氣相色譜法測定西紅柿中有機磷農藥殘留量的不確定度評定

王 越

（長春市農產品質量安全與檢測中心,吉林長春 130032）

有機磷農藥具有藥效高、作用方式多樣、適用范圍廣等特點，主要用于防治植物病蟲害，在農業生產中應用廣泛。但同時它也具有一定的毒性，不合理的使用會給人們的身體健康帶來嚴重威脅。農藥殘留檢測結果常作為判斷農產品是否符合最大殘留量要求的重要依據，由此可見，提高農藥殘留檢測結果的可靠性和準確性具有十分重要的意義。不確定度是測定結果的重要組成部分，它反映了測定結果的可靠性以及不確定度分量對檢測過程中產生的影響，在測定結果接近限量值時必須給出標準方法的不確定度[1]。本文根據NY/T761-2008的標準方法，建立數學模型，以西紅柿中毒死蜱測量不確定度評定為例，系統分析了氣相色譜法測定蔬菜中有機磷農藥殘留量不確定度的評定全過程。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）蔬菜樣品：當地某蔬果基地例行抽檢的西紅柿樣品。

（2）試劑與材料：乙腈（色譜純）；丙酮（色譜純）；氯化鈉，140℃烘烤4h；蒸餾水；濾膜，0.2μm，有機溶劑膜。

（3）標準品：毒死蜱，1000μg/ml，容量1ml，農業部環境質監檢測中心。

（4）儀器設備：Agilent 7890B GC（FPD）；食品加工器；旋渦混合器；氮吹儀；電子天平；勻漿機。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

西紅柿樣品經四分法縮分，將其粉碎，混勻，裝入指定容器內，制成試樣。

1.2.2 提取

用電子天平準確稱取25.0g試樣放入250ml燒杯內，加入50.0ml乙腈，進行2min的高速勻漿，過濾收集到裝有7g氯化鈉的具塞量筒中，收集得到大約50ml濾液，蓋好塞子，震蕩約1min，使氯化鈉與濾液充分混勻，常溫放置30min，待有機相與水相分層。

1.2.3 凈化

準確吸取10.00ml乙腈層溶液，放入100ml燒杯中，在80℃水浴鍋上加熱，同時通入氮氣，蒸發近干時用分度吸量管吸取5.00ml丙酮，沖洗燒杯內壁，將提取液混勻后，過有機濾膜待測。

1.2.4 色譜條件

色譜柱為DB-1701，30m×0.25mm×0.25μm；進樣口溫度250℃；檢測器溫度290℃；程序升溫：初始120℃保持2min，然后10℃/min升溫到270℃保持12min；載氣為氮氣；柱流量為1.99ml/min；進樣方式：不分流；進樣量：1μl。

2 不確定度的數學模型

根據NY/T761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》[2]可知：蔬菜中有機磷類農藥定量結果計算公式為：

式中：ω表示試樣中毒死蜱農藥殘留量（mg/kg）；V1表示乙腈提取溶劑總體積（ml）；A表示試樣中毒死蜱的峰面積；V3表示試樣定容體積ml；ρ表示毒死蜱標準溶液的濃度（mg/L）；V2表示用于檢測的溶液體積（ml）；As表示毒死蜱標準溶液的峰面積；m表示試樣的質量（g）。

3 不確定度的來源

從不確定度的數學模型可知，氣相色譜法測定西紅柿中有機磷農藥殘留量不確定度的主要來源包括：（1）A類不確定度：測量的重復性；（2）B類不確定度：標準物質、樣品稱量、樣品處理過程中溶液體積、色譜儀峰面積的測量等因素。

4 各標準不確定度分量的評定

4.1 標準不確定度的A類評定

從前處理過程到氣相色譜儀檢測，相同的試樣、試驗條件、操作人員，進行8次平行試驗，濃度為0.10mg/L的毒死蜱標準工作液在同一條件下平行配制8次，測定結果的平均值用于外標法定量。測量覆蓋整個方法的全過程，包括樣品的制備、前處理、上機檢測和數據處理。測定結果見表1。

表1 樣品中毒死蜱殘留量的檢測結果

根據貝塞爾公式計算：

按正態分布計算，平均值的標準偏差為：

重復測定的相對標準不確定度為：

4.2 標準不確定度的B類評定

4.2.1 試樣制備均勻性引入的相對標準不確定度的評定

因為整個樣品制備過程，均嚴格遵循標準的操作規程進行處理，并且經過了高速勻漿機的充分混合，所以，試樣制備均勻性引入的相對標準不確定度可以忽略不計。

4.2.2 天平稱取試樣質量（m）引入的相對標準不確定度的評定

稱取試樣的質量為25.0g，根據電子天平的檢定證書可知，天平的最大允許差為±0.01g，因為稱量分為兩次操作，一次去皮，一次是添加試樣，所以分量應該計算兩次。按均勻分布：。

