尹明,唐慧娟,楊大為,鄧勇,李德芳,趙立寧,黃思齊
(中國農業科學院麻類研究所/農業農村部麻類生物學與加工重點實驗室,長沙410205)
據2014 年我國環境保護部和國土資源部公布的土壤污染數據,我國Cd 污染點位超標率已達到7.0%,在無機污染物中居首位,農田耕地是污染程度最大的土壤類型[1]。有研究表明,我國每年有1 417 t的Cd 進入農田耕地,主要源于大氣沉降、家畜糞便、化肥以及灌水,而每年耕地自然條件下減少的Cd 只占其總量的13.00%,剩余Cd 還會殘留在土壤中[2]。如果不進行人為的耕地Cd 污染修復,我國耕地Cd 含量將會在2040 年全面超過現設的土壤Cd 污染標準[3]。我國湖南、廣東、廣西等南方省份Cd 污染尤為嚴重,污染耕地已達全國總耕地的1/6[4],這嚴重影響到我國農業的可持續發展。Cd 不是人體必需的元素,具有較強的致癌、致畸形及致突變作用,聯合國環境規劃署(UNEP)將其列為全球性的危險化學物質[5]。當前針對Cd 污染耕地的治理主要有物理、化學、生物等方法[6],通過物理或化學的方法降低或活化Cd 的活性,使其更容易被固定在耕地中或移除出耕地,通過生物的方法篩選出對Cd 低富集或高富集的植物品種,低富集的植物可以減少植物中的Cd 含量,高富集的植物可以有效移除耕地中的Cd,其本質都是減少Cd對人體的影響[7]。在這些方法中,植物修復利用高富集植物移除耕地中的Cd,因不對環境產生二次污染而被重點研究和推廣[8-9]。但植物修復中多數高富集植物經濟價值較低,難以大規模應用[10]。
紅麻(Hibiscus cannabinus)是錦葵科木槿屬一年生韌皮纖維作物,生物量大、生長周期短、經濟價值較高,且不易將Cd帶入人類食物體系[11-12]。紅麻近年來也開始被用于修復Cd 污染耕地,王路為等[13]發現重金屬污染區的紅麻Cd 富集系數大于1;王玉富等[10]發現種植紅麻可使土壤Cd含量每年降低347 g·hm-2;李文略等[12]發現紅麻可使土壤Cd 含量每年降低25.7 g·hm-2。雖然近幾年已有紅麻修復重金屬污染土壤的相關研究,但多數只于單個環境下試驗,無不同環境的對比試驗;多數試驗只檢測紅麻收獲時各部位Cd含量,計算其富集與轉移系數,未有不同時間點紅麻各部位Cd 含量的變化趨勢;這些試驗雖肯定了紅麻對重金屬的修復效果,但結論中紅麻所能提取的Cd含量卻相差巨大。故本試驗將7 種紅麻作為試驗材料,測定其在重度與輕微Cd 污染耕地下不同時間點各器官的Cd含量,計算其富集系數與轉移系數,研究不同環境下不同時間點不同紅麻品種對Cd的移除能力及其生長特性,為不同污染程度的耕地推薦適宜的紅麻品種,確定紅麻各部位合理收獲時間提供數據基礎,為紅麻修復Cd污染耕地提供更多的理論支持。
試驗材料由中國農業科學院麻類研究所提供,見表1。

