感染性疾病患者血液中紅細胞DARC 表達特點及與WBC 等實驗室指標的相關性

張靜，王素玲，金哲

（河南科技大學第一附屬醫院提血隊，河南 洛陽471000）

感染性疾病主要是人體通過不同途徑感染致病微生物（如真菌、細菌、支原體、衣原體、螺旋體、寄生蟲和立克次體等）后引起的疾病[1]，病種范圍廣，危害大。 血液中多數免疫復合物利用紅細胞的粘附作用轉移到內皮系統而后被吞噬細胞清除或被T 細胞殺滅，在血液免疫中，紅細胞免疫占主要作用[2-4]。 紅細胞免疫中補體受體1 和達菲抗原趨化因子比較重要，前者具有免疫粘附作用。 紅細胞膜上DARC 受體是能在體外誘導表達的固有免疫分子, 達菲抗原趨化因子受體和白細胞介素-8 呈高表達狀態,但白細胞介素-10 并無明顯表達[5,6]。為探究感染性疾病患者血液中紅細胞達菲抗原趨化因子受體表達與WBC 等實驗指標的相關性，本研究對我院收治感染性疾病患者進行血液數據研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年2 月-2017 年8 月在我院接受治療的感染性疾病患者作為觀察對象。納入標準：⑴年齡≥18 周歲；⑵經實驗室等檢查確診為感染性疾病者；⑶無其他系統嚴重疾病；排除標準： ⑴臨床資料不全者； ⑵合并免疫功能障礙者。 根據納入排除標準共納入病例數80 例，其中男45 例，女35 例，年齡38~67 歲，平均50.38±3.76歲；對照組納入排除標準：年齡≥18 周歲；無感染性疾病；無嚴重基礎疾病者，共納入80 例，其中男40 例，女40 例，年齡40~69 歲，平均50.41±4.08歲。 兩組研究對象年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義，具有可比性。 本項研究經醫院倫理委員會評審通過，且所有患者均知情同意。

1.2 方法 感染性疾病患者空腹取靜脈血10ml，抗凝并離心，從 紅細胞層中吸取紅細胞100pl，并利用0.01mol/L PBS 稀釋, 分為同性實驗管和對照管兩組進行分子測定, 加入相應試劑后避光反應40min,并加入800pl PBS，搖勻，紅細胞懸液進行離心，棄上清，沉淀加PBS 后重懸紅細胞，避光進行上機測試。

1.3 評價指標 觀察兩組紅細胞DARC 表達情況、WBC、中性粒細胞比值、細胞因子水平的差異，并分析感染性疾病患者血液中紅細胞DARC 表達情況與WBC、中性粒細胞比值、細胞因子水平的相關性。

1.4 統計學處理 數據錄入后， 采用SPSS 11.5 軟件進行分析。 計數和計量資料分別采用例和均數±標準差表示。 兩組紅細胞DARC 表達情況、WBC、中性粒細胞比值、細胞因子水平的比較采用t 檢驗進行分析，采用Pearson 相關分析法分析感染性疾病患者血液中紅細胞DARC 表達情況與WBC、中性粒細胞比值、細胞因子水平的相關性。 P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組紅細胞DARC、WBC、 中性粒細胞比值的比較 觀察組患者的紅細胞DARC 表達水平和LY低 于 對 照 組 （t=6.658、7.718，P<0.001），NEU 和WBC 水 平 高 于 對 照 組 （t=-17.376、-20.873，P<0.001）。 見表1。

表1 兩組紅細胞DARC、WBC、中性粒細胞比值的比較

2.2 兩組細胞因子水平的比較 觀察組患者的IL-6、IL-8、hs-CRP 和TNF-α 水平高于對照組 （t=-46.197、-37.567、-17.550、-28.535，P<0.001）。 見表2。

