microRNA-27a在多種肝臟疾病發生發展中的作用機制

羅 昕，徐銘益

上海交通大學附屬第一人民醫院 消化內科，上海 200080

microRNA(miRNA)是一類在真核生物中廣泛存在的非編碼小分子單鏈RNA,長18～25個核苷酸[1]。通過互補的堿基與特定mRNA的3′-非翻譯區(3′-UTR)結合,miRNA可使靶mRNA發生降解或影響其翻譯,改變轉錄后水平調控基因的表達[2-3]。一般認為miRNA參與了細胞的多種生物學功能, 如侵襲、遷移、增殖、凋亡、生長、分化等[4]。已有多項研究表明，miRNA-27a參與多種肝臟疾病的發生、發展以及轉歸，如脂肪肝、肝炎、肝纖維化、肝癌等。另外，miRNA-27a作為生物標志物，在很多肝臟疾病中也有良好的應用前景。現就miRNA-27a與肝臟疾病的關系作一綜述。

1 miRNA-27a與脂肪性肝病(fatty liver disease，FLD)

FLD是以脂肪在肝臟異位沉積為特征的一組臨床病理綜合征，脂質代謝異常被認為是疾病發生、進展的重要因素[5]。Zhang等[6]研究發現，在高碳水化合物肥胖小鼠模型和高脂飲食肥胖小鼠模型中，miRNA-27a表達水平明顯降低。通過過表達miRNA-27a，靶向調控脂肪酸合酶(fatty acid synthase，FAS)以及硬脂酰輔酶A去飽和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1，SCD1)基因，可以減少甘油三酯生成，進而減輕小鼠肝臟的脂肪變性。Strable等[7-10]發現，在高碳水化合物飼養的小鼠模型中，通過注射過表達miRNA-27a的質粒可以顯著增加糖原分解產熱并且抑制其原發性脂肪生成(de novo lipogenesis，DNL)過程，FAS和SCD1蛋白作為DNL過程的關鍵調節酶，在脂質形成中扮演重要角色。綜上所述，miRNA-27a可以通過調控DNL過程中的關鍵酶以及增加糖類的消耗，影響脂質代謝過程，進而在FLD發生發展中發揮重要作用。

2 miRNA-27a與肝炎

肝炎包括藥物損傷性肝炎、酒精性肝炎、病毒性肝炎、自身免疫性肝炎等，其發生發展的機制比較復雜，尚未研究清楚。近年，miRNA-27a在肝炎發生發展中的作用受到越來越多關注。

Yang等[11]研究發現，在膿毒血癥造成的小鼠肝臟炎性損傷模型中，紫杉醇可以通過調節miRNA-27a/TAB3/NF-κB軸，抑制TAB3基因的翻譯，使自由基等組織氧化損傷因子減少，達到減輕肝臟炎癥、促進損傷修復的目的。

Choi等[12]研究發現，在由脂肪組織間充質干細胞來源的肝細胞樣細胞(differentiated hepatocyte-like cells from adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,DHC)模型中，脂肪組織間充質細胞在分化成DHC后，miRNA-27a表達顯著降低，其靶基因LDLR基因表達顯著升高，誘使LDLR基因編碼的膜蛋白表達增加，促進HCV顆粒進入細胞內，增加DHC對HCV的易感性，引發丙型肝炎。另外，Shirasaki等[13]研究發現在人肝癌細胞中，miRNA-27a通過調控多種脂質代謝基因包括FAS、SREBP1、PPAR、ApoA1、ApoB100、ApoE3等，抑制宿主細胞的脂質代謝，從而減少HCV合成所需的原料，降低HCV顆粒的密度，抑制其在宿主細胞內的增殖。

此外，Saha等[14]研究發現，miRNA-27a在酒精處理的單核細胞的細胞外囊泡中富集，同時發現在酒精性肝炎患者血漿細胞外囊泡中miRNA-27a水平也出現顯著升高。miRNA-27a通過靶向調控CD206在單核細胞上的表達，可以調節細胞的吞噬過程，影響肝實質細胞和免疫細胞之間的相互作用，進而影響酒精性肝炎的發生。

3 miRNA-27a與肝纖維化

肝星狀細胞(HSC)的活化被認為是肝纖維化的始動因素，活化HSC表達Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原，細胞外基質沉積，導致肝纖維化進展[15-16]。Ji 等[17]研究發現，在活化的原代兔星狀細胞中，miRNA-27a的表達顯著上升，可以調控靶基因RXRα基因的表達，抑制兔星狀細胞的脂質沉積和促進細胞增殖，從而促進肝纖維化的進展。

Liuzzi等[18]和Li等[19]研究發現肥胖的患者常伴有高瘦素血癥。瘦素通過上調HSC中miRNA-27a的表達，可以降低HSC中固醇調節元件結合蛋白-1c和肝X受體α水平，促進肝纖維化的發生。另外，Chen等[20]發現，在ob/ob肥胖小鼠模型和硫代乙酰胺誘導的肝纖維化模型中，注射miRNA-27a的抑制劑可以顯著提高固醇調節元件結合蛋白-1c的表達，逆轉其肝纖維化的程度。