表1 試驗材料編號與品種Table 1 Test material number and varieties
1.2.1 重度污染耕地修復試驗
試驗基地選取湖南省瀏陽市Cd 污染基地,土壤Cd含量為1.72~2.18 mg·kg-1。將7種紅麻于2018年5月16 日播種,9 月27 日收獲。每個紅麻品種播種一個獨立小區,小區面積7.5 m2,小區間行列間距20 cm,紅麻播種量25 g,7 個紅麻品種小區為一個區組,共設3 個區組為試驗重復,區組內隨機種植紅麻小區,于3 個區組周圍設保護行。種植期間,于6 月22日、7 月23 日、8 月23 日、9 月27 日進行紅麻取樣,測定相應根、莖、葉的Cd含量;于5月16日(播種期)與9月27 日(收獲期)取土樣,測定土壤Cd 含量、測定各小區紅麻最終的株高、莖粗、樣方干質量、樣方有效株數、單位面積干生物量,計算各紅麻品種的富集系數、轉移系數、Cd移除量。
1.2.2 輕微污染耕地修復試驗
試驗基地選取湖南省湘潭市Cd 污染基地,土壤Cd含量為0.38~0.50 mg·kg-1。7種紅麻于2018年5月10日播種,9月30日收獲。樣方面積和種植方式與重度污染修復試驗相同。種植期間,于6 月20 日、7 月20 日、9 月22 日進行紅麻取樣,測定相應根、莖、葉的Cd 含量;于5 月14 日(播種期)與9 月22 日(收獲期)取土樣,測定土壤Cd含量;測定各小區紅麻最終的株高、莖粗、樣方干質量、樣方有效株數、單位面積干生物量,計算各品種紅麻的富集系數、轉移系數、Cd 移除量、兩個環境試驗結果的總變異、各品種紅麻的回歸系數。
取樣時,每種紅麻在2 個環境下3 個小區里共取6 株樣本進行測定,同時取6 個相應土樣。植株取樣時,確保其完整性與整潔性,用自來水與去離子水清洗,先105 ℃殺青1 h,后80 ℃烘干至恒質量,每個小區的樣研磨后混勻。土壤取樣時,取小區表層下3~5 cm 處土壤,80 ℃烘干,研磨混勻,送至湖南省分析測試中心檢測其Cd 含量。植株和土壤檢測方法分別參照《食品安全國家標準食品中多元素的測定》(GB 5009.268—2016)和《土壤和沉積物12 種金屬元素的測定王水提取-電感耦合等離子體質譜法》(HJ 803—2016)執行。
富集系數=植株各部位Cd 含量(mg·kg-1)/土壤Cd含量(mg·kg-1)[14]
轉運系數=植株地上各部Cd含量(mg·kg-1)/植株地下部Cd含量(mg·kg-1)[15]
植株Cd 富集系數或轉移系數越大,則表示植株的Cd富集或轉移能力越強[16-17]
單位面積植物提取總量(g·hm-2)=葉片生物量(kg·hm-2)×葉片重金屬含量(g·kg-1)+莖稈生物量(kg·hm-2)×莖稈重金屬含量(g·kg-1)
試驗總變異數學模型為:xijk=μ+ti+Lj+(tv)ij+rjk+eijk,μ 為群體的平均值,ti為品種i 的效應值,Lj為地點j 的效應,(tv)ij為品種與地點互作效應,rjk為地點內的區組效應,eijk為隨機誤差,利用一年多點試驗方差分析中的F 檢驗判定其變異效果是否對試驗產生顯著差異[18]。
利用Finlay 和Wilkinsom 模型對各紅麻品種進行回歸分析,回歸系數bi的計算方法[19]為:

數據采用SPSS 21 與Microsoft Office 2019 進行統計分析,差異性分析采用Duncan分析。
2.1.1 不同品種紅麻Cd累積情況
由圖1~圖3 可知,重度Cd 污染下不同品種紅麻各部位各時期的Cd 累積差異明顯,但變化趨勢近似一致。根的Cd 含量,6 月最高,平均值9.17 mg·kg-1;7月大幅下降;8 月小幅下降,含量最低,平均值4.27 mg·kg-1;9 月小幅度上漲。莖的Cd 含量,6 月最高,平均值11.30 mg·kg-1;7 月大幅下降;8 月與9 月小幅下降,9月最低,平均值1.95 mg·kg-1。葉的Cd含量,6月最高,平均值14.38 mg·kg-1;7月與8月小幅下降,8月最低,平均值6.56 mg·kg-1;9月部分提升。7種紅麻各部位Cd 含量,6 月時葉>莖>根;7 月時葉>莖≈根;8 月時葉>根>莖;9月時葉>根>莖。
2.1.2 不同品種紅麻Cd富集系數
由表2 可得,重度Cd 污染下不同品種紅麻各部位各時期的Cd富集系數差異明顯。6月,各品種紅麻根的富集系數范圍為3.51~6.82,平均值5.08;莖的范圍為4.79~7.73,平均值6.22;葉的范圍為6.25~9.91,平均值7.89;富集系數排列為葉>莖>根。9 月,根的范圍為1.58~4.38,平均值3.33;莖的范圍為1.11~1.76,平 均 值1.44;葉 的 范 圍 為6.49~8.83,平 均 值7.45;富集系數排列為葉>根>莖。從6月到9月,根富集系數下降了34.45%、莖下降了76.85%、葉下降了5.58%,下降幅度莖>根>葉。

