組間比較分別采用配對t檢驗(yàn)和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組臨床資料比較 2組患者的性別、年齡、病程、病理類型和臨床分期等資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 2組患者臨床資料比較

2.2 2組近期療效比較 2組患者疾病治療控制率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，研究組治療總有效率明顯高于對照組(P<0.01)，見表2。

表2 2組患者近期療效比較 [例(%)]

2.3 2組免疫功能指標(biāo)比較 治療前2組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和NK細(xì)胞比例比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與治療前比較，治療后，對照組除CD4+/CD8+降低不明顯外(P>0.05)，其余指標(biāo)均降低(P<0.05)，而研究組各指標(biāo)均升高，且高于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 治療前后2組患者免疫功能各指標(biāo)比較

2.4 2組生活質(zhì)量比較 治療后，研究組生活質(zhì)量提高率為88.23%，高于對照組的57.14%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表4。

表4 2組患者治療后生活質(zhì)量比較 [例(%)]

2.5 2組不良反應(yīng)比較 不良反應(yīng)主要為發(fā)熱、粒細(xì)胞減少、放射性肺炎、胃腸道反應(yīng)和放射性食管炎。其中研究組發(fā)熱和粒細(xì)胞減少發(fā)生率低于對照組(P<0.01)，2組間放射性肺炎、胃腸道反應(yīng)、放射性食管炎發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)， 見表5。

表5 2組患者治療期間的不良反應(yīng)情況比較 [例(%)]

3 討 論

隨著腫瘤治療決策中對免疫學(xué)及分子生物學(xué)的深入研究，生物免疫治療已成為腫瘤治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，其中DC-CIK是最具發(fā)展前景的免疫細(xì)胞。生物免疫療法可有效殺死腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移和生長，且具有高效、不良反應(yīng)小等特點(diǎn)。DC-CIK細(xì)胞治療主要應(yīng)用疾病包括腎癌、胰腺癌、胃腸道腫瘤、乳腺癌和非小細(xì)胞肺癌等。以往研究發(fā)現(xiàn)，DC-CIK細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)后回輸患者體內(nèi)可提高體內(nèi)CD3、CD4和Th1等細(xì)胞因子水平[10]。CIK細(xì)胞免疫療法可清除殘余病灶，直接殺傷腫瘤細(xì)胞，不損害機(jī)體免疫系統(tǒng)，能改善患者生活質(zhì)量。

肺癌是最常見的惡性腫瘤，其中80%以上為NSCLC，其確診時(shí)的腫瘤分期較晚，且患者年齡偏高。放化療為失去手術(shù)指征和不愿手術(shù)治療的中晚期NSCLC患者主要治療手段，可有效控制疾病進(jìn)展，但同時(shí)會(huì)降低患者免疫功能，影響生活質(zhì)量。控制疾病進(jìn)展、減輕癥狀和提高生活質(zhì)量是中晚期腫瘤治療的主要目的[11]。鑒于此，本研究將DC-CIK免疫療法與放化療聯(lián)合用于中晚期NSCLC治療中，同時(shí)觀察了患者治療前后的免疫功能水平和生活質(zhì)量變化，旨在全面分析該方案治療中晚期NSCLC的臨床效果。

DC是功能強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，通過向初始T淋巴細(xì)胞提呈抗原，激活獲得性免疫系統(tǒng)[12]。CIK是人體外周血單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增出的異質(zhì)性細(xì)胞群體，兼具NK細(xì)胞非主要組織相容性復(fù)合體限制性殺傷腫瘤的優(yōu)點(diǎn)和T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗腫瘤活性，能通過自身的細(xì)胞毒作用殺傷腫瘤細(xì)胞，還可分泌多種細(xì)胞因子來殺傷腫瘤細(xì)胞[13]。兩者混合共培養(yǎng)后回輸至患者體內(nèi)，可促進(jìn)DC成熟，分泌共刺激分子與細(xì)胞因子，活化CIK，增加增殖倍數(shù)，提高對腫瘤細(xì)胞殺傷性；促進(jìn)抗原特異性T細(xì)胞增殖，發(fā)揮對腫瘤的長期免疫監(jiān)視作用。DC-CIK免疫療法在腎癌、胃癌、肝癌等惡性腫瘤疾病治療中均表現(xiàn)出較好的應(yīng)用效果[14-16]。

本研究肯定了同步放化療治療對NSCLC進(jìn)展控制的效果，也表明了DC-CIK免疫療法顯著的抗腫瘤作用。可能是由于DC-CIK具有較好的腫瘤細(xì)胞殺傷作用，聯(lián)合放化療可提高療效，且DC-CIK具有區(qū)別于放化療對腫瘤細(xì)胞的0級殺傷作用，能較好地清除放化療后的微小殘留病灶，進(jìn)一步提高治療效果。人體外周血淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+和NK細(xì)胞等是反映人體免疫功能的常用指標(biāo)，在腫瘤的形成、進(jìn)展中產(chǎn)生的可溶性免疫抑制因子會(huì)抑制CD4+形成，降低CD4+/CD8+比值和減少NK細(xì)胞[17]。本研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合DC-CIK免疫療法治療能提高患者機(jī)體免疫功能。對結(jié)果分析認(rèn)為DC-CIK啟動(dòng)了機(jī)體自身免疫并分泌各種細(xì)胞免疫因子，彌補(bǔ)了放化療對機(jī)體免疫功能的損傷。本研究對生活質(zhì)量和不良反應(yīng)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合DC-CIK免疫療法治療能明顯改善患者生活質(zhì)量，且安全性較高。可能是由于DC-CIK具有靶向殺傷腫瘤細(xì)胞不損傷正常細(xì)胞的特性，不會(huì)對骨髓造血和胃腸道造成傷害；另外對化療敏感性的提高，也一定程度降低了化療藥物的不良反應(yīng)。對患者生活質(zhì)量的改善，可能得益于臨床效果和機(jī)體免疫功能的提高，患者疾病癥狀減輕；DC-CIK分泌的多種因子具有一定的鎮(zhèn)痛和催眠作用，也有利于生活質(zhì)量的改善[18]。

綜上所述，放化療聯(lián)合DC-CIK免疫療法治療中晚期NSCLC的療效較好，能明顯提高患者的免疫功能，改善生活質(zhì)量。但本研究納入的病例數(shù)較少，未對患者遠(yuǎn)期的預(yù)后情況進(jìn)行隨訪。未來將擴(kuò)大樣本量，延長隨訪時(shí)間，作進(jìn)一步深入研究。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

陸婉玲、李小龍：設(shè)計(jì)研究方案，實(shí)施研究過程，論文撰寫和修改；黨亞正：提出研究思路，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)；趙宏亮：實(shí)施研究過程，資料搜集整理；程才、喬松：實(shí)施研究過程，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析