清創(chuàng)生液體敷料抑菌活性的研究

馬敏，楊朝雪，張春陽(yáng)，侯法利，范建立

（河南承東生物科技有限公司，河南 鄭州）

0 引言

清創(chuàng)生產(chǎn)品為本公司自主研發(fā)的一款針對(duì)表面創(chuàng)傷的液體敷料。創(chuàng)傷主要包括皮膚和黏膜創(chuàng)面損傷，常見(jiàn)的人體皮膚損傷有燒燙傷、急慢性潰瘍、機(jī)械劃傷、手術(shù)傷口等。清創(chuàng)生含有陽(yáng)離子表面活性劑-奧替尼啶，已被多個(gè)歐洲國(guó)家批準(zhǔn)作為皮膚、粘膜和傷口的抗菌劑，其不會(huì)對(duì)人體上皮和傷口組織產(chǎn)生不利影響[1]，使用起來(lái)更安全，擴(kuò)大了清創(chuàng)生的應(yīng)用范圍，在口腔科、皮膚科、外科等多個(gè)科室均可使用。本研究對(duì)清創(chuàng)生的抑菌活性進(jìn)行了研究，報(bào)告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器

FA2004 電子天平，上海津平設(shè)備儀器有限公司；XFH-30CA 電熱式壓力蒸汽滅菌鍋，浙江新豐醫(yī)療器械有限公司；BCC-1100112-X 生物安全柜，濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司；SHP-80 生化培養(yǎng)箱，北京中興偉業(yè)儀器有限公司；XK96-A 快速混勻器，江蘇新康醫(yī)療器械有限公司。

1.2 材料

胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）均購(gòu)自北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

大 腸 埃 希 菌（Escherichia Coli）[CMCC（B）44102]、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus Aureus）[CMCC（B）26003]、白色念珠菌（Candida Albicans）[CMCC（F）98001] 來(lái)源于北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司；銅綠假單胞菌（Pseudomonas Seruginosa）[CMCC（B）10104]、枯 草 芽 孢 桿 菌（Bacillus Subtilis）[CMCC（B）63501]來(lái)源于上海魯微科技有限公司。

2 方法

2.1 菌液的制備

取適量經(jīng)34 ℃培養(yǎng)24 h 的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌培養(yǎng)物接入1 mL 0.9% 無(wú)菌NaCl 溶液（以下簡(jiǎn)稱溶劑）中，用溶劑繼續(xù)稀釋100 倍，制成5105～4.5106 cfu/mL 的菌液，備用。

2.2 菌液與樣品作用

取樣品5 mL 和對(duì)照液（無(wú)菌水）5 mL 各5 瓶，取上述制備好的菌液，分別在每個(gè)樣品和對(duì)照液中滴加100 μL，均勻混合，開(kāi)始計(jì)時(shí)，作用20 min。

2.3 作用后菌液的稀釋與涂布

將作用后的菌液用無(wú)菌水進(jìn)行稀釋，分別取稀釋后的菌液0.25 mL，均勻涂布在TSA（大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和枯草芽孢桿菌）或SDA（白色念珠菌）平板上。TSA 平板置于34 ℃培養(yǎng)2 d，SDA 平板置于25 ℃培養(yǎng)3 d，對(duì)菌落計(jì)數(shù)并計(jì)算抑菌率。

2.4 計(jì)算抑菌率

抑菌率為50%～90%，產(chǎn)品有抑菌作用；抑菌率≥90%，產(chǎn)品有較強(qiáng)的抑菌作用。

3 結(jié)果

表1 顯示，清創(chuàng)生組與對(duì)照組相比較，清創(chuàng)生對(duì)大腸埃希菌的抑菌率＞99.9%，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌率＞99.9%，對(duì)銅綠假單胞菌的抑菌率＞99.9%，對(duì)枯草芽孢桿菌的抑菌率＞99.9%，對(duì)白色念珠菌＞99.9%，說(shuō)明清創(chuàng)生對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌均有較強(qiáng)的抑菌作用。

表1 清創(chuàng)生抑菌活性測(cè)試結(jié)果（n, %）

3 討論

清創(chuàng)生通過(guò)在創(chuàng)面表面形成保護(hù)層，起物理屏障作用，對(duì)創(chuàng)面有直接的表面性作用。清創(chuàng)生含有一種新型的陽(yáng)離子表面活性劑-奧替尼啶，是用于皮膚、粘膜和傷口的特殊凈化劑。研究表明，奧替尼啶對(duì)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)具有較強(qiáng)的吸附和相互作用，從而對(duì)G+菌、G-菌、衣原體、支原體和真菌均有較強(qiáng)的抗菌作用[2-5]。Assadian O 等在傷口護(hù)理雜志：奧替尼啶的生物學(xué)特性和臨床功效中研究表明，奧替尼啶在pH 值1.6～12.2，分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，抗菌效果不受傷口pH變化影響[6]。本研究結(jié)果表明清創(chuàng)生對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌均有較強(qiáng)的抑菌性活性。

綜上所述，清創(chuàng)生具有廣譜的抗菌活性，其作用機(jī)理：吸附微生物細(xì)胞過(guò)程中能夠和細(xì)胞壁多糖結(jié)構(gòu)及細(xì)胞膜的生物酶系統(tǒng)發(fā)生作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。