圖1 重度Cd污染下不同品種紅麻中根的Cd含量Figure 1 Cadmium content in different varieties of kenaf roots under heavily cadmium pollution

圖2 重度Cd污染下不同品種紅麻中莖的Cd含量Figure 2 Cadmium content in different varieties of kenaf stems under heavily cadmium pollution
2.1.3 不同品種紅麻Cd轉移系數
由表3 可得,重度Cd 污染下不同品種紅麻各部位各時期的Cd轉移系數差異較明顯。6月,各品種紅麻莖的轉移系數范圍為0.94~1.49,平均值為1.26;葉的范圍為1.16~1.94,平均數為1.61。7 月,莖的范圍為0.63~1.78,平均值為1.20;葉的范圍為1.10~2.91,平均數為2.16。8 月,莖的范圍為0.61~0.80,平均值為0.72;葉的范圍為0.72~2.53,平均數為1.61。9 月,莖的范圍為0.32~0.70,平均值為0.46;葉的范圍為1.55~4.25,平均數為2.43。從6月到9月,莖的轉移系數一直下降,最終下降63.49%;而葉的轉移系數先下降,后上升,最終上升50.93%。

表2 不同品種紅麻不同部位Cd富集系數Table 2 Cadmium enrichment factor in different parts of different varieties of kenafs
2.2.1 不同品種紅麻Cd累積情況
由圖4~圖6 可知,輕微Cd 污染下不同品種紅麻各部位各時期的Cd 累積有明顯差異,但變化趨勢近似一致。根的Cd 含量,6 月最低,平均值為1.75 mg·kg-1;7 月與9 月小幅上升,9 月最高,平均值為1.93 mg·kg-1。莖的Cd 含量,6 月最高,平均值為2.58 mg·kg-1;7月大幅下降,含量最低,平均值為0.79 mg·kg-1;9 月小幅提升。葉的Cd 含量,6 月最高,平均值為4.56 mg·kg-1;7 月小幅下降,含量最低,平均值為2.86 mg·kg-1;9月小幅提升。7種紅麻各部位的Cd含量,在6月時為葉>莖>根;7月時葉>莖>根;9月時葉>根>莖。

表3 不同品種紅麻不同部位Cd轉移系數Table 3 Cadmium transfer factor in different parts of different varieties of kenafs

圖4 輕微Cd污染下不同品種紅麻中根的Cd含量Figure 4 Cadmium content in different varieties of kenaf roots under slightly cadmium pollution

圖5 輕微Cd污染下不同品種紅麻中莖的Cd含量Figure 5 Cadmium content in different varieties of kenaf stems under slightly cadmium pollution
2.2.2 不同品種紅麻Cd富集系數
由表4 可知,輕微Cd 污染下不同品種紅麻各部位各時期的Cd富集系數差異明顯。6月時,各品種紅麻根的富集系數范圍3.47~4.53,平均值4.07;莖的范圍4.91~7.53,平均值5.96;葉的范圍7.91~13.91,平均值10.53;富集系數排列為葉>莖>根。9 月時,根的范圍3.79~6.76,平均值4.86;莖的范圍2.08~2.73,平均值2.42;葉的范圍7.67~14.63,平均值11.35;富集系數排列為葉>根>莖。從6 月到9 月,根的富集系數上升了19.41%、莖的下降59.40%、葉的上升7.79%,下降幅度莖>葉>根。
2.2.3 不同品種紅麻Cd轉移系數
由表5 可知,在輕微Cd 污染耕地中,不同紅麻中葉的Cd 轉移系數差異明顯,莖中無明顯差異。6 月時,各紅麻莖的轉移系數范圍1.17~1.68,平均值1.47;葉的轉移系數范圍1.89~3.07,平均數2.63。7月時,莖的范圍0.29~0.65,平均值0.46;葉的范圍1.26~2.38,平均數1.72。9 月時,莖的范圍0.38~0.70,平均值0.52;葉的范圍2.02~2.92,平均數2.50。從6 月到9月,莖的轉移系數一直下降;而葉的轉移系數先下降,后上升,最終下降4.94%。
由表6 可知,重度Cd 污染耕地中不同品種紅麻移除的Cd 含量為72.49~149.17 g·hm-2,平均92.08 g·hm-2;輕微Cd 污染耕地中不同品種紅麻移除的Cd 含量為25.95~49.91 g·hm-2,平均39.18 g·hm-2。從表7可得,重度Cd 污染耕地中Cd 含量下降0.16~0.90 mg·kg-1,平均值0.48 mg·kg-1,下降幅度9.30%~41.28%,平均降幅24.99%;輕微Cd 污染耕地中Cd 含量下降0.02~0.11 mg·kg-1,平均值0.05 mg·kg-1,下降幅度4.65%~22.00%,平均降幅11.39%(除XT4 外)。將兩個環境的數據進行對比,重度污染耕地Cd 含量為輕微污染的4.30 倍,紅麻Cd 移除量為輕微污染下的2.35 倍,土壤下降Cd 含量是輕微污染環境的16.00倍,下降幅度是輕微污染環境下的2.19倍。