表2 兩組細胞因子水平的比較

2.3 感染性疾病患者紅細胞DARC 與WBC、 中性粒細胞比值、細胞因子的相關性 感染性疾病患者的紅細胞DARC 表達水平與LY 水平正相關 （r=0.498、P=0.012）， 與NEU、WBC、IL-6、IL-8、hs-CRP 和TNF-α 水平負相關 （r=-0.532、-0.517、-0.497、 -0.455、 -0.507、 -0.468，P =0.001、0.035、0.009、0.016、0.003、0.027）。 見表3。

3 討論

感染性疾病是指由真菌、細菌、支原體、衣原體等致病微生物利用不同途徑進入人體后感染誘發的疾病[7]，病種廣泛，危害性高。 病原微生物侵入生物體后繁殖并大量釋放有害因子,隨著血液循環至全身，誘發全身性炎癥反應綜合征，破壞機體臟器功能。 孫乃紅等[8]研究發現，感染性疾病產生后，血小板產生量減少，且消耗增加。 血小板減少是主要的感染因素，機體血小板減少后越易感染。 本研究認為肺炎是最為常見的感染性疾病[9]，其次為敗血癥。 感染性疾病患者常見的臨床癥狀有低鈣、貧血、心肌損傷、呼吸衰竭、低血糖癥以及顱內出血等[10]。表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌以及溶血性葡萄球菌是感染性疾病的常見致病菌。

表3 感染性疾病患者紅細胞DARC 表達與WBC、中性粒細胞比值、細胞因子的相關性

TNF-α 和IL-8 均為重要的炎癥細胞因子。IL-8 是來源于巨噬細胞、單核細胞、皮膚成纖維細胞、 骨肉瘤細胞以及T 細胞的多源性細胞因子[11]，其中單核細胞含量最為豐富。 TNF-α 是能夠直接誘發腫瘤細胞死亡,僅來源于單核巨噬細胞的炎癥介質[12]。 兩者均能影響單核巨噬細胞功能的變化。巨噬細胞是具有吞噬異物功能的非特異性免疫炎癥細胞，是機體較為重要的炎癥效應細胞，且是能分泌眾多炎癥因子(如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α 和IFN 等)的分泌細胞。

紅細胞上含有廣譜趨化因子受體,即達菲趨化因子受體,可通過Fy6 單體熒光免疫流式細胞儀測定法[13]，在針對全血進行的實驗檢測中，癌細胞可激活DARC 產生病變。 DARC 分布廣泛，多數分布于紅細胞，少數存在于粒細胞和淋巴細胞，是IL-8的受體。 IL-8 受到細胞激活的免疫反應刺激后被大量釋放，DARC 可大量吸附IL-8,封閉Fy6 受體，使其抗體不能與DACR 相應接受點結合,因此紅細胞的Fy6 平均熒光強度顯著降低,由此說明紅細胞調控白細胞免疫反應作用明顯,能調控白細胞生成并分泌IL-8。

本研究根據各組血細胞分組激活實驗分析，觀察組患者的紅細胞DARC 熒光表達水平低于對照組，中性粒細胞和淋巴細胞高于對照組，提示紅細胞DACR 受體與Fy6 結合較少,且觀察組患者的IL-6、IL-8、hs-CRP 和TNF-α 水平均高于對照組，說明DACR 是由淋巴細胞和粒細胞產生的感染性疾病相關因子，也與吳蔚等[14-16]研究認為感染性疾病IL-8 和IL-6含量上升而Fy6 表達數量降低結果相符。 因此本研究認為紅細胞DARC 含量可作為是否產生感染性疾病的重要測評指標,患者的中性粒細胞和淋巴細胞含量升高,而DARC 含量降低的情況下，為感染性疾病的可能性較大。 本研究的創新性在于對感染性疾病患者進行總體性數據分析， 得出感染性患者感染類型不同，但相關作用因子差異較小。

綜上所述,本研究針對感染性疾病患者進行血液紅細胞DACR 表達水平測定和血液常規檢查，判定其與炎癥因子結合能力相關,可作為臨床診斷感染性疾病的重要指標。