真菌感染性疾病的檢驗方法與鑒定分析

吳章菊

【摘 要】目的：探討分析真菌感染性疾病的檢驗方法及鑒定情況。方法：收集我院2019年7月至2020年6月收治的166例真菌感染性疾病患者的臨床資料，對166例患者所采取的多種檢驗方法及鑒定情況進行探討和分析。結果：166例患者中共檢出真菌群5種，其中白色念珠菌占63.25%（105/166）、熱帶念珠菌占15.06%（25/166）、光滑念珠茵占10.85%（18/166）、曲霉菌占7.83%（13/166）、近平滑念珠菌占3.01%（5/166）。結論：對于真菌感染性疾病，采用直接鏡檢、分離培養、染色鏡檢、動物實驗檢查、免疫學檢查等方法，可有效檢出患者所感染的菌種，借以檢驗與鑒定真菌形態與特征等，為真菌感染患者提供診斷依據。

【關鍵詞】真菌感染性疾病;檢驗方法與鑒定分析

【中圖分類號】R756【文獻標識碼】B【文章編號】1672-3783（2020）11-33--01

真菌感染是由于各種真菌所導致的感染性疾病。其種類繁多，包括念珠菌、新型隱球菌、曲霉菌等。本病可以分為淺部真菌感染和深部真菌感染，淺部真菌感染好發于毛發、皮膚、指甲等位置表淺的地方。深部真菌感染經常侵犯到人體的口腔黏膜，胃腸道黏膜以及各個臟器，甚至通過血液傳播播散至全身，呈彌漫性的感染[1]。因此，感染真菌后應及時就醫，本文旨在探討真菌感染性疾病的檢驗方法及鑒定情況，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將我院2019年7月至2020年6月收治的166例真菌感染性疾病患者及其采集的各種標本培養出的166株真菌納入本次研究。166例患者中含男患者102例、女患者64例，年齡起止范圍15至80歲，均齡（60.2±5.4）歲。采集的標本種類有：痰液標本（118例）、血液標本（12例）、尿液標本（25例）、糞便標本（4例）、其他標本（7例）。本次研究的開展和進行通過醫院倫理委員會的批準，所有患者對本次研究知情，簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標本的采集。標本的采集應視患者感染的不同真菌來提取不同部位的標本。如淺部真菌包括人體毛發、皮屑、指甲、趾甲、痂等;深部真菌包括痰液、尿液、膿液、腦脊液、陰道分泌物等。對患者采集部位實施消毒后，方可進行標本的采集，采集到的標本應妥善放置到無菌容器中迅速送實驗室檢查，運送時間越短標本越新鮮越好，以免延誤時間造成標本的變質，糞便不推薦作為真菌檢驗的標本[2]。用于活組織檢查的標本應采集兩份，一份用于真菌培養檢查，一份用于病理組織檢查。

1.2.2 檢查方法及檢驗程序。完成標本采集后即可進行真菌培養檢查，可通過直接鏡檢、培養檢查、免疫學檢查等方法來進行。在應用上述各種檢查方法的過程中，均應根據化學分析儀器以及用于檢驗的試劑盒等器材、儀器的使用說明書規范操作，按說明書操作步驟逐步進行，同時對標本的檢測進行記錄，對得出的檢驗結果進行綜合全面的分析。

1.3 統計學方法

本次研究數據均采用SPSS24.0進行處理分析，計數資料以%表示。

2 結果

166例患者中共檢出真菌群5種，其中白色念珠菌占63.25%（105/166）、熱帶念珠菌占15.06%（25/166）、光滑念珠茵占10.85%（18/166）、曲霉菌占7.83%（13/166）、近平滑念珠菌占3.01%（5/166）。

3 討論

真菌是自然界中廣泛存在的一種真核細胞生物，具有細胞核和細胞器，不含葉綠素，以寄生和腐生方式吸取營養，能進行有性和無性繁殖。按菌落形態來分，真菌可分為酵母菌和霉菌兩大類淺部大類。按照真菌對組織入侵深淺的不同，臨床上將引起感染的真菌分為淺部真菌和深部真菌。無論是淺部真菌還是深部真菌，均是通過致病性的真菌來侵入人體組織，如通過皮膚、黏膜、肌肉、人體內臟等途徑入侵，造成人體組織出現感染癥狀。真菌感染既可僅僅局限于人體某一器官、臟器組織中，又可蔓延傳播至全身。淺部真菌的特點是親角質蛋白，侵犯人和動物的皮膚、毛發、甲板，引起的感染統稱為皮膚癬菌病，如頭癬、體癬、股癬、手癬和足癬等，皮膚癬菌病為接觸性傳染，不潔的衛生習慣、共用拖鞋、毛巾、梳子、接觸患癬動物等是皮膚癬菌傳播的主要途徑。深部真菌病通常按致病菌命名，主要包括白假絲酵母菌、新型隱球菌等，多為條件致病，免疫力低下者更易遭受侵犯[3]。隨著近年來廣譜抗生素、免疫抑制劑、各種導管和插管技術應用的增多，條件致病菌的感染機率也不斷上升。對于感染性真菌的常用檢查方法主要有以下幾種：

1 直接鏡檢

真菌直接鏡檢法是一種簡便易行，準確診斷真菌病的檢測方法。將采集的標本如皮屑、毛發等取少許置于載玻片上，滴1-2滴氫氧化鉀（鈉）溶液，加蓋玻片。然后在酒精燈上微烘，加速角質溶解，切勿沸騰。輕輕按壓蓋玻片，以濾紙吸取多余藥液，在顯微鏡下觀察，避免強光。先在低倍鏡下觀察有無真菌菌絲和孢子，然后用高倍鏡觀察孢子和菌絲的形態、特征、位置、大小和排列等。對于真菌深部感染的標本如痰液，需涂片按皮膚標本處理后鏡檢，也可應用革蘭染色法檢查。

2 培養檢查

培養檢查可提高真菌檢出率，確定菌種。用以培養檢查的培養基多以葡萄糖蛋白胨瓊脂進行培養，置室溫或37℃培養1～3周。視不同菌種選取不同的培養基，培養過程中應合理控制細菌生長，可添加抗生素于培養基內加以處理。菌種鑒定常根據菌落的形態及顯微鏡下形態來判斷。對某些真菌，有時需配合其他鑒別培養基、生化反應、分子生物學方法來確定。

3 免疫學檢查

免疫學檢查是用于檢測深部真菌抗體的一種方法。但由于患者遭受感染易出現免疫水平下降的情況，以致無法檢測出抗體，因此這種檢查方法應根據試驗結果結合實際臨床情況來綜合診斷，適用于早期真菌感染及診斷。

綜上，對于真菌感染性疾病，合理選擇檢驗方法有助于檢出菌種，對臨床醫學真菌感染性疾病的明確診斷具有重要意義。

參考文獻

肇玉博，張馳，常安琪，馬麗.SAA、CRP及PCT檢測對感染性疾病的臨床診斷價值[J].臨床醫學研究與實踐，2018，3（34）：105-107.

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陳少艷，劉基鐸，肖明鋒，袁晴，劉光平.淋巴細胞亞群檢測在感染性疾病中的應用[J].國際檢驗醫學雜志，2017，38（02）：206-208.