4 miRNA-27a與肝癌

Chen等[20]研究發現，在肝癌耐藥細胞系Bel/五氟尿嘧啶(5-FU)中，miRNA-27a通過FZD7/β-catenin通路，抑制多重耐藥基因/P-糖蛋白和β-catenin蛋白的表達，顯著增強耐藥細胞對5-FU的敏感性和5-FU誘導的細胞凋亡。

Zhao等[21]和Tseng等[22]研究結果表明在肝癌細胞系HepG2中，miRNA-27a可通過下調VE鈣黏蛋白表達和抑制上皮-間質轉化，進而抑制腫瘤轉移和血管生成擬態形成。相反，Sun等[23]研究卻發現脂肪組織分泌的miRNA-27a能通過下調轉錄因子FOXO1基因的表達，促進肝癌細胞增殖，進而促進肥胖患者肝癌的發生。除此之外，Chen等[24]也發現，上調肥胖相關的miRNA-27a可通過激活Wnt/β-catenin信號、抑制分泌型FRZ相關蛋白1促進肝癌轉移。

綜上所述，miRNA-27a可增強耐藥細胞的敏感性，降低肝癌細胞耐藥性，抑制肝癌侵襲和轉移，但脂肪組織分泌的miRNA-27a卻能促進肝癌的發生發展，這值得進一步的探究，也為肝癌的治療提供了新的視角。

5 miRNA-27a與肝臟再生

Lan 等[25]研究發現，在兔的肝部分切除模型中miRNA-27a的表達顯著上升，可以誘導轉錄后修飾基因Tmub1表達顯著下調，從而顯著增強肝細胞增殖。因此，可以認為miRNA-27a 在調控肝臟再生方面有一定潛能。

6 miRNA-27a作為肝臟疾病的生物標志物

血液循環中的miRNA可作為診斷肝臟等疾病的生物標志物，有望成為一種新型無創檢測手段。

Zhang等[26]研究發現，與慢性乙型肝炎(CHB)患者相比，miRNA-27a在HBV誘發肝纖維化(hepatitis B virus induced liver cirrhosis，HBC)患者血清中顯著上調，可以作為鑒別HBC與CHB的良好生物標志物。Tak等[27]研究則顯示miRNA-27a、miRNA-27b在肝癌的診斷中具有良好的前景，與癌旁組織相比，肝癌組織的miRNA-27a、miRNA-27b的表達顯著降低。MiRNA-27a可作為活化和發生發展的預測因子。

7 總結與展望

miRNA-27a作為重要的調節因子，可以通過調節脂質代謝、調控炎癥因子、抑制HSC活化以及抑制腫瘤轉移侵襲等作用參與多種肝臟疾病的發生發展。同時miRNA-27a也可作為一種新型生物標志物，幫助肝臟疾病的診斷。縱觀目前的研究可以發現，miRNA-27a與肝臟疾病的主要研究仍然集中在脂質代謝及肝纖維化方面，miRNA-27a可以調節多種脂質代謝因子(如FAS、SCD1等)，促進肝細胞脂肪合成的進程，從而減少脂肪氧化時產生的大量IL-6、TNFα等炎癥因子，減緩細胞氧化應激，達到細胞保護的作用。目前針對脂肪肝的治療，臨床上尚無良好的藥物治療手段。因此，miRNA-27a在脂肪肝領域的研究無疑給研究者們提供了嶄新的視角。此外，miRNA-27a還可以顯著促進HSC的活化，從而誘發肝纖維化的發生。HSC的活化被認為是肝纖維化的核心過程，在HSC活化的過程中，大量如α-平滑肌肌動蛋白及Ⅰ型膠原a1等成膠原基因表達，并且伴隨著上皮-間質轉化過程不斷加重。肝纖維化是肝硬化、肝癌這個連續疾病譜的重要一環，在肝纖維化階段運用合理的治療手段使其逆轉無疑成為了治療肝纖維化甚至肝癌的重要措施。因此，探究逆轉肝纖維化的新靶點，miRNA-27a更是有著重大意義。且miRNA-27a在脂肪肝和肝纖維化領域更是起到了完全相反的作用，這更值得去探討。但是，目前miRNA-27a相關肝臟疾病的研究仍然較少，且大多集中在脂肪肝及肝纖維化、肝癌領域，未能有效進行臨床轉化。目前有限的研究并不能完全闡明miRNA-27a在肝臟疾病中的作用機制。在肝臟炎癥、肝臟再生方面miRNA-27a也有數篇文獻報道，這顯示出miRNA-27a在其他肝病領域也有良好的研究前景。因此，需要更多的深入研究來提供更加確切全面的證據，探索miRNA-27a和肝臟疾病的關系將具有廣闊的前景。