圖6 輕微Cd污染下不同品種紅麻中葉的Cd含量Figure 6 Cadmium content in different varieties of kenaf leaves under slightly cadmium pollution

表4 不同品種紅麻不同部位Cd富集系數Table 4 Cadmium enrichment factor in different parts of different varieties of kenafs

表5 不同品種紅麻不同部位Cd轉運系數Table 5 Cadmium transfer factor in different parts of different varieties of kenafs
由表8 可知,重度Cd 污染環境下,不同品種紅麻各項生長指標具明顯差異。7 種紅麻中,X1、X2、XT4的株高超過5 m;X1、X2、XT5、16C 的莖粗超過26 mm;X1 與XT5 的單位面積干生物量超過2.70 kg·m-2,其中X1 與XT5 的生長指標與產量較其他品種紅麻表現更優良。由表9 可知,輕微Cd 污染環境下,不同品種紅麻各項生長指標也具明顯差異。7 種紅麻中,X1 與X2 的株高超過5 m,莖粗超過24 mm,單位面積干生物量超過3.00 kg·m-2,其生長指標與產量較其他品種紅麻表現更優良。
從表10 可知,地點間、品種間、地點與品種互作的變異顯著性均小于0.05,可與F檢驗臨界表進行對比,而地點內區組的變異顯著性為0.534,為不顯著變異。從F檢驗臨界值表中,可得F0.05(1,24)=4.260,小于地點間的F值;F0.05(6,24)=2.508,小于品種間、地點與品種互作間的F值。表明試驗的總變異主要來源于地點間、品種間、地點與品種互作,而地點內區組的變異對試驗總變異未產生顯著影響。從表11 可知,各品種的回歸系數均小于1,表明各品種的穩定性都較高,在重度Cd 污染耕地中,X1 與XT5 各方面指標較其他品種更優,但X1 回歸系數更低,表現更穩定;輕微Cd 污染耕地中,X1 與X2 各方面指標較其他品種更優,但X2回歸系數更低,表現更穩定。
在兩種污染耕地中,紅麻根與莖的Cd 含量都呈下降趨勢,而葉Cd含量在下降后,9月明顯上升,各部位Cd 含量的前期排序為葉>莖>根,后期為葉>根>莖。根Cd在兩個耕地中分別下降53.44%與-10.29%,莖中分別下降82.74% 與69.38%,葉中下降了54.38%與37.28%。莖的Cd 含量下降幅度最大,表明莖中有良好的Cd 運輸機制,可將莖中的Cd 運輸到葉中[20]。而葉中的Cd 在6 月到8 月有明顯下降,9 月后明顯上升,可能是葉片中一些抗Cd 或抗氧化的防御系統在發育過程中進行了響應[21],如葉片中的POD[22]或SOD[23]等。紅麻葉片富含蛋白,可用作飼料原料,而飼料含Cd 量需低于1 mg·kg-1[24],因此可選擇在紅麻葉片Cd 含量較低的時間段進行收割,即8 月中下旬,在添加時需注意控制其比例不超過10%;如要預防重金屬污染食物鏈,則可于9 月底收割葉片來制作復合板材。紅麻韌皮可作纖維生產紡織品,莖稈作復合材料制造家具,紡織品含Cd 量需低于40 mg·kg-1,家具含Cd 量需低于75 mg·kg-1[25-26],紅麻韌皮部與莖稈中Cd 含量遠遠低于相應標準,故可以在紅麻生長成熟后進行收割。

