Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變分析研究

楊 莉 郭明發 李彥格 管玉潔 毛彥娜 劉 偉

鄭州兒童醫院(河南省兒童醫院 鄭州大學附屬兒童醫院)(河南 鄭州 450000)

Wiskott-Aldrich綜合征也稱為濕疹血小板減少伴免疫缺陷綜合征，其發病率在新生兒中為(1～10)/100萬，以血小板減少伴血小板體積減少、免疫缺陷、濕疹為主要特征，其免疫缺陷多表現為反復感染，容易引發自身免疫性疾病和惡性腫瘤[1-2]。本病為WAS蛋白基因突變所致，WAS蛋白表達缺失或嚴重受損是經典WAS乃至X連鎖血小板減少癥的主要原因[3]。該病可通過基因檢測可確診，其臨床差異表現較大，且不斷發現新的基因突變[4]。隨著基因檢測技術不斷發展，越來越多的基因遺傳性疾病可獲得快速破解，從而提高疾病確診率，改善患兒預后情況[5]。本研究探討Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變類型，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年9月-2019年2月鄭州兒童醫院血液腫瘤科臨床診斷的WAS兒童20例，均有明確的WAS基因突變和或/WASp表達異常。所有患兒均為男性，發病年齡1～48個月，平均發病年齡(3.19±0.53)個月。

1.2研究方法 20例患兒均抽取外周血5mL，提取基因組DNA，通過流式細胞檢測觀察WAS基因突變篩查，對Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變類型進行分析，觀察Wiskott-Aldrich綜合征兒童免疫球蛋白水平變化情況，并觀察Wiskott-Aldrich綜合征兒童濕疹發生情況。

1.3統計學方法 使用SPSS21.0進行統計分析。本次數據為計數資料，以率/百分比表示進行統計描述。

2 結果

2.1Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變類型分布情況 20例Wiskott-Aldrich綜合征患兒中，其中臨床表型XLT患兒3例，占15%；WAS患兒17例，占85%。具體基因突變類型分布情況見表1。

表1 Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變類型分布情況(n)

2.220例Wiskott-Aldrich綜合征兒童免疫球蛋白水平變化情況 經過檢測，各免疫球蛋白水平正常患兒較多，且在不正常患兒中，各指標升高例數多于降低人數。見表2。

表2 20例Wiskott-Aldrich綜合征兒童免疫球蛋白水平變化情況[n,(%)]

2.3Wiskott-Aldrich綜合征兒童濕疹發生情況 20例患兒中，有18例(90%)有短暫或持續濕疹，其中輕度濕疹8例，占40%；中度濕疹8例，占40%；重度濕疹2例，占40%。

3 討論

WAS患兒診斷主要依賴典型臨床表現和基因檢測結果，但對WAS患兒臨床轉歸預測較為困難，尤其是年齡幼小患兒，其發病早期無典型臨床表現，某些患兒隨著年齡增長可能出現新的臨床表現，也有部分病例可能發生致病基因回復突變和新的突變[6-7]，故對患兒WAS基因突變進行分析非常必要。WAS患兒如果不行造血干細胞移植，最后將死于出血、感染及惡性腫瘤。近年來，隨著醫療技術的發展，WAS的診斷和治療取得了很大進展，期望壽命也有所增加，有數據表明現 WAS 患兒的平均期望壽命已達到8歲[8]。而現目前這些患兒的平均存活時間已延長至 11 歲以上，但總體來說該病的預后不佳。由于不同WAS基因突變可導致表達變異，患兒臨床表現呈現較大的異質性，先如今已明確的WAS基因突變可產生四種臨床分型，即典型WAS、XLT、IXLT和XLN[9]。

國際上已報道300多種WASP基因突變類型，突變種類包括錯義突變、無義突變、拼接位點突變、缺失突變、插入突變和復合突變等[10]。國外資料報道的 WAS 基因突變中最多見錯義突變，其次是拼接位點突變、小的缺失突變及無義突變，而插入突變、大的缺失突變及復合突變較少見。而國內最常見的突變類型為缺失突變，其次為無義突變、錯義突變、剪接突變和插入突變。EVHl區突變占已報道WASP基因突變一半以上[11]。現已明確WASP基因的6個突變熱點290C>N/29 l G>N(R86C/H/L)、168C>T(T45M)、IVS6+59>a、IVS8+I·+6delgtg、665C>T(R211X)和IVS8+lg>n。大多數錯義突變位于1-4外顯子,接合處突變主要位于6-10內含子,而無義突變、插入或 缺失 和復合突變遍布整個WAS 基因[12]。由于 WAS 基因位于X染色體上，一般為女性攜帶，男性發病，所以絕大部分發病的患兒為男性，但也偶爾報道女性攜帶者發病的，考慮可能為其X染色體非隨機滅活所致，因此基因診斷更顯得尤為重要[13]。

本次研究結果顯示，20例Wiskott-Aldrich綜合征患兒中，其中臨床表型XLT患兒3例，占15%；WAS患兒17例，占85%，表明大部分臨床表型為WAS，Wiskott-Aldrich綜合征兒童免疫球蛋白水平變化不明顯，大部分均為正常，表明Wiskott-Aldrich綜合征并未對大部分兒童免疫功能發生影響，20例患兒中，有18例(90%)有短暫或持續濕疹，表明濕疹在Wiskott-Aldrich綜合征中發生率較高，此結果與康利民[14]等研究具有一致性。

綜上所述，Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變臨床表型分布以WAS和XLT為主，大部分患兒免疫球蛋白兒童水平正常，且大部分患兒發生濕疹，值得進一步研究。