微生物檢驗注意事項

文丨李琴（四川省南充市營山縣人民醫院）

微生物檢驗要在微生物實驗室中進行，而由于微生物檢驗過程所需注意事項相對較多，對各步驟細節把控要求極高，任意環節出現問題都會導致最終檢驗結果不準確的狀況發生。為保障檢驗結果的可靠性和真實性,必須明確微生物檢驗全程所需注意事項，形成正確操作、規范控制的作業模式，使最終微生物檢驗質量不會受到影響。

檢驗工作人員要具備專業的理論認知和操作技巧

微生物檢驗仍是由“人”來完成，因此實際工作期間，相關檢驗工作人員必須具備專業的檢驗理論認知和熟悉的操作技能，防止任何人工誤差導致微生物檢驗失敗的問題出現。比如檢驗人員必須明確微生物檢驗原則與外科手術的工作原則要求幾乎相同，平時在只做觀察不用培養操作期間，要穿裝細胞培養室內紫外線照射30min的清潔作業服，使用超凈臺工作時必須前臂伸至箱內，開箱前用75%酒精洗手消毒，試驗期間手部觸及污染品或進出培養室時都要第一時間洗手消毒，常戴口罩與消毒衣帽等等，以此使整個微生物檢驗專業性和實效性能夠得到保障。

創設良好的微生物檢驗實驗室環境

微生物實驗室作為微生物檢驗得以施行的重要平臺，通常完善的微生物實驗室必須滿足無菌、凈化、安全的標準，因此微生物實驗室要采取封閉性的過濾除菌設施進行搭建，設置科學的通風架構，吊頂、隔墻、圍護必須采用彩鋼板，利用環氧樹脂自流平處理地面，對非凈化區域、更衣區域、凈化區域做明確劃分。

尤其凈化實驗室，全區域要按照周期性的風速檢測指標，實時更換濾層網，基礎條件相對較差的實驗室也要置備質量過關的超凈工作臺；無菌室必須配備全方位的紫外線消毒裝置，相應實驗室每次進行微生物檢驗前后第一時間利用紫外線做實時消毒，并根據實際情況設置紫外線強度與空氣質量的定期、定點檢測方案。在此基礎上不斷完善日常巡檢體系，除了預防維護外還要加強空氣過濾質量與相關工作人員的隔離防護工作，以此使微生物檢驗實驗室環境能夠完全達到預期，保障微生物檢驗工作的安全性、流暢性可以充分得以體現，防止檢驗過程中出現任何可能影響檢驗質量的風險因素。

嚴格把控檢驗過程各步驟的細節要點

微生物檢驗期間所需注意事項極多，尤其在正式進入到檢驗分析環節前后，必須嚴格把控檢驗過程各步驟的細節要點，比如在進行采樣、培養基、試劑購置期間，往往有質量保證的樣品最終所獲得檢驗結果可靠性也會更高，因此實踐期間先要對相應微生物實驗室做全方位分析，按照具體情況參考現行國際認可的采樣標準，以此為依據建立適用于自身的采樣方法和質量評價體系，使所檢驗微生物樣本質量能夠得到有效保障。

在樣本處理及培養階段，則要根據檢驗目的、用途的不同而合理選用適當的處理方法，比如固態樣本按照均質器做無菌操作處理，可通過調節均質器于均質時間劃分種類不一的樣本，這個過程中必須保證所用均質器、冰箱、培養器等設備的計量認證準確無誤。而對于微生物培養必須時刻注意溫度記錄和氣體濃度的參數觀察，全程要以符合檢驗程序標準為根本做合理設置，定時對實驗所用儀器進行調試校準，保證微生物檢驗各步驟都可以按照標準完成。

選取科學的檢驗方法

微生物檢驗則必須優先選取目前國家規定的標準檢驗方法，也可按照行業標準、地方標準規定做合理設定，但需要注意的是任何檢驗方法都必須做平行樣，以確保最終檢驗結果具備一定可比性，同時要設立空白對照，有效避免其他污染導致結果不準的問題出現，質控頻率要適中，結合現場試實際信息做實時的質控試驗，比如同步開展質控菌株與常規工作，避免單獨操作，在指質控標準菌株內在敏感性出現變化時第一時間換新菌種，以此使所選用微生物檢驗方法的價值作用能夠充分得到發揮。

合理保存菌株

通常標準菌株與樣本中所分離菌株在保存上也相對較為多樣，目前最佳的菌株保存方式即真空冷凍干燥，但該方法造價相對較高；傳統的瓊脂斜面保存雖然經濟性佳，但由于傳代次數不受控，極易污染變異。因此采用卵黃液普通安瓿熔封做超低溫菌種保存便成為主流，其成本不高，保存效果也相對較好特點較為突出，為微生物檢驗質量的不斷提升提供了有力參考依據。

總之，微生物檢驗注意事項較多，實踐期間不僅要明確檢驗工作人員必須具備專業的理論認知和操作技巧，更要從創設良好的微生物檢驗實驗室環境、嚴格把控檢驗過程各步驟的細節要點、選取科學的檢驗方法、合理保存菌株等方面做起，才能使每次微生物檢驗結果的準確性、可靠性完全達到預期。