表6 不同品種紅麻Cd移除量(g·hm-2)Table 6 Cadmium removal capacity of different varieties of kenafs(g·hm-2)

表7 不同品種紅麻對應土壤Cd含量Table 7 Cadmium content in soils corresponding to different varieties of kenafs

表8 重度Cd污染下不同品種紅麻生長指標Table 8 Physiological indexes of different varieties of kenafs under severe cadmium pollution

表9 輕微Cd污染下不同品種紅麻生長指標Table 9 Physiological indexes of different varieties of kenats under severe cadmium pollution

表10 試驗總變異及F檢驗Table 10 Total test variation and F test
各品種紅麻9 月份在重度Cd 污染環境中根的富集系數平均值為3.33、莖為1.44、葉為7.45;在輕微Cd污染環境中根富集系數平均值為4.86、莖為2.42、葉為11.35。對比符慧琴等[27]研究中,0.41 mg·kg-1(輕微污染)Cd 濃度土壤中20 種苧麻的富集系數0.97~1.58,谷雨等[28]研究中0.42 mg·kg-1Cd 濃度環境下的甜高粱富集系數1.29~1.47、玉米富集系數0.76、油葵富集系數2.30,鄧婷等[29]研究中2.00 mg·kg-1(重度污染)Cd 濃度土壤中玉米莖與葉的富集系數為7.45 與6.20,紅麻表現出了較好的Cd 富集能力。各品種紅麻9 月份在重度Cd 污染環境中莖轉移系數平均值為0.46,葉為2.43;輕微Cd 污染環境中莖轉移系數平均值0.52,葉為2.50。對比符慧琴等[27]研究中0.41 mg·kg-1的Cd 濃度土壤中的20 種苧麻轉移系數0.66~1.41,與鄧婷等[29]研究中在2.00 mg·kg-1的Cd 濃度土壤中的玉米莖與葉轉移系數1.88和3.02,紅麻表現出較好的Cd轉移能力。

表11 各品種回歸系數Table 11 Regression coefficient of each variety
將7 種紅麻種植在Cd 污染的耕地中,重度污染耕地中紅麻Cd移除量為72.49~149.17 g·hm-2,輕微污染耕地中紅麻Cd移除量為25.95~49.91 g·hm-2。其中重度污染耕地中紅麻Cd 移除量大,而輕微污染耕地中紅麻Cd 移除量小,可能在土壤中Cd 濃度較低時,植物移除Cd 的速度會隨土壤Cd 含量的增加而加快[30]。經過紅麻種植的土壤,重度污染耕地下降0.48 mg·kg-1,降幅為24.99%;輕微污染耕地下降0.03 mg·kg-1,降幅為8.26%,雖然紅麻的Cd 移除量相對于整個耕地較低,且無法精確檢測,但地下3~5 cm 的取土樣處是紅麻根部集中處,其Cd 下降含量與幅度從側面證實了紅麻能對Cd污染耕地進行有效的修復。而土壤中出現的個別Cd 含量增加情況,可能是因為施肥、農藥或污染的水源而致[31]。
(1)7 種紅麻在Cd 污染耕地中均可以正常生長,表明均可用于土壤的Cd 污染治理。中紅麻13 號與紅麻H1701 在重度污染耕地中各生長指標與產量均較優異,其中中紅麻13 號表現更穩定且Cd 移除量更高,推薦用于重度Cd 污染耕地種植修復;中紅麻13號與中紅麻16 號在輕微污染耕地中各生長指標與產量都較優異,且移除量與穩定性都較高,推薦用于輕微Cd污染耕地種植修復。
(2)紅麻成熟后,各部位Cd積累量排序為葉>根>莖,可在葉片完全成熟前進行收割,以防止葉片成熟后脫落而二次污染耕地,紅麻韌皮與莖稈可待紅麻成熟后進行收割,以提高耕地種植紅麻的整體經濟效益。