咽拭子核酸檢測的那些疑惑

應(yīng)雨妍

● 樣本是如何采集的

在進(jìn)行咽拭子核酸檢測時(shí)，采樣人員一般會讓大家微微仰頭，張大嘴巴。然后，他們會用一根長棉簽在雙側(cè)扁桃體和舌根后較深處的咽后壁刮擦采樣。采集結(jié)束之后，采樣人員會把棉簽放進(jìn)有采樣液的采樣管里，然后擰緊蓋子。過程非常簡單，受試者可能會有干嘔、咳嗽的反應(yīng)，不過采集結(jié)束后很快就可以恢復(fù)。

● 為什么使用咽拭子

核酸檢測可以采集的部位或分泌物有很多，如鼻咽部位、支氣管和肺泡灌洗的灌洗液、痰液和血液。那么，為什么要采用咽拭子核酸檢測呢？

在這些方法中，血液通常不大能檢測出新冠病毒。血液能檢測到的是身體針對新冠病毒產(chǎn)生的抗體，但產(chǎn)生抗體只能說明受試者感染過病毒，不能判斷他目前是否是感染者。而且抗體的產(chǎn)生需要時(shí)間，在感染之初，可能無法檢測到抗體的存在。因此，用血液樣本進(jìn)行篩查是不可行的。

其余的幾種方法中，支氣管和肺泡灌洗液的敏感性最高，可以達(dá)到93%;痰液樣本稍弱，為72%。通俗地說，敏感性評判的是檢測方法準(zhǔn)確判斷感染者的成功率，93%就相當(dāng)于在100個(gè)感染者中，通過支氣管和肺泡灌洗液檢測可以成功發(fā)現(xiàn)93個(gè)。

但這三種方法顯然都更適合已經(jīng)確診且住院的患者，而且采樣人員需要更高級別的安全防護(hù)，對于大規(guī)模的篩查來說并不太現(xiàn)實(shí)。根據(jù)研究，新冠病毒的受體ACE2在上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞上有豐富的表達(dá)，在上呼吸道（包括鼻、咽、喉部）中，病毒有很高的復(fù)制水平。因此，鼻拭子和咽拭子提取的上呼吸道上皮細(xì)胞和分泌物中可以捕捉到病毒。

很多人在網(wǎng)上看過鼻拭子采集示意圖。進(jìn)行鼻拭子采集時(shí)，采樣人員要把棉簽插入到受試者的鼻腭處，還要轉(zhuǎn)動拭子，充分采樣后鼻拭子再退出。如果達(dá)不到足夠的深度，很可能采集不到足夠的病毒，無法檢測受試者是否受到感染。鼻拭子可能導(dǎo)致的不適反應(yīng)包括疼痛、嘔吐反射和流淚，相對咽拭子來說，生理上的不適感和心理上的抵觸感會更強(qiáng)烈，而且對采樣人員也有更高的專業(yè)要求。

根據(jù)目前的研究，鼻拭子與咽拭子的準(zhǔn)確程度一般是等同的，或略高于咽拭子。《自然》雜志上的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在患者感染病毒剛剛出現(xiàn)輕微癥狀時(shí)，咽拭子檢測就已經(jīng)呈陽性了，在之后的7天里，咽拭子提取到的病毒載量都很高，峰值在第4天出現(xiàn)。而在整個(gè)病程中，鼻拭子和咽拭子的病毒載量和檢出率是沒有差異的。

因?yàn)樾鹿诓《镜母腥就緩街饕?jīng)由上呼吸道，這表明，在感染之初，病毒可能在上呼吸道中大量復(fù)制，然后隨著疾病的進(jìn)程，通過呼吸道黏膜進(jìn)入人體，深入到其他器官。在上呼吸道中病毒載量下降，載量過低的情況下，就無法呈現(xiàn)陽性結(jié)果了，所以，在接觸病毒后的感染早期，單次咽拭子采樣結(jié)果作為大規(guī)模初篩的方式是可行的，但不能用于最終確診的依據(jù)。

● 咽拭子采樣后，如何確認(rèn)是否感染

為什么咽拭子核酸檢測可以幫助我們判斷是否感染新冠病毒？實(shí)際上，僅僅依靠咽拭子本身是不行的，我們需要依靠的是PCR，也就是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。它的原理主要是把拭子采集到的遺傳物質(zhì)RNA提取出來，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄變成與RNA互補(bǔ)的DNA（cDNA），然后用PCR進(jìn)行擴(kuò)增。PCR體系里包含一段由特異性序列組成的探針，被熒光基因標(biāo)記，遇到要檢測的代表病毒的靶序列時(shí)，就會與它結(jié)合，發(fā)出熒光。每擴(kuò)增一條這樣的DNA鏈，就會產(chǎn)生一個(gè)熒光分子。

檢驗(yàn)人員用熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測時(shí)，會設(shè)置一個(gè)熒光分子數(shù)的閾值，監(jiān)測達(dá)到閾值需要多少次循環(huán)擴(kuò)增，需要的循環(huán)次數(shù)越少，樣本中病毒核酸濃度越高。在檢測中循環(huán)次數(shù)小于某個(gè)固定值的，就會被判定為陽性結(jié)果。

當(dāng)然，PCR的檢測結(jié)果也有假陰性或假陽性的可能，畢竟當(dāng)樣本量足夠大時(shí)，沒有檢測方法可以做到100%的準(zhǔn)確率。所以，對于核酸檢測之后呈陽性的樣本，還要進(jìn)行二次核酸檢測，如有必要，還要通過影像學(xué)的方法共同進(jìn)行診斷;而如果呈陰性，也建議患者隔離14天，盡量避免出現(xiàn)假陰性的情況。

（編輯? ? 林? ? 妙）