血清P53、PCNA抗體檢測在胃癌患者中的應用價值

李利

（山東省萊西市店埠鎮衛生院外科，山東 萊西）

0 引言

胃癌為起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，患病率在我國人群消化系統惡性腫瘤疾病中位居首位，多見于40-70歲的人群，具有治療難度大、復發率高、病死率高的特點[1]。手術治療長期以來一直為我國臨床治療胃癌的常用方法，也是最有效的方法，但并不是所有胃癌患者均具有接受手術治療的機會，主要是因為胃癌發病早期的臨床癥狀不明顯和缺乏特征，確診時疾病多已發展至中晚期[2，3]。因此，有必要探索對胃癌臨床診治具有輔助價值的指標，以進一步提高疾病的早期確診率，指導疾病治療的及時開展。

1 對象與方法

1.1 研究對象

研究對象為2018年9月至2020年2月在本院確診為胃癌的58例患者和同期來本院接受體檢的60例健康體檢者。將胃癌患者設為病患組，本組患者均具有手術治療指征，且均接受手術治療，其中男33例，女25例，年齡38-76歲，平均（57.85±3.29）歲，腫瘤TNM分期：Ⅰ期17例；Ⅱ期25例；Ⅲ期16例。將健康體檢者設為參照組，其中男32例，女28例，年齡35-75歲，平均（57.91±3.18）歲。對病患組和參照組的性別比例和年齡進行統計分析，結果顯示差異均無統計學意義（P＞0.05）。研究對象均為自愿參與。

1.2 方法

病患組術前、術后1周各檢測一次血清P53、PCNA抗體，參照組僅檢測一次血清P53、PCNA抗體，兩種指標的檢測方法均為間接酶聯免疫吸附試驗，采集研究對象肘靜脈血3ml，離心機分離血清，保存在-80℃的冰箱中待測。血清P53和血清PCNA抗體檢測試劑盒購自上海撫生實業有限公司，酶標儀品牌為邁瑞（MR系列）。

1.2.1 血清P53檢測

按1∶5的比例使用稀釋液稀釋血液標本，每孔中加入50μl，且各孔均做復孔，在37℃的溫度中溫育30min，甩出孔內液體后，于每孔中加滿洗滌液，震蕩洗滌30s，棄洗滌液，使用吸水紙拍干，重復進行上述操作4次。于每個反應孔中加入50μl酶標工作液，再次放置在37℃的溫度中溫育30min，甩出孔內液體后，再次加滿洗滌液進行洗滌、拍干。向反應孔中加入顯色劑A液50μl，再加入顯色劑B液50μl，避光顯色15min，再向每個反應孔中加入終止液，終止反應，于450nm波長測量各個反應孔的吸光度。

1.2.2 血清PCNA抗體檢測

血液標本稀釋方法及布孔均同血清P53，在37℃的溫度中溫育120min，甩出孔內液體后，在每孔中加入100μl檢測溶液A，在37℃的溫度中反應1h，棄孔內液體，洗板3次，甩干后再向每孔中加入100μl檢測溶液B，繼續放置在37℃的溫度中反應1h，棄孔內液體，洗板5次后甩干。向每孔中加入90μl底物溶液，37℃的溫度中避光顯色，后續處理同血清P53。

1.3 觀察指標

本研究的觀察指標包括：（1）病患組、參照組的血清P53、PCNA抗體檢測結果；（2）病患組中不同腫瘤分期患者的血清P53、PCNA抗體檢測結果；（3）病患組術前、術后1周的血清P53、PCNA抗體檢測結果。

1.4 統計學方法

統計學軟件：SPSS22.0；計量資料的差異進行LSD-t檢驗，計數資料的差異進行χ2檢驗，P＜0.05為判定差異存在統計學意義的檢驗值。

2 結果

2.1 病患組、參照組的血清P53、PCNA抗體檢測結果比較

兩組血清P53、PCNA抗體陽性率的組間差異均存在統計學意義（P＜0.05），病患組均較參照組高，見表1。

表1 病患組、參照組的血清P53、PCNA抗體的陽性率比較[n（%）]

2.2 病患組中不同腫瘤分期患者的血清P53、PCNA抗體檢測結果比較

病患組中腫瘤分期為Ⅲ期患者的血清P53、PCNA抗體陽性率均最高，腫瘤分期為Ⅰ期患者的血清P53、PCNA抗體陽性率均最低，不同腫瘤分期患者的上述指標差異均存在統計學意義（P＜0.05），見表 2。

表2 病患組中不同腫瘤分期患者的血清P53、PCNA抗體的陽性率比較[n（%）]

2.3 病患組術前、術后1周的血清P53、PCNA抗體檢測結果比較

病患組術后1周的血清P53、PCNA抗體陽性率均較術前低（P＜0.05），見表 3。

表3 病患組術前、術后1周的血清P53、PCNA抗體陽性率比較[n（%）]

3 討論

血清P53和血清PCNA抗體與各種惡性腫瘤疾病的相關性近年來逐漸受到廣大研究學者的關注。本研究主要探討上述兩指標檢測在胃癌臨床診斷和治療中的應用價值，結果證實了血清P53、PCNA抗體的陽性表達與胃癌的發生和發展均存在相關性。

早期已有較多研究證實，血清P53對食管癌、乳腺癌等惡性腫瘤疾病的發生和發展均具有較明顯的促進作用，具體機制為P53基因能夠修復細胞DNA損傷，保護腫瘤細胞，促進腫瘤細胞增殖[4，5]。本研究發現，P53基因對胃癌腫瘤細胞損傷也具有修復作用，故也會出現陽性表達率上升的狀態。血清PCNA抗體是一種僅在增殖細胞內合成和表達的多肽，當體內有明顯的細胞增殖時，該抗體的表達也會明顯增加[6]。胃癌的發生和發展中，腫瘤細胞增殖是必然的過程，故該抗體的陽性表達率也會明顯上升。

綜上所述，血清P53、PCNA抗體的檢測結果能夠為臨床胃癌的診斷、病情及治療反應評估提供一定程度的輔助價值，兩指標均可作為臨床診治胃癌的必要檢測指標[7,8]。