稱量試樣質量（m）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

4.2.3 樣品前處理過程中溶液體積（V）引入的相對標準不確定度的評定

冬林，認識你，我要感謝多年好友張笑天先生。那年，身為吉林省作協主席的張笑天，帶了一批擬評上首屆吉林省文學獎的文學作品，進京請雷達、李敬澤、白燁，以及筆者再研究一下。我們審讀后一致認為胡冬林的《青羊消息》為最佳。第二年全國第一屆環境文學評獎終審會上，我發現竟沒有《青羊消息》，便向主持評獎的全國人大環境與資源保護委員會主任委員曲格平先生指出，這次評獎漏掉《青羊消息》是很大的遺憾。會上，同任環境文學獎評委的雷達、李敬澤同意我的看法。根據評獎規則，有三位終評委同時提議、推薦，便可列入評議對象。包括王蒙在內的全體終評委看了《青羊消息》，便一致同意該作品榮獲首屆環境文學獎。

（1）乙腈提取液總體積（V1）引入的相對標準不確定度

樣品前處理過程中，用50ml量筒量取50.0ml乙腈，根據JJG196-2006《常用玻璃量器》可知[3]，50ml量筒的最大允許差為±0.50ml。按均勻分布：。

提取液總體積（V1）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（2）吸取用于檢測的提取液體積（V2）引入的相對標準不確定度

樣品前處理過程中，用10ml單標線吸量管吸取上層濾液10.00mL，根據文獻[3]可知，10ml單標線吸量管的最大允許差為±0.020ml。按均勻分布：。

吸取用于檢測的提取液體積（V2）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（3）試樣溶液最后定容體積（V3）引入的相對標準不確定度

試樣溶液最后定容體積（V3）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（4）樣品前處理過程中溶液體積（V）引入的相對標準不確定度

將以上三項不確定度分量合成得到：

樣品前處理過程中溶液體積（V）引入的相對標準不確定度為：

4.2.4 標準溶液配制過程中溶液質量濃度（ρ）引入的相對標準不確定度的評定

（1）標準儲備液質量濃度（ρ1）引入的相對標準不確定度

測量所使用的毒死蜱標準溶液由農業部環境質監檢測中心生產，濃度為1000μg/ml，由標準物質證書可知，毒死蜱的擴展不確定度為7μg/ml，包含因子k=2。

標準儲備液質量濃度（ρ1）的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

（2）標準溶液稀釋過程中質量濃度（ρ2）引入的相對標準不確定度

毒死蜱標準溶液的稀釋過程：第一次用1ml單標線吸量管取1 000μg/ml的標準儲備液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成100μg/ml的標準工作液。第二次用1ml單標線吸量管取100μg/ml的標準工作液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成10μg/ml的標準工作液。第三次用1ml單標線吸量管取10μg/ml的標準工作液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成1μg/ml的標準工作液。第四次用1ml單標線吸量管取1μg/ml的標準工作液，用丙酮定容到10ml容量瓶中，配制成0.1μg/ml的標準工作液。此稀釋過程，共使用4次1ml單標線吸量管，4次10ml單標線容量瓶。根據文獻[3]可知，1ml單標線吸量管的最大允許差為±0.007ml，10ml單標線容量瓶的最大允許差為±0.020ml。按均勻分布，。

1ml單標線吸量管引入的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

10ml單標線容量瓶引入的標準不確定度為：

相對標準不確定度為：

標準溶液稀釋過程中質量濃度（ρ2）引入的相對標準不確定度為：

（3）標準溶液配制過程中溶液質量濃度（ρ）引入的相對標準不確定度

將以上兩項不確定度分量合成得到：

標準溶液配制過程中溶液質量濃度（ρ）引入的相對標準不確定度為：

5 氣相色譜儀峰面積（A1，AS）測量引入的相對標準不確定度的評定

根據儀器檢定證書可知，氣相色譜儀的定量重復性為1.5%。按均勻分布：。因試樣和標樣各進行一次峰面積測量，則氣相色譜儀峰面積（A1，AS）測量引入的相對標準不確定度為：

6 相對合成標準不確定度

因以上各不確定度分量相對獨立，則試樣中毒死蜱殘留量的相對合成標準不確定度為：

7 擴展不確定度及測定結果表示

在置信概率p=95%時，包含因子k=2，則擴展不確定度為：

試樣中毒死蜱的殘留量為：

8 結論

綜上所述，以NY/T761-2008檢測蔬菜中有機磷農藥殘留量的不確定度的主要來源包括色譜儀峰面積的測量、標準溶液的制備過程、前處理過程中的溶液體積以及重復性檢測，其他因素影響較小。由此可見，對檢測樣品做多次平行試驗；對標準物質進行期間核查；對檢測儀器進行校準；檢測人員規范操作都可以在一定程度上有效的降低不確定度，保證檢測結果的準確性和可靠性。