植物甾醇對加州鱸生長性能、形體指標、肌肉成分及肝臟生化指標的影響

龔紅，孫鳳剛，黃志毅，潘忠超，李志華，鄒勝龍

（廣東蔚萊生物科技有限公司，廣東 廣州 511400）

植物甾醇是一種存在于植物細胞中的天然活性成分，其結構與膽固醇類似，是合成維生素D3以及多種激素的前體物質，與許多生命活動直接相關。植物甾醇在常溫下為無臭無味的三萜類白色結晶粉末。目前，植物甾醇已被確認具有降低膽固醇、抗炎、退熱、抗癌等多種生理功能，廣泛應用于食品與保健品行業，深受消費者的青睞[1-3]。早在2008年，我國農業部就已經把植物甾醇列為飼料添加劑，2010年我國衛生部進一步批準其為新型資源食品[4]。近年來，大量研究報道，含植物甾醇的飼料添加劑適用于畜禽等動物，能夠加快動物生長速度而縮短生產周期，達到降低成本、提高產量的目的[5-7]。目前已有植物甾醇在羅非魚、羅氏沼蝦等水產動物中的應用研究，而在加州鱸養殖中的應用研究未見報道。本試驗通過在配合飼料中添加不同含量的植物甾醇，研究植物甾醇對加州鱸生長性能、形體指數及肝臟生化指標的影響，旨在探討加州鱸對配合飼料中植物甾醇的需求，以期為加州鱸的人工配合飼料的開發提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與分組

選取健康、平均體質量為（36.41±0.75）g的加州鱸540尾，隨機分為6組，每組3個重復，每個重復30 尾，分別飼喂含 0（對照組）、10、20、30、40 和 50 mg/kg植物甾醇的試驗飼料。

1.2 試驗飼糧

試驗基礎飼糧配方及營養成分表見表1。

1.3 飼養管理

根據水溫、溶氧、天氣和魚的攝食狀況，每天投喂兩次，魚進箱時浸洗消毒。試驗期間，自然光照，每天觀察魚的活動和健康狀況，追蹤記錄死亡和投飼量。定期排污和換水，飼養周期為60 d。

1.4 樣品采集與處理

試驗結束后，在各組中隨機取10尾加州鱸，用丁香酚麻醉，分別測定其體長、體質量，然后解剖稱取內臟重和肝臟重，同時進行肌肉和肝臟樣品的采集。取肝臟組織塊約1 g在4℃生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙吸干，稱重，放入勻漿玻璃管中，按比例（1 g樣品/10 mL生理鹽水）加入4℃生理鹽水，用玻璃勻漿機勻漿，制得樣品置于-80℃冰箱中以備分析。取兩側背肌，105℃烘干至恒重后將其粉碎，測定肌肉組成成分。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（風干基礎）

1.5測定指標及方法

1.5.1 生長性能的測定 試驗開始和結束時，統計每個養殖箱的加州鱸尾數并稱總重，稱重采樣前將魚體饑餓24 h，按下式計算增重率、蛋白質效率、飼料系數和成活率：

增重率（%）=100×（終末體質量-初始體質量）/初始體質量；

蛋白質效率（%）=100×（終末體質量-初始體質量）/（總投餌量×蛋白質含量）；

飼料系數=總投餌量/魚總增重量；

成活率（%）=100×終末尾數/初始尾數。

1.5.2 形體指標的測定 試驗結束后，解剖稱取內臟重和肝臟重，按下式計算臟體比、肝體比和肥滿度：

臟體比（%）=魚內臟重/魚體質量×100；

肝體比（%）=魚肝臟重/魚體質量×100；

魚體肥滿度（g/cm3）=魚體質量/魚體長3×100。

1.5.3 肌肉組成成分測定 加州鱸肌肉的粗蛋白質、粗脂肪、粗灰分和水分分別按照國標GB/T 6432—2018、GB/T6433—2006、GB/T6438—2007和GB/T6435—2014的方法進行測定。

表2 植物甾醇對加州鱸生長性能的影響

1.5.4 肝臟生化指標的測定 丙二醛、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶和堿性磷酸酶均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定。測定方法按照南京建成試劑盒使用說明。

1.6 數據統計

試驗數據經Excel初步統計，采用SPSS 18.0軟件進行方差分析，用Duncan’s法進行多重比較。以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準，結果以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 植物甾醇對加州鱸生長性能的影響

由表2所示，各添加組加州鱸的終末體質量、增重率和蛋白質效率均高于對照組，其中添加30、40和50 mk/kg植物甾醇組的加州鱸終末體質量、增重率和蛋白質效率顯著高于對照組（P＜0.05）；30、40、50 mg/kg植物甾醇組的飼料系數顯著低于對照組和10 mg/kg添加組（P＜0.05）；各添加組加州鱸的成活率與對照組相比有所提升，但差異不具統計學意義（P＞0.05）。

2.2 植物甾醇對加州鱸體形體指標和肌肉組成的影響

由表3所示，在加州鱸飼料中添加30、40和50 mg/kg植物甾醇顯著降低加州鱸的臟體比（P＜0.05），顯著提高了加州鱸的肥滿度（P＜0.05），添加20、30、40和50 mg/kg植物甾醇顯著降低加州鱸的肝體比（P＜0.05）。植物甾醇對加州鱸肌肉的水分、粗蛋白質和粗脂肪含量沒有顯著性影響（P＞0.05），但顯著提高了30、40和50 mg/kg組加州鱸的肌肉粗灰分含量（P＜0.05）。

