食品微生物檢驗菌落總數測定方法的效果分析

□ 楊曉忠 麗江市疾病預防控制中心

目前，我國食品安全問題日益嚴峻，對食品安全的監管力度日益增強，其中食品微生物檢驗能夠有效保證食品安全。以往主要采取測試紙片法以及技術瓊脂培養法，然而在具體應用當中，容易引發細菌菌落混淆的現象，對其總數檢測較為不利，極有可能出現較大偏差[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本疾控中心接收的食品樣品，一共有220份。

1.2 方法

1.2.1 平板菌落計數法

在無菌狀態之下取出食品樣品25 g，裝入到含有225 mL生理鹽水的錐形瓶當中，充分搖晃均勻，得到1∶10的樣品菌液，采取無菌吸管抽取1∶10樣品均液1 mL緩慢注入到含有9 mL的生理鹽水試管當中，同時采取以上方法制取并抽取1∶1 000以及1∶10 000的樣品均液，分別注入到兩個無菌平皿當中，并且抽取1 mL空白稀釋液做對照，之后將15 mL46 ℃的瓊脂培養基注入到平皿當中，充分搖晃均勻，等到凝固以后將其翻轉，放到恒溫培養箱中培養48 h。

1.2.2 菌落總數測定方法

將測試片放在水平臺面上，將測試片當中的包膜去除，采取1.2.1中的方法制作不同稀釋程度的樣品液放置在測試片中央位置，分別取1 mL食品樣品，將蓋膜覆蓋好，培養基凝固以后，將紙片壓緊，讓樣品均勻分布在試紙上，每個稀釋度樣品各接種2片，放在36 ℃下培養48 h。

1.2.3 TCT培養法

吸取1 mL濃度在0.5%的TCT溶液滴至瓊脂培養基當中（100 mL），制備TCT瓊脂培養基濃度，接種以及培養方法與上述方法相同。

1.3 判定標準

對于3種計數方法測定的總菌落數，與國家標準GB 4789.1-2010中的相關規定進行對比，判定樣品合格與否。

1.4 統計學方法

將實驗數據納入SPSS20.0軟件，P＜0.05，則差異具有存在統計學意義。

2 結果與分析

平板菌落計數法的不合格率為9.1%，菌落總數測定法的不合格率為8.2%，TCT培養基法的不合格率為10%，3種檢測方法結果之間的差異不具有統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 三種檢測方法結果情況對比

3 討論

最近幾年，食品安全已經成為人們廣泛關注的焦點，食品安全問題日益增多，對大家的健康飲食造成了巨大的威脅。食品在整個制作過程當中會接觸到各種各樣的微生物，造成食品變質。有關研究表明[2]，近年來主要采取平板計數法進行微生物檢測。有關研究表明[3]，大部分菌類均有脫氫酶，TCT能夠有效檢測脫氫酶脫下的氫，溶液顏色逐漸從白色轉變成為紅色，便于觀察以及計數。除此之外，為了進一步保證檢測結果的準確性，檢測中心還要從以下3方面入手，對檢測質量進行有效控制：①要求檢驗人員的水平足夠高，操作一定要規范，使相關工作有序開展；對室內環境進行控制，對培養皿的溫度以及濕度給予高度重視；②要對檢驗儀器進行定期校對，使其準確性得以保證；③妥善保管樣品，放置在通風以及干燥的環境當中，對必需要冷藏的樣品進行冷藏；一定要明確標注樣品的有效時間，過期樣品不可進行檢測。

綜上所述，食品微生物檢驗采取平板菌落計數法、TCT培養基法以及菌落總數測定法這3種方法均可以取得相對比較高的準確性，可以按照具體情況選擇適宜的檢驗方法。