布魯氏菌IV型分泌系統效應蛋白BPE043的功能和致病機制研究

羅文博，付夢姣，焦 俊，馮俊霞，盧志宇，胡雪媛，溫博海，趙曉冬，熊小路，周冬生，柯躍華

布魯氏菌病是由布魯氏菌(Brucella)侵入機體造成的一種人獸共患病，以流產和發熱為特征，對人和動物的生命健康造成了嚴重威脅[1]。布魯氏菌為兼性的革蘭氏陰性菌[2-4]，毒力主要表現為胞內寄生[5]。布魯氏菌可以通過形成布魯氏菌泡(BCV)來避免被溶酶體降解，從而在胞內生存和復制[6]，不會造成細胞的程序性死亡[7]。

布魯氏菌IV型分泌系統(Type IV secretion syster ms，T4SS)是貫穿細胞壁和外膜的，由12個基因編碼的蛋白組成的復合物[8]，是布魯氏菌致病的主要毒力因子。T4SS主要通過分泌蛋白來干擾宿主細胞的正常功能。其分泌的效應蛋白近些年被不斷發現，目前被報道的共有15種[9]，大多數效應蛋白的功能和作用機制未知，BPE043是其中之一。本文研究的BPE043保守區域為環狀核苷酸結合結構域[10]。其他功能有待研究。

Rab是小G蛋白超家族中最大的旁支，通常被認為是信號調控的分子開關，在調節囊泡的形成、?？亢娃D移方面起調節作用[11]。Rab蛋白在布魯氏菌感染細胞后形成的BCV中被發現[12]。本研究以布魯氏菌野生株104為起始菌株，構建了BPE 043基因的缺失株，通過進行生長曲線測定、小鼠感染能力測定以及篩選有可能與BPE043有相互作用的宿主蛋白等，初步研究了BPE043蛋白的功能，為進一步研究BPE043在布魯氏菌感染過程中的作用機制奠定了基礎。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 菌株 羊種布魯氏菌104株由中國人民解放軍疾病預防控制中心保存，布魯氏菌BPE 043基因突變株由實驗室構建。……