表3 植物甾醇對加州鱸形體指標和肌肉組成的影響

2.3 植物甾醇對加州鱸肝臟生化指標的影響

由表4所示，與對照組相比，在加州鱸飼料中添加30、40和50 mg/kg植物甾醇顯著降低了加州鱸肝臟中丙二醛含量（P＜0.05），添加 20、30、40 和50 mg/kg植物甾醇組加州鱸肝臟的超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組（P＜0.05），飼料中添加植物甾醇對加州鱸肝臟中過氧化氫酶的活性無顯著影響（P＞0.05）。在加州鱸飼料中添加30、40和50 mg/kg植物甾醇，加州鱸肝臟中谷丙轉氨酶活性顯著降低（P＜0.05），堿性磷酸酶活性顯著升高（P＜0.05），20、30、40和50 mg/kg組的谷草轉氨酶活性顯著低于對照組和 10 mg/kg添加組（P＜0.05）。

表4 植物甾醇對加州鱸肝臟生理生化指標的影響

3 討論

3.1 植物甾醇對加州鱸生長性能的影響

早在20世紀八九十年代就有研究表明，植物甾醇能調節動物生長。Maitani等[8]研究發現植物甾醇能顯著改善應激大鼠的生長。近年來植物甾醇作為綠色天然飼料添加劑，廣泛應用在畜禽水產養殖中，提高動物生長性能。Naji等[9]研究發現，在肉雞飼料中添加75 mg/kg植物甾醇能顯著提高肉雞的體重和采食量。張嚴偉等[10]等亦報道，40、80 mg/kg植物甾醇的添加量可顯著提高團頭魴增重率及特定生長率，且40 mg/kg的添加量效果更佳。李偉等[11]在斷奶仔豬日糧中添加植物甾醇，發現植物甾醇可提高斷奶仔豬的生產性能，降低其料肉比。李志華等[12]在羅非魚基礎飼料中添加20、40 mg/kg植物甾醇顯著提高羅非魚的終末體質量、增重率、特定生長率，飼料系數也顯著降低。該試驗與前人研究一致，這可能是因為植物甾醇具有類激素的作用，能夠調節垂體和肝臟的功能，促進生長激素與胰島素樣生長因子IGF-1的分泌，促進動物的生長發育[13]，另外植物甾醇還能與生長激素、核糖核蛋白結合形成復合物，延長生長激素的作用時間，從而促進動物生長[14]。

3.2 植物甾醇對加州鱸肌肉成分和形體指標的影響

溫超等[15]研究表明，添加植物甾醇可降低伊莎褐蛋雞腹脂相對質量。羅有文等[16]曾報道，向肥育豬日糧中添加植物甾醇，在降低皮膚比率的同時顯著提高瘦肉率，并具有提高平均日增質量和胴體瘦肉率的趨勢。但顧莞婷等[17]卻發現，添加植物甾醇組的肉鴨肌間脂肪含量要顯著高于對照組，同時胸肌率也有所上升。張嚴偉等[10]研究也表明，植物甾醇提高了團頭魴肌肉中粗脂肪含量。本試驗中，添加不同水平的植物甾醇對加州鱸肌肉的水分、粗蛋白和粗脂肪含量均沒有顯著性影響，但顯著提高了肌肉的粗灰分含量。植物甾醇對動物體成分影響的研究結論不一致，這可能跟品種、日齡、飼料和養殖環境有關。

該試驗飼料中，添加植物甾醇的試驗組加州鱸肥滿度較對照組提高了5.47%~10.19%；肝體比較對照組降低7.85%~16.11%。這說明飼料中添加植物甾醇可改善加州鱸的營養狀況，減少內臟能量的沉積。同時臟體比下降，增加了加州鱸的可食部分，提高經濟效益。

3.3 植物甾醇對加州鱸肝臟生化指標的影響

植物甾醇在動物體內的抗氧化作用主要體現在兩個方面：一是抗脂質過氧化，二是提高抗氧化酶活性[18，19]。SOD和CAT是動物體內兩種重要的抗氧化酶，有較強的清除自由基能力，丙二醛MDA是脂質過氧化物的最終產物，其濃度則可以間接反映出機體脂質過氧化的程度。本試驗中，隨著飼料中植物甾醇添加量的上升，加州鱸肝臟中的丙二醛含量明顯降低。這表明飼料中添加植物甾醇能有效降低加州鱸機體內質過氧化反應，降低機體內丙二醛水平。吳先華等[20]在育肥豬，顧婉婷[17]在肉鴨，令狐克川等[7]在中華絨螯蟹研究中，均發現植物甾醇對相關抗氧化酶的活性有顯著提高的作用。但在本試驗中，植物甾醇顯著提高加州鱸肝臟超氧化物歧化酶SOD的活性，但對過氧化氫酶CAT的活性卻沒有顯著性影響。

動物肝臟中的谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性會保持在一定范圍內。當肝臟出現病變時，谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性就超過正常水平，因此這兩種酶常作為魚體肝功能的指標[21]。堿性磷酸酶與磷酸基團的轉移和鈣磷代謝關系密切。該試驗中，飼料中植物甾醇的添加使得加州鱸肝臟谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性顯著下降，堿性磷酸酶活性顯著提高，這也可能說明植物甾醇對魚類肝臟健康和促進生長有積極作用。

4 結論

飼料中添加植物甾醇能提高加州鱸生長性能，降低其飼料系數，能提高加州鱸肥滿度，并增強其抗氧化能力。為了獲得最佳的養殖效益，建議加州鱸飼料中植物甾醇的添加水平應為30 mg/kg以上。