誘導仙茅產生愈傷組織及不定芽的研究

羅春梅，劉愛民

（楚雄技師學院，云南楚雄675000）

仙茅是重要的具有彝族地方特色的藥用植物，是國家“十五”科技攻關課題《藥材規范化種植技術指導中心建設》中的藥材。仙茅為石蒜科多年生草本植物仙茅的根莖，藥用歷史悠久，歷代文獻均有記載。目前尚未形成規模種植，主要依靠野生資源，因無序采挖，大量資源瀕臨枯竭，藥材供不應求，價格高 （市場收購價每千克20～25元），市場需求量大。開展仙茅組織培養技術研究，既可以保護仙茅的野生資源量，又可為仙茅的大規模種植提供大量優質種苗，實現仙茅資源的合理開發利用，使其為天然藥物產業發揮最大的經濟效益。

1 材料與方法

1.1 供試材料

為經過1-2年人工種植的仙茅，來自楚雄州農業學校的藥園。培養基為瓊脂0.9%，蔗糖3%。滅菌前pH值5.8～6.8，滅菌溫度121℃，培養溫度（20±2）℃，每天光照時間14 h。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同激素配比誘導愈傷組織

仙茅葉基部為外植體，經清洗消毒后，分別接種于BA/NAA不同激素配比的培養基上，誘導外植體形成愈傷組織。設BA濃度分別為0.5 mg/L、1.5 mg/L、2.5 mg/L、3.5 mg/L，NAA濃度分別為1.0 mg/L、2.0 mg/L，共8個處理。

培養基均以MS為基本培養基，加活性炭2 mg/L，每個處理接種5瓶，每瓶接種4塊，每個處理20塊外植體，培養30 d時觀察。

1.2.2 不同激素配比誘導愈傷組織分化不定芽

將仙茅的愈傷組織切割成同等大小，分別接種在BA/NAA、KT/IBA4種不同配比的培養基上，誘導愈傷組織分化成不定芽。設BA濃度分別為3.0 mg/L、5.0 mg/L，NAA濃度分別為0.5 mg/L、1.5 mg/L，共2個組合，KT濃度分別為3.0 mg/L、5.0 mg/L，IBA濃度分別為0.5 mg/L、1.5 mg/L，共2個組合。

培養基均以MS為基本培養基，加活性炭2 mg/L，每個處理接種5瓶，每瓶接種4塊，每個處理20塊外植體，培養30 d時觀察。

2 .結果與分析

2.1 BA/NAA不同激素配比誘導愈傷組織形成的影響

由表1知，仙茅的葉基部在BA濃度為1.5～3.5 mg/L，均能誘導出愈傷組織，隨著BA和NAA濃度的增加，愈傷組織誘導率也隨之升高，出愈時間顯著提前。當細胞分裂素BA濃度達3.5 mg/L時，生長素濃度增大對愈傷組織形成有積極作用，以MS+ BA3.5 mg/L+ NAA 2.0 mg/L+活性炭2 mg/L培養基誘導率達80%，出愈量最大。

表1 不同激素配比誘導愈傷組織形成比較（活性炭2 mg/L+MS培養基）

表2 不同激素配比誘導不定芽比較（活性炭2mg/L+MS培養基）

2.2 BA/NAA、KT/IBA不同激素配比形成不定芽的影響

由表2知，BA/NAA、KT/IBA4種激素配比均能使仙茅的愈傷組織分化出不定芽，分化率100%，其中以MS+ BA5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L+活性炭2 mg/L的培養基誘導出芽時間最早，苗色濃綠，長勢最快。

3 結 論

試驗得出，誘導仙茅愈傷組織最佳培養基為MS+ BA3.5 mg/L+ NAA 2.0 mg/L+活性炭2mg/L;不定芽分化最佳培養基為MS+ BA5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L +活性炭2 mg/L。

在植物組織培養中，細胞分裂素KT、BA具有促進芽生長的作用，生長素NAA、IBA具有促進根生長的作用，細胞分裂素與生長素的比值高低對外植體的發展方向起著決定性作用。

在本試驗中發現，使用BA與KT誘導仙茅葉基部愈傷組織分化不定芽，仙茅對2種細胞分裂素的敏感程度差異不明顯，均能100%分化形成不定芽，只是BA更有利于促進葉綠素的合成，苗色